细胞功能测定

从真核细胞核中分离出的一种蛋白质 最早是Laskey等人于1978年在非洲爪蟾卵的浸出液中发现的。核质蛋白在细胞质中合成后就通过核定位信号运送到细胞核 是一种丰富的核蛋白 在核小体的装配中起作用。核质蛋白的作用在于既能促进组蛋白与DNA的相互作用形成核小体 又能避免DNA与组蛋白间因强静电吸引而形成非特异结合的不溶性聚合物 但它本身并不参与核小体的组成。核质蛋白具有头尾两个不同的结构域 由5个 单 ...

分子伴侣是细胞中一大类蛋白质 是由不相关的蛋白质组成的一个家系，它们介导其它蛋白质的正确装配，但自己不成为最后功能结构中的组分。分子伴侣的概念有三个特点:①凡具有这种功能的蛋白 都称为分子伴侣 尽管是完全不同的蛋白质;②作用机理是不清楚的故用了“介导”二字以含糊其辞“帮助”二字可理解为: 通过催化的或非催化的方式 加速或减缓组装的过程 传递组装所需要的空间信息 也可能抑制组装过程中不正确的副反应。 ...

分子伴侣一定不是最终组装完成的结构的组成部分 但不一定就是一个独立的实体。如一些蛋白水解酶的前序列以及一些核糖核蛋白体的加工前的部分对于这些酶的折叠和成熟是必需的 将它们称为分子内伴侣。这些位于信号肽和成熟蛋白之间的前序列 不仅抑制酶原蛋白的活性 还作为分子伴侣帮助酶原蛋白折叠。去除前序列 剩余部分便会形成稳定的中间物 既不沉淀 也不折叠;加入前序列才能折叠成活性构象。与一般的分子伴侣相比 分子内 ...

染色质最早是1879年Flemming提出的用以描述核中染色后强烈着色的物质。现在认为染色质是细胞间期细胞核内能被碱性染料染色的物质。主要是由DNA和蛋白质组成的复合物。

又称非重复序列 在一个基因组中一般只有一个拷贝。真核生物的绝大多数结构基因在单倍体中是单拷贝或几个拷贝(1～5个拷贝)。 ...

染色体是细胞在有丝分裂和减数分裂过程中由染色质聚缩而成的棒状结构。染色体和染色质在化学本质上没有差异 只是在构型上不同 是遗传物质在细胞周期不同阶段的不同表现形式。 ...

拷贝数在10个以上的序列称为重复序列。根据基因的重复程度 可以分为两类: 中度重复序列 重复次数在102 ～105 之间 如组蛋白基因、rRNA基因均属此类 虽然都能转录，但除了组蛋白基因外，其它基因都不能翻译; 高度重复序列 重复次数在105 以上。高度重复序列DNA通常由简单的核苷酸序列组成分布在染色体的着丝粒区和端粒区。 ...

线性染色体两端的特殊序列，这种序列广泛分布在原生动物、真菌、植物和哺乳动物的染色体中，并且在序列组成上十分相似，富含G，且由短的基本序列随机串联重复而成。在人类，这种基本序列是GGGTTA。功能是保持线性染色体的稳定，即不环化、不粘合、不被降解。端粒是由端粒酶合成的。该酶是反转录酶 自身含有一个RNA分子，可作为延长DNA末端合成的模板，合成的方向是5＇→3＇。端粒是染色体的重要部分 它保证了染色 ...

即自主复制序列 又叫复制起点序列(replication origin sequence)。是顺式作用元件的一种。这种序列是染色体正常起始复制所必需的。所有的ARS的DNA均有一段保守序列：200bpA(T)TTTAT(C)A(G)TTTA(T)-200bp，真核生物染色体上有多个ARS序列。上下游各200个bp左右的序列是维持ARS功能所必需的。 ...

Stock Solutions1. 2M Cacl2 Merck. Filter (to remove particulates) autoclave and store at -20¡ in aliquots.2. 2 x HEBS gm/500ml NaCl 8.0 KCl 0.38 Na2HPO4.7H2O 0.19 glucose 1.0Hepes 5.0Adjust pH to 7.05 ...

Chemotaxis Assayby Melissa Swope 3/12/2000 PurposeThe purpose of a chemotaxis assay is to determine whether your protein or small molecule of interest has chemotactic activity on a specific cell type. ...

一、流式细胞术发展简史 　　流式细胞术（Flow Cytometry FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：①测量速度快，最快可在1秒种内计测数万个细胞；②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量，并具有明显的统计学意义；③是一门综合性的高科技方法，它综合了激光技术、计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等从多领域的知识和成 ...

CELL ADHESIONProcedure:1) Dissolve/dilute coating substrate in ddH2O at 4 C. A common working dilution for the laminin-1 positive control and BSA (Sigma A8412) negative control is 40 ug/ml. For SN-pep ...

Cell Cycles - IntroductionThe onion root tip and the whitefish blastula remain as the standard introduction to the study of mitosis. The onion has easily observable chromosomes and the whitefish has o ...

Carbohydrate-Specific Adhesion of Intact Cells to Resolved Glycolipids on TLC PlatesRonald L. Schnaar~Professor Johns Hopkins University Medical School Baltimore Maryland 21205This procedure all ...

PROPIDIUM IODIDE: The most commonly used dye for DNA content/cell cycle analysis is PROPIDIUM IODIDE (PI). It can be used to stain whole cells or isolated nuclei. The PI intercalates into the major gr ...

Immunofluorescent Localization of TubulinLEVEL II Materials Coverslip cultures of an appropriate monolayer cell line Phosphate buffered saline (PBS) Acetone/Methanol (absolute) in a 50:50 volume mixtu ...

Isolation of Actin and Myosin FilamentsLEVEL III Materials Relaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosphate buffer pH 7.00.001 M EDTA (Ethylene d ...

Isolation of Microtubules (Bovine Brain)LEVEL II Materials Freshly removed bovine brain 2Wire sieve (tea strainer)Microtubule buffer (MT buffer)0.1 M MES (2-(N-Morphilino)ethanesulfonic acid)1 mM EGTA ...

Em observations of microsomesLEVEL I Figure 7.3 Isolated microsomes Figure 7.4 TEM of hepatocyte MATERIALS 1% Glutaraldehye (GTA)1% Osmium tetroxideEpoxy or vinyl resin for TEMTEM photomicrograph of ...