细胞功能测定

相关专题 原代细胞冻存技术： 1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前一天换液一次。 2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。 3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。 4、沉淀加含DMSO的培养液，计数，调整至(1-10)×106 /ml。 5、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。 6、密封冻存 ...

相关专题 一)从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞 1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠，或3公斤左右的家兔)，剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml，家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3～4天以后收集腹腔细胞。 2.如要收集腹腔静置巨噬细胞，不注射刺激物，直接从这一步开始。放血处死动物，以减少腹腔 ...

相关专题 一、实验原理 细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可 ...

相关专题 MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝 ...

相关专题 研究复杂的细胞和组织，及其信号传导与调控可不是件容易事。而模拟细胞或组织环境，建立最接近体内天然条件的实验系统同样困难。这就是3D细胞培养所面临的挑战，3D培养系统旨在更好的模拟细胞的体内生长环境，为其创造更天然的家。近来越来越多的证据表明，3D细胞培养系统比传统2D培养系统更贴近体内的生理条件。也许3D培养系统的最大价值在于，其 ...

相关专题 一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工，例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的形成或者由特异性蛋白酶进行的裂解等等，而这些加工原核细胞则无能为力。需要表达具有 ...

相关专题 Hanks 液是生物医学实验中极为常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solutions简称 BSS)之一，简称HBSS。主要用途是用于配制培养液，稀释剂以及细胞清洗液，但是不能单独作为细胞/组织培养液。本详细表述了Hanks 液平衡盐溶液的配制方法和步骤。 ...

相关专题 细胞增殖检测的应用相当广泛，不论是测试药物试剂还是生长因子的效果，不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态，您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。细胞增殖检测主要分为四类：DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。在这些方法中作何选择，主要取决于您所研究的细胞类型和 ...

相关专题 本人最近做PC12细胞培养实验，在接种前需将培养皿用多聚赖氨酸包被，于是到各个网站搜索了一下，发现这方面的实验经验分享真不少，深感好东西不能放在一边发霉，于是特地整理一遍拿来与大伙分享，可能有那么一点点乱，不过都是做这方面的同学肺腑之言，希望与后来者共勉。 注：我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位战友。 一、常用 ...

相关专题 多聚赖氨酸因具有强烈的抑制细胞能力而成为明胶之外的细胞包被的重要溶液。不过，你知道具体的实验怎么做，溶液怎么配，怎样铺板子，怎样消毒，怎样辨别吗?如果不太清楚，请看下文： 问：我要培养原代神经细胞培养，要用多聚赖氨酸铺细胞培养板，请问赖氨酸液怎么配，怎样铺扳子 答：配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸 ...

相关专题 大家常把细胞凋亡和细胞坏死混淆，其实两者是不同的细胞死亡形式，大家可以在死亡细胞的形态、生化和分子指标上将二者区分开来，细胞凋亡检测的方法不少，这里就总结下7种常用的检测方法。 细胞凋亡检测更多详情，点击查看不可不知的细胞检测方法——MTT 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态 ...

相关专题 细胞周期测可以反应细胞增殖的速度，细胞周期测定的方式有很多，这里总结下BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)渗入法测定细胞周期的原理与操作步骤。 一、原理 细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故 ...

相关专题 TUNEL是检测细胞凋亡常用方法，主要是利用DNA断裂产生的3’-OH末端可与地高辛结合，地高辛可与过氧化物酶结果，利用适当底物，过氧化物酶会产生颜色反应，最后通过显微镜可以定位并观察凋亡细胞。 细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段.然后大约30 ...

相关专题 细胞凋亡发生时，内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA，但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割，单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构，可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 (一) 原理 细胞凋亡的发生，是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H ...

相关专题 流式细胞仪是检测悬浮的单细胞或微粒的信号分析技术，被誉为实验室的“CT”，可用于细胞凋亡检测、细胞分选、单细胞内细胞因子表达分析等。这里简单介绍下流式细胞仪检测细胞凋亡的两种方法。 第一部分 流式细胞仪检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法 一、基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降.细胞一 ...

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相关专题 本实验以鸡血为材料，将红细胞放置到不同的溶质溶液中，通过引起红细胞溶血时间不同，初步了解不同溶质进入细胞膜的速度情况，具体步骤如下： 一、实验目的： 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 二、实验原理： 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使 ...

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