化学生物学实验技术

（二）分离液1、肌细胞分离液配方一 马克凯郎（Maccallum）液取1份浓硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到马克凯郎液。把新鲜的肌肉组织小块（横纹肌、心肌和平滑肌）投入这种溶液里浸渍，分离时间需1～3日。这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。配方二 氢氧化钾溶液取35克氢氧化钾，放在100毫升蒸馏水中，加热，使它完全溶解后，在室温下冷却。把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中，浸泡15～30分钟 ...

成分：　牛肉膏　　　　　　5g　　蛋白胨　　　　　　10g　　氯化钠　　　　　　3g　　磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)　　2g　　0.2%滇麝香草酚蓝溶液　12mL　　蒸馏水　　　　　　1000mL　　pH7.4制法：　1葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。　　2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100 ...

成分：　　磷酸氢二钾　　5g　　多胨　　　　　7g　　葡萄糖　　　　　5g　　蒸馏水　　　　　1000mL　　pH7.0制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL，121℃高压灭菌15min。甲基红(MR)试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。甲基红试剂配法：10mg甲基 ...

成分：　　蛋白胨　　　　　　　　　　　　　　 2g　　氯化钠　　　　　　　　　　　　　　 5g　　磷酸氢二钾　　　　　　　　　　　　 0.3g　　琼脂　　　　　　　　　　　　　　　 4g　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　 10g　　0.2%溴麝香草酚蓝溶液　　　　　　　 12mL　　蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　 1000mL　　pH7.2制法：将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正pH至7.2。 ...

成分：　　蛋白胨　　　　　5g　　牛肉膏　　　　　3g　　明胶　　　　　　120g　　蒸馏水　　　　　1000mL　　pH6.8～7.0制法：加热溶解、校正至pH7.4～7.6，分装小管，121℃高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其凝固。复查最终pH应为6.8～7.0。试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在22～25℃培养，每天观察结果，记录液化时间。或放在36士1℃培养，每天取出，放冰箱内30 ...

成分：　　牛肉膏　　　　　　 3g　　酵母浸膏　　　　　 3g　　蛋白胨　　　　　　 10g　　硫酸亚铁　　　　　 0.2g　　硫代硫酸钠　　　　 0.3g　　氯化钠　　　　　　 5g　　琼脂　　　　　　　 12g　　蒸馏水　　　　　　 1000mL　　pH7.4制法：加热溶解，校正pH，分装试管，115℃高压灭菌15min，取出直立候其凝固。试验方法：挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺，于36±1℃培养 ...

成分：　　蛋白胨(或胰蛋白胨)　 20g　　氯化钠　　　　　　　 5g　　蒸馏水　　　　　　　 1000mL　　pH7.4制法：按上述成分配制，分装小试管，121℃高压灭菌15min。靛基质试剂柯凡克试剂：将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。然后缓慢加入浓盐酸25mL。欧－波试剂：将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内。然后缓慢加入浓盐酸20mL。试验方法：挑取小量培养物接种，在 ...

成分：　　蛋白胨　　　　　 10g　　氯化钠　　　　　 5g　　磷酸二氢钾　　　 0.225g　　磷酸氢二钠　　　 5.64g　　蒸馏水　　　　　 1000mL　　0.5%氰化钾溶液　 20mL　　pH7.6制法：将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1∶10000)，分装于12mm×1 ...

成分：　　硝酸钾　　　　　　　　 0.2g　　蛋白　　　　　　　　　 5g　　蒸馏水　　　　　　　　 1000mL　　pH7.4制法：溶解，校正pH，分装试管，每管约5mL，121℃高压灭菌15min。硝酸盐还原试剂：　　甲液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。　　乙液：将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。试验方法：接种后在36±1℃培养1～ ...

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 ...

透析即用半透膜（透析袋）将大分子蛋白质分离出来。在生物大分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品，透析法最简便。 　　技术指标：MWCO（截留分子量），单位：Diatoms 。 　　透析时，小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜，其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。常用温度：4℃，升温、更换袋外透析液 ...

试剂：2%儿茶酚溶液。　　3%过氧化氢溶液。试验方法：挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL。静置于室温(20℃)中30～60min，观察结果。结果：阳性反应，细菌变为黑褐色；阴性反应，细菌不变色。注：过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。 ...

一般用试剂来测试从人体中取出的标本(血、尿、便等)叫检验检查。而用心电图、B超、X线等手段来检查人体结构状况的检查叫物理检查。心电图：用于记录心脏电生理活动情况。心脏的疾病很复杂，要诊断心脏的某种疾病需要许多相关检查。心电图中常见的T波改变、S-T段压低仅仅轻度的有可能提示冠状动脉供血不足，不能轻易的下什么结论。如出现心律失常情况，请咨询专科医生。B超：是一种超声波，是二维的，以切面提示人体组织结 ...

检测方法对于探针和靶序列杂交之后的检测，我们通常使用碱性磷酸酶（AP）耦联的抗体，采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中，我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测，NBT/BCIP用于显色法检测。同时，对于膜杂交中的化学发光信号的检测，建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。检测底物即用型CDP-Star碱性磷酸酶作用于CDP-Star底物，产生的光信号被X胶片（例如： ...

做生物实验的人对琼脂和琼脂糖一定都不会陌生。不过要让你说出它们两者的区别，我想不少人都会支支吾吾。反正不一样呗，培养基用的是琼脂粉，电泳用的是琼脂糖。具体有啥学问，听我一一道来。先来说说琼脂，它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar，意思是胶状物。中国人亦称为洋菜或冻粉。日本人称之为寒天（kanten），因为它在冬天收获。台湾人叫它菜燕，和燕窝的质感差不多。韩国人的叫法是한천（ ...

标记DNA探针如果您有足够量的高纯度模板，建议您采用随机引物标记方法的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I 和II。这两个试剂盒包含了标记、封闭、杂交和检测所需要的所有试剂，是真正意义上的一站式服务的试剂盒。二者之间的差别在于检测方法的不同：Starter Kit I采用了显色法，使用显色底物 NBT/BCIP；而Star ...

罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射性标记技术的公司之一。罗氏专利的地高辛产品上市近二十年，尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域，尽管有定量PCR技术的应用，该系统仍然是非放射性高效标记-检测技术的首选，被广泛地应用到各种膜杂交及原位杂交技术中。技术原理： 地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物（毛地黄和毛花毛地黄）中提取的类固醇（Steroid）物质—— Digoxigenin （DIG），其 ...

核酸探针已被广泛用于筛选重组克隆、基因多样性的种性检测和真菌种群内及种群之间的系统发育关系评价。最早使用的放射性同位素标记核酸探针具有敏感性高、特异性好、分辨力强的特点，但放射性同位素标记也存在着一系列令人困扰的问题如成本高、探针半衰期短、放射性物质危害人体健康等。而且在进行放射性同位素标记实验时需要有专门的实验室及相应的实验保护设施，还需要由经过培训的专业人员来操作因而限制了在普通实验室进行分子 ...

原子吸收分光光度法是基于元素所产生的原子蒸气中待测元素的基态原子，对所发射的特征谱线的吸收作用进行定量分析的一种技术，常用的定量方法有：　　1.标准曲线法：将一系列浓度不同的标准溶液按照一定操作过程分别进行测定，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。在相同条件下处理待测物质并测定其吸光度，即可从标准曲线上找出对应的浓度。由于影响因素较多，每次实验都要重新制作标准曲线。　　2.标准加入法：把待 ...