细胞功能测定

相关专题 操作程序： 1、倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色，是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。 2、开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。 3、使用 (1)准备：将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器，选择较小的物镜。观察， ...

相关专题 一、操作规程： 1、接通电路，开启开关; 2、数秒钟后，调节灯的强度至合适亮度; 3、使用后，将灯的亮度调至最小; 4、关闭开关，拔下电源插座，套上防尘罩; 5、放回仪器原始存放处，并登记实验仪器使用记录本。 二、注意事项： 1、显微镜安放在坚固平坦的桌面或工作台上，不要在有阳关直射、高温或高湿、多尘以及容易受到强烈振动的地方使用 ...

相关专题 CO2培养箱广泛应用于医学、免疫学、遗传学、微生物、农业科学、药物学的研究和生产，已经成为上述领域实验室最普遍使用的常规仪器之一，其通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如恒定的酸碱度(pH值：7.2～7.4)、稳定的温度(37℃)、较高的相对湿度(95%)、稳定的CO2水平(5%)，来对细胞/组织进行体 ...

相关专题 细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养室的常规 ...

相关专题 通常情况下，分子生物学研究都是针对组织样本或者一个细胞群来进行。然而，组织样本中一般包含多种类型的细胞，即使来自于同一个细胞群的各个细胞间的基因水平、表达水平会存在不同程度的差异，互为异质细胞。以组织或细胞群为起始样本的研究，可能会因为细胞异质性而获得错误的结果。以肿瘤发生为例，肿瘤的发生是单细胞中多种突变积累演化的结果，一个肿瘤 ...

相关专题 293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因，治疗恶性肿瘤，心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质，如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293细胞的大规模培养技术具有越来越重 ...

相关专题 基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品 ...

相关专题 (一)培养板的清洗和消毒 培养板一般为一次性使用，尤其在接触了有毒、有害等物质后更应该处理后丢弃。但如果要反复使用则一定要进行正确的清洗和消毒，以保证细胞培养的效果。 问：只有紫外照射可以保证无菌吗?可不可以从清洗方面做点工作? 答：看你什么用途了，一般贴壁生长的细胞用重复利用的培养板效果不是很好，因为培养板表层在生产时涂有一层促 ...

相关专题 在细胞复苏过程中，有多次复苏失败，最终在查阅了相关技术积累了足够的复苏技能后复苏成功，现将细胞复苏的操作程序和注意事项总结如下，望能为同行提供些参考。 【材料】 1.常规细胞培养仪器设备、恒温水浴振荡器。 2.培养液(DMEM)胎牛血清(CBS)二甲基亚砜(DMSO)。 【操作程序】 1.细胞实验室进行常规消毒，紫外照射40min ...

相关专题 第一，盖玻片需要过酸，并且自来水、蒸馏水冲洗干净。两张或者以上的玻片很容易因为虹吸作用粘到一起，很容易冲不干净，很容易把两张完全重叠在一起的玻片当成一张，一定要看清楚，晾干片子最好是在消毒饭盒中进行，饭盒底面放上纱布，将玻片斜靠在饭盒侧壁，玻片正面不要接触纱布，否则会粘上毛毛的。然后高压蒸汽灭菌，烤箱中烤干。 第二，爬片前最好用多 ...

相关专题 1.观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。 2.加热PBS、versene、培养基，(提前做好) 瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。 3.打开超净台(先开风机，后开照明)，用75%乙醇清洁台面，点燃酒精灯。不要把废液缸拿出去倒，如果废液太多，可以用其他容器先装废液。取小离心管一个，置于架 ...

相关专题 1.细胞爬片; 2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮); 3.PBS漂洗5min; 4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理); 5.PBS漂洗2次，每次5min; 6.1%BSA封闭30min; 7.加入1%BSA稀释的一抗，于37℃杂交2h; 8.PBS漂洗2次，每 ...

相关专题 血细胞由红细胞白细胞血小板等组成.实验中常用白细胞来做研究如炎症渗出细胞迁移识别等都涉及到白细胞.白细胞又分为:粒细胞淋巴细胞单核细胞等.它们具有不同的功能.实验中常需要分离血细胞方能进行。 这里主要论述人外周白细胞的分离，主要是中性粒细胞(Neutrophil)，淋巴细胞(Lymphocyte)，单核细胞(Monocyte)的分 ...

相关专题 我是做临床的，07年毕业。06年完成老板的RNA干扰体内体外课题，实验花了7个月，大家都说我神速，我也觉得也是快了些，呵呵，看到其他同学忙得没结果，我觉得我是幸运的。自己还得了优秀毕业论文。在感激老天眷顾、高兴之余我想和大家分享自己做实验的体会： 一、在选题方面要注意：根据自己实验条件，来选择实验内容及检测指标，这一点很重要，好多 ...

相关专题 一、血清灭活问题。 1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗? 答：不是必须的，看做什么实验了。 2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗? 答：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞，如内皮细胞，血清是需要灭活，一般是56℃，30min。 ...

相关专题 一、关于血清使用的几点建议： 1、血清必须贮存-20℃，如存放于4℃，请勿超过两周，对于某些单位一次无法用完一瓶，可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中(或血清瓶中)，由于血清解冻时体积会增加10%，必须预留此膨胀体积的空间，否则易发生污染或容器冻裂的情形。 2、一般公司所提供的血清一般为200ml和500ml ...

相关专题 问：G418筛选预实验用未转染的细胞做，选10-14天内细胞死亡的最小浓度，然后将更高一级别的浓度应用于转染的细胞，是这样吗? 答：G418是一种细胞毒性药物(氨基糖苷类抗生素)，依不同浓度，对细胞有一定的抑制或杀伤作用，而拟转染的质粒上带有G418的药代酶，能降解G418，从而使细胞获得对G418的耐药性。也就是说转染后的细胞可 ...

相关专题 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶的制备至关重要，凝胶制备不均，好好的样品就给糟蹋了，以下是SDS-PAGE胶凝胶的制备步骤。 如何配制SDS-PAGE胶凝胶的制备过程： 1、 按要求装配好垂直电泳板，两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边，防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。 2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45～60℃角 ...

相关专题 一、实验目的 学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白)，为染色准备实验材料。 基因转染示意图 二、实验原理 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂 ...

相关专题 1、简介 冷冻蚀刻(freeze-etching)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的干冰在真空中升华，而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。当大量的干冰升华之后，对浮雕表面进行铂一碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料，复型经重蒸水多次清洗后，捞在载网上作电镜观察。 2 ...