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相关专题 总有一种转染方法适合你 编者按:RNAi是目前研究的热点,作为一种快速silence基因的重要方法。但如何制备siRNA是主要问题之一,目前至少有以下五种方法:化学合成(价格贵),体外转录制备siRNA;体外转录合成长链RNA,通过dicer或RNase III降解为短片段的siRNA;siRNA表达载体在体内生成siRNA;PCR ...
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相关专题 细胞培养基的配制 Serologicals公司于7月26号宣布它的全资子公司Celliance引入了Onco-CYTE(TM)产品。Onco-CYTE(TM)是一种不需要血清的、替代含有胎牛血清(FBS)液体培养基的培养基,它可以用于许多癌症细胞株和一些生物培养的应用。 Onco-CYTE(TM)是EX-CYTE®家族的第二个产品。 ...
相关专题 IFN-α逆转白血病细胞耐药性的实验研究 第三军医大学学报1999年第21卷第3期张勇 张翼军 夏顺中 周成康 提 要 目的:了解干扰素-α(IFN-α)逆转白血病细胞多药耐药性(MDR)的作用和可能机制。方法:采用链亲和素-胶体金原位杂交(SAG-ISH)检测了IFN-α孵育前后的52例白血病患者骨髓细胞的多药耐药基因(MD ...
相关专题 1. 如何选用特殊细胞系培养基? 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 2. 何时须更换培养基? 视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。 3. ...
相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm我现在的方向其实是生物医用材料,我对一次性生物材料的性质还算比较了解。对培养瓶、培养板的重复使用简单的说两句。 一般培养瓶、培养板、培养皿的材质都是生物相容性的聚苯乙烯,且要求具有 ...
相关专题 细胞融合(Cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代 60年代到70代作为一门新兴的技术 发展非常快 应用范围也极为广泛 除了同种类细胞间可以融合 种间远缘细胞也能融合 细胞与组织不同 ...
相关专题 摘要:据文献报道c2erbB22可以介导细胞凋亡 为检验这一结论是否具有普遍性 用52氟尿嘧啶(52Fu) 诱导小鼠成纤维细胞NC3H10 TC3H10及人乳腺癌细胞MCF27的凋亡. 用Northern印迹法检测c2erbB22的表达状况1结果显示: c2erbB22基因表达在52Fu 作用6 h 开始降低 12 h降低更为明显. ...
相关专题 1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。 2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。 3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。 4.甲醇/醋酸固定10min。 5.经固定的玻片空气干 ...
相关专题 材料与方法 1. 主要试剂:MTT、XTT、PMS、DMSO(Sigma公司产品),RPMI 1640(Gibco公司),氟尿嘧啶(上海旭东海普药业有限公司),注射用盐酸阿霉素(深圳万乐药业有限公司),注射用丝裂霉素C(协和发酵工业株式会社),新生小牛血清(杭州四季青公司提供)。 2. 细胞与细胞培养:人肝癌细胞系 BEL ...
相关专题 1.体外细胞培养结束后,去培养液,加入11%的戊二醛固定,置于振荡器上摇20min。 2.固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。 3.置空气或烘箱37℃彻底干燥。 4.加入0.1%的结晶紫液对细胞染色,振摇30min。 5.用蒸馏水洗涤,至多余的结晶紫液冲洗干净。 6.置空气或37℃烘箱中彻底干燥。 7.加入10%的乙酸对细胞吸收的 ...
相关专题 1.用含10%小牛血清和抗生素的RPMI-1640培养液将K562细胞配成1×105/ml浓度。用同样培养液将PBMC配成1×106/ml浓度。 2.取96孔圆底细胞培养板,每孔加0.1ml K562细胞悬液;每孔加适量PBMC使效靶比为1:1~5:1,每种处理3个复孔;3个对照孔只加效应细胞;8个对照孔只加靶细胞;4个对照孔只加细 ...
相关专题 1)用淋巴细胞分离液分离PBMC 1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。 2.离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离液的交界面。收集PBMC,用PBS洗涤细胞两次,每次离心150×g 10分钟。低速离心可以减少血小板沉淀,但细胞沉淀 ...
相关专题 根据调亡的生化特征的检测方法 一、琼脂糖凝胶电泳 1)常规的琼脂糖凝胶电泳 方法一: 1.收集细胞(5×106)1000r/min,离心5min,去上清。 2.PBS洗一次,1000r/min,离心5min,去上清。 3.加细胞核裂解液500μl重悬细胞,50℃水浴,3~5h,不时振摇或37℃过夜。 4.加0.5ml平衡酚抽提,上下 ...
相关专题 细胞培养基的配制 杨等使用的bioreactor实际上是一种组织生长设备(tissue-growing device),能够用于培养成人干细胞,并且能够使研究人员对培养过程中的每个胚胎干细胞进行紧密跟踪。新型bioreactor有两个格室(chamber),一个格室内包含可以支持干细胞生长的高聚物螺纹,一个格室内含有液态培养基。这种 ...
相关专题 一、实验目的:初步掌握供体-受体原生质体融合产生胞质杂种的方法,了解胞质杂种产生的原理和意义。二、实验原理:体细胞杂种有核杂种(nuclear hybrid)和胞质杂种(cybrid)之分。前者指双亲完整原生质体的融合产物,后者是指一亲本的去核原生质体,(即胞质体cytoplast)与另一亲本完整原生质体融合的产物,胞质杂种一般只具 ...
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相关专题 细胞培养基的配制 Cambrex公司最近推出一款改良后新型的Poietics(TM)前脂肪细胞生长培养基试剂盒(Preadipocyte Growth Media Kit,PGM-2),此培养基用于培养人类前脂肪细胞用于肥胖、胰岛素抗性、II型糖尿病、验证和相关心血管疾病研究的。 Poietics的PGM-2培养基比起其它商业化的培 ...
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