细胞功能测定

体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作：实验采用胚胎龄14一16天的大鼠，剖子宫取胎，取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起，置Fl2培养基（Gibco）至35mm的培养皿中，以细剪刀剪碎。将2ml含0.125％的胰酶的F12加入到组织中，该混合物于37oC孵育10分钟后，加入DNase I（Sigma）至终浓度80ng／m1，继续于37oC孵育10分钟。消化后的组织以 ...

体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作：实验采用胚胎龄14一16天的大鼠，剖子宫取胎，取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起，置Fl2培养基（Gibco）至35mm的培养皿中，以细剪刀剪碎。将2ml含0.125％的胰酶的F12加入到组织中，该混合物于37oC孵育10分钟后，加入DNase I（Sigma）至终浓度80ng／m1，继续于37oC孵育10分钟。消化后的组织以 ...

取出生1-2d的乳鼠，用麻醉剂处死。在D-hanks液中取大脑并分离海马组织，胰蛋白酶消化，获得细胞悬液，胎盘蓝染色进行死活细胞记数，将细胞以5×105/ml的密度接种于预先经L-多聚赖氨酸处理的96孔和24孔培养板其中24孔板中预先放置有盖玻片。细胞维持在培养液中，置入5%CO2，饱和湿度的培养箱中培养，24h后全换液，接种当天为第一天每3d半量更换培养液一次，培养第3天时加入阿糖胞苷终浓度为1 ...

原代心肌细胞培养及APC模型的制作参照先前报道的方法。即取出生后1－2 d乳鼠心尖部组织 胰酶消化 离心后用含20%小牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液 过滤 按差速贴壁分离法纯化心肌细胞 以1×105 cells/cm2接种于24孔板 每24 h更换培养液。贴壁生长2 d 于实验前24 h更换为无血清DMEM培养基 随机分组 每组双平行孔 重复4次操作。缺氧/复氧(anoxia/reoxygen ...

抑郁等精神疾患的发生可能与过量GC对海马的选择性损伤有关但机理不明Heuser和Cosi等报道可能是由于高浓度GC导致神经营养因子表达水平降低造成的而抗抑郁剂不仅使GC受体上调HPA轴反馈恢复正常而且使神经营养因子表达升高达到治疗目的.PC12细胞株为大鼠嗜铬细胞克隆化细胞株分化的PC12细胞有典型的神经细胞特征其胞膜上GC受体表达丰富.本文根据文献方法以高浓度皮质酮(corticosterone ...

材料和方法1 试剂:胎牛血清(北京军医兽医防治中心) DMEM培养液(GIBCO 美国) 碘化丙啶PI(Sigma) Triton2X100 (BDH) Hoechst33342(Sigma) RNase (Sigma) 。2 细胞及实验分组:人角质形成细胞株Colol6 (由北京师范大学生物系提供) 。分单纯对照、单纯照射、给药后照射、照射后给药4 组。给药后照射组为在照射前24 h 给药照射后 ...

一、材料：125I-UdR购自中科院北京原子能所，放化纯度95%。脱氧腺苷（AdR）、脱氧鸟苷（GdR）、脱氧胞苷（CdR）、脱氧尿苷（UdR）均为Sigma公司产品。二、方法1、细胞培养：当癌细胞贴壁生长超过瓶壁的70%，用胰蛋白酶消化30-40s，传代培养。肿瘤细胞每3-4d传代1次。在50ml培养瓶中，细胞数达2×106个细胞后，取处于对数生长期的细胞进行细胞存活实验。2、细胞存活实验：将制 ...

1）取新生一周内大鼠，碘酒、酒精浸泡消毒后快速断头；2）用眼科剪和镊剪除皮肤和颅骨，分离皮肤和颅骨时用不同的器具，弯剪剪取部分大脑皮层至60mm培养皿，培养皿内提前放置D-Hanks溶液；3）解剖镜下取出脑膜及血管，转移组织至另一盛有D-Hanks溶液的器皿，将组织剪碎为1mm3左右的小块，然后小心转移至带螺帽的离心管内；4）0.125%胰酶消化15-30分钟，以含10%胎（小）牛血清的DMEM培 ...

