凝集实验

(一)　原理　　目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光激发下产生黄绿色荧光，通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。　　(二)　操作步骤　　　　将纯化 ...

间接凝集反应l 间接血凝反应致敏红细胞的制备：直接法：1．取10%双醛固定的红细胞悬液1ml，离心沉淀后，将压积细胞悬于0.1mol/L、pH4.0醋酸缓冲液5ml中。2．预温后加含适量致敏抗体的醋酸缓冲液5ml，混匀，放37℃20~30min或24℃ 60~75min，其间摇动数次，但不宜剧烈和频繁摇动，以免引起自凝。3．最后用0.11mol、pH7.2 PB洗3次。4．洗涤后的致敏红细胞用保存液配成10%悬液4℃保存或冻干。临用前，用实 ...

当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗 ...

免疫荧光方法中的重要环节1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。3、血清封闭：为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调 ...

酶免疫组化的关键环节1、标本固定：固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原—抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存。固定液的选择和固定时间的决定具体见： http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=12551952&sty=3&keywords=%B9%CC%B6%A8%D2%BA+%D1%A1%D4%F12、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高 ...

1.抗体一抗的选择，二抗的选择2.仪器：恒温培养箱、高压锅、移液器、枪头，摇床、试剂缸等3.试剂：二甲苯、无水乙醇、甲醇、过氧化氢、中性树胶、氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等，血清封闭液、一抗稀释液、DAB显色液，柠檬酸缓冲液等为北京德元国际科技有限公司提供。4.实验步骤1.洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将 ...

一、基本原理吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。二、材料1. ICR小鼠（北京大学医学部实验动物中心提供）2. PBS缓冲液3. 3％硫代乙醇酸钠4. 1％羊红细胞悬液 ...

一、基本原理免疫电泳法是将凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术相结合的一种实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带，然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽，将抗体加入沟槽内，使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状，分析标本中所含各组分的性质，本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊断。二、实验材料1%离子琼脂（pH8.6巴比妥缓冲液加入等量蒸馏水，再加入1%琼脂。溶解后用脱脂棉过滤，分装 ...

免疫器官包括中枢免疫器官和外周免疫器官。在哺乳类动物，中枢免疫器官 包括胸腺和骨髓；在禽类，中枢免疫器官包括胸腺和法氏囊。外周免疫器官有淋 巴结、脾脏等。

迄今为止，抗病毒药物都是以病毒为目标，而京都大学研究生院的一个研究小组9日宣布，他们开发出一种新型化合物，通过遏制病毒宿主体内的酶发挥作用，成功遏制了多种病毒的增殖。这种化合物不仅副作用的风险很小，而且对于抗药性病毒也具有效果，有望作为一种新的抗病毒药物使用。京都大学研究生院教授萩原正敏率领的研究小组注意到，病毒在侵入人体进行增殖时，需要利用人和实验鼠等哺乳类细胞内产生的一种称为"CDK9"的酶。为了遏制CDK ...

呼吸系统包括鼻、咽、喉、气管、支气管和肺等器官。从气管至肺内的肺泡，是连续而反复分支的管道系统。吸呼系统可分为导气部和呼吸部。导气部从鼻腔开始直至肺内的终末细支气管，无气体交换功能，但具有保持气道畅通和净化吸入空气的重要作用。鼻还有嗅觉功能，鼻和喉等又与发音有关。呼吸部是从肺内的呼吸细支气管开始直至终端的肺泡，这部分管道都有肺泡，行使气体交换功能。此外，肺还参与机体多种物质的合成和代谢功能 。

消化腺包括分布于消化管壁内的许多小消化腺（如口腔粘膜小唾液腺、胃腺、肠腺等）和构成器官的大消化腺（唾液腺、胰腺和肝）。大消化腺是实质性器官，外包以结缔组织被膜，被膜的结缔组织伸入腺内，将腺分隔为若干叶和（或）小叶，血管、淋巴管和神经也随同进入腺内。腺分实质和间质两部分。由腺细胞组成的腺泡以及腺的导管为实质；被膜和叶间与小叶间结缔组织为间质。