1. 高脂＋STZ法：ＳＤ大鼠购进后适应环境2周。随机分为3组:正常对照组、高脂饮食组和高脂饮食+ＳＴＺ组每组10只。正常对照组:喂以普通饮食其中碳水化合物60%蛋白质22%脂肪10%其他8%。高脂饮食组及糖尿病组:喂以高脂饮食其中碳水化合物40%蛋白质13%脂肪40%其他7%。糖尿病组高脂饮食喂养4个月后一次性腹腔注射ＳＴＺ15ｍｇ (ｋｇ・ｂｗ)其他两组腹腔注射柠檬酸缓冲液并继续高脂喂养。注射 ...

采用美国Radnoti公司Langendorff离体心脏灌流系统，观察离体心脏功能变化，可排除其它组织器官、循环代谢产物的干扰。实验步骤：A.配制37℃ K-H液（1.25 CaCl2，130 NaCl，5.4 KCl，11 葡萄糖，0.5 MgCl2，0.5 NaH2PO4及25 NaHCO3），向K-H液中通入95％O2-5% CO2气体，缓冲液PH 值为7.4，并取部分K-H液放入冰箱中 ...

所选动物：大耳白兔，体重1－3KG。复制方法：采用腹部敷贴法感染采自钉螺的血吸虫尾蚴。兔腹部剪毛，约1CM2，滴以含尾蚴液，使每只兔感染180－200只尾蚴，玻片覆盖15MIN形成机型感染，3个月后形成血吸虫性肝纤维化。模型特点：肝内门静脉分支与门脉区纤维增生，门脉周围硬化产生门脉阻塞。该模型门静脉系统血流动力学改变明显，故非常适用于门静脉高压症的研究。但是不适用于其他类型人类肝纤维化。 相关动物 ...

1 　材料　地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco Lot :12885655) ; 四甲基氮唑盐(MTT) ( FLUKA Switzerland) ;FLUO-3/ AM(CALBIOCHEMC ...

细胞活化� 1. 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞 株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于�70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。 2. 冷冻细胞解冻程序: 2.1. 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比 例， 制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之 血清种类， 若因实验需要， 必须有所不同 ...

细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响，有利于单因子分析；三是研究的样本可以达到比较均一性。常用的细胞系均是性质均一的细胞，需要时还可采用克隆化等方法使细胞进一步纯化；四是研究的内容便于观察、 ...

一、反复冻融法：1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C 冷冻30 min，370C 解冻，如此反复3次，可形成细胞裂解液。4、用液氮冻融三四次就可以了，细胞冻 ...

1. start with freshly drawn human blood not older than 8 hours treated with an anti-coagulant (use 500ul of 2.7% EDTA for 10ml blood if you are not using EDTA coated tubes when collecting blood)2. dil ...

染色体分裂指数低：患者处于非常时期（感染期、放、化疗期）：　　　　　　　　　　　培养基营养成份不良；　　　　　　　　　　　培养基PH偏低或偏高；　　　　　　　　　　　PHA过量或不足；　　　　　　　　　　　小牛血清质量不高；　　　　　　　　　　　小牛血清数量偏低或过高；　　　　　　　　　　　培养温度不稳定； 　　　　　　　　　　　培养箱温度偏低；　　　　　　　　　　　秋水仙素处理时间过短；　　　　 ...

Preparing 48-Well Plate FeedersFrom the Laboratory of Dr. Allan Bradley Baylor College of Medicine Houston Texashttp://www.imgen.bcm.tmc.edu/molgen/labs/bradley/48plate.txt Preparing 48-Well Plate Fee ...

概述树突状细胞（DC）的主要功能是吸收抗原，进行加工，并向T淋巴细胞呈递。其它抗原呈递细胞也有此功能，如B淋巴细胞和单核细胞。但是，与其它细胞不同的是，DC细胞具有诱导初发免疫反应的独特功能，例如，可以活化处女T细胞（Naive T cell）。DC细胞存在于外周淋巴组织中，已在血液和非淋巴器官中发现了不同类型的DC细胞，并被认为是淋巴组织中细胞的前体。由于血液和组织中DC细胞含量少，且缺乏特异的 ...

目前尽管Alzheimer病(AD)的分子遗传学和分子生物学的研究中发现了4种与AD有关的基因如APP的突变、AD3、STM2、ApoE等，但导致AD发病的关键机理尚不很清楚而建立与之互为因果的真正AD模型尤为重要。本实验采用MR I、γ2刀立体定位射频热凝损毁老年猴脑的穹隆2海马伞并通过检测其tau及APP蛋白、乙酰胆碱酯酶( acethyl2cholinesteraseAchE) 、胆碱乙酰转 ...