消化系统由消化管与消化腺组成，主要功能是对食物进行物理性和化学性消化，将大分子物质分解为小分子的氨基酸、单糖、甘油酯等。吸收后供机体生长和代谢的需要。消化管是从口腔至肛门的连续性管道，依次分为口腔、咽、食管、胃、小肠和大肠。这些器官的管壁结构具有某些共同的分层规律，又各具有与其功能相适应的特点。 　

内分泌系统（endocrine system）是机体的重要调节系统，它与神经系统相辅相成，共同调节机体的生长发育和各种代谢，维持内环境的稳定，并影响行为和控制生殖等。内分泌系统由内分泌腺和分布于其它器官的内分泌细胞组成。内分泌细胞的分泌物称激素（hormone）。大多数内分泌细胞分泌的激素通过血液循环作用于远处的特定细胞，少部分内分泌细胞的分泌物可直接作用于邻近的细胞，称此为旁分泌（paracrine）

皮肤（skin）的面积为1.2－2m2,约占体重的8%，是个面积广大的器官。皮肤由表皮和真皮组成，借皮下组织与深部的组织相连（图10－1）。皮肤内有毛、指（趾）甲、皮脂腺和汗腺，它们是由表皮衍生的皮肤附属器。皮肤直接与外界环境接触，对人体有重要的保护作用，能阻挡异物和病原体侵入，并能防止体内组织液丢失。皮肤内有丰富的感觉神经末梢，能感受外界的多种刺激。此外，皮肤对调节体温也起重要作用。 　

免疫系统（immune system）是机体保护自身的防御性结构，主要由淋巴器官（胸腺、淋巴结、脾、扁桃体）、其它器官内的淋巴组织和全身各处的淋巴细胞、抗原呈递细胞等组成；广义上也包括血液中其它白细胞及结缔组织中的浆细胞和肥大细胞。构成免疫系统的核心成分是淋巴细胞，它使免疫系统具备识别能力和记忆能力。淋巴细胞经血液和淋巴周游全身，从一处的淋巴器官或淋巴组织至另一处的淋巴器官或淋巴组织，使分散各处的淋巴器官和 ...

循环系统是连续而封闭的管道系统，包括心血管系统和淋巴系统两个部分，心血管系统由心脏、动脉、毛细血管和静脉组成。心脏是输送血液流动的泵，心脏搏出的血液经动脉到毛细血管，毛细血管的管壁薄，血液在此与周围组织进行物质交换；静脉起始端也参与物质交换，但主要是将物质交换后的血流到心脏。淋巴管系统是一个辅助的循环管道，由毛细淋巴管、淋巴管和淋巴导管组成。毛细淋巴管为淋巴管系统的起始部分，位于组织中，进入毛细淋巴管的 ...

神经组织（nerve tissue）构成神经系统。神经系统分中枢神经系统（脑与脊髓）和周围神经系统（神经和神经节）两大部分，两者是相互联系的整体。神经组织是由神经细胞（nerve cell）和神经胶质细胞（neuroglial cell）组成的，它们都是有突起的细胞。神经细胞是神经系统的结构和功能单位，亦称神经元。神经元数量庞大，整个神经系统约有1011个，它们具有接受刺激、传导冲动和整合信息的能力。神经元的突起以特化 ...

肌组织（muscle tissue）主要由肌细胞组成，肌细胞之间有少量的结缔组织以及血管和神经，肌细胞呈长纤维形，又称为肌纤维（muscle fiber）。肌纤维的细胞膜称肌膜（sarcolemma），细胞质称肌浆（sarcoplasm），肌浆中有许多与细胞长轴相平行排列的肌丝，它们是肌纤维舒缩功能的主要物质基础。根据结构和功能的特点，将肌组织分为三类：骨骼肌、心肌和平滑肌。骨骼肌和心肌属于横纹肌。骨骼肌受躯体神经支配 ...