细胞功能测定

The technique of in vitro protein synthesis involves the translation of messenger RNA (mRNA) in a cell-free extract to yield polypeptide products. Both prokaryotic and eukaryotic systems have been developed, but for this experiment only a eukaryotic system will be considered. In 1973, Rob ...

Living cells contain two forms of nucleic acid-deoxyribonucleic acid (DNA) and ribonucleic acid (RNA). It has been known for a number of years that RNA molecules are involved in the expression of the genetic material (DNA) and are, in fact, the initial products of gene expression that go on to direct pro ...

The general features of isopycnic centrifugation of DNA and the separation of main-band from satellite DNAs in solutions of cesium chloride are discussed in the preceeding chapter. This chapter describes a modification of the procedure that enhances the separation of specific DNA sequ ...

In order to study the organization and properties of DNA, it is necessary to extract it from cells and purify it from the proteins with which it is usually associated. Cells of plants and animals contain from 1 to 100 pg of DNA per nucleus. This does not sound like a lot until one realizes that is represents 100–10,0 ...

The exercise in this chapter is designed for students in the early years of an undergraduate course who have just been introduced to the basic concepts of genetic engineering in theory and would like to supplement their knowledge with practical experience. Many DNA manipulations, however, m ...

相关专题 Nature methods发布2013最受关注技术成果：单细胞测序 2013年已走到尽头。Nature Methods回首这一年，最受关注影响最广泛的技术成果是：单细胞测序(single-Cell sequencing)。 相关文章发表于2013年12月30日的《Nature Methods》杂志上。 在题为“Method of the Year 2013”的重要评论文章中，作者指出每个细胞都是独一无二的，它占据着特定的空间位置，在它的复制基因组中 ...

什么是自噬？ 细胞自噬(autophagy or autophagocytosis)：又称为Ⅱ型细胞死亡，是细胞在自噬相关基因(autophagyrelated gene，Atg)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。 比利时科学家Christian de Duve在上世纪50年代经过电镜察看到自噬体（autophagosome）构造，并且在196 ...

相关专题 斯隆 - 凯特林癌症研究所研发一种新技术，可以将iPSC(诱导多功能干细胞)转化成为老化的神经细胞。这一技术可以用来建立帕金森症模型。相关文章发表于2013年12月05日的《Cell Stem Cell》杂志上。 Cell子刊：科学家新研发一种技术快速将iPSC转化成为老化神经细胞 早老蛋白progerin是早老症中的关键蛋白， ...

2013年诺贝尔奖揭晓，美国、德国3位科学家James E. Rothman Randy W. Schekman和Thomas C. Südhof因 "发现细胞内的主要运输系统--囊泡运输的调节机制"，荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。这一奖项的授予，无疑将囊泡的研究推向了新的高潮。 Exosome来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的囊泡，是由活 ...

高通量细胞筛选技术(high2throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功能最有效的方法之一。通常基因功能的初步筛选在96 孔或384 孔板上进行通过基因转染将候选基因导入细胞或直接将基因表达产物加入细胞培养液中。筛选测定方法基于要研究的生物学或医学问题例如要研究抗血管生成活性选用内皮细胞进行细胞生长、分化、迁移和粘附等分析测定; ...

基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达，不断刺激机体免疫系统，使之达到防病的目的。

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。　　温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温 ...

在上周的《自然—细胞生物学》网络版上，一篇论文指出，一种确保有足够量的细胞以补充内肠的信号也控制了另外一种类型的细胞，这种细胞是身体防御细菌感染需要的。科学家已经知道，Wnt信号控制着内脏中细胞的周转，该系统的过度反应会导致肠肿瘤。Hans Clevers和同事的新发现向以阻断Wnt信号为目标的癌症治疗方法提出了警告，因为这可能会负面地影响这些细菌防御细胞的可获得性。 Wnt信号对维持肠内未 ...

7月25日，复旦大学对外发布了一项基因研究领域里的重大成果，他们发现了破解基因“天书”的密码，这项具有“里程碑”意义的研究将在8月12日刊登在国际生物界权威杂志《细胞》的封面上。如果说人们现在为长不高而烦恼，为过早衰老的容颜而神伤，为遭受疾病折磨的老年而担忧，那么这一切都将会因为这个新的基因解读方法而有所改变。　　破解基因天书的密码被称为“PB转座因子”。复旦的科学家通过3年的研究发现，这种源于飞 ...

1975年英国科学家Milstein和Kohler所发明， 并获得1984年诺贝尔医学奖。它是将产生抗体的单个B淋巴细胞同肿瘤细胞杂交， 获得既能产生抗体， 又能无限增殖将杂种细胞，并以此生产抗体的技术。其原理是: B淋巴细胞能够产生抗体， 但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代， 但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。

通过将体细胞核转移到已经去核的卵母细胞中，我们得到了好些哺乳动物的克隆，如绵羊、小鼠、牛、山羊、猪、兔、猫、骡、马和大鼠等。但这项技术在狗身上一直没有实现，因为狗的卵母细胞在体外很难诱导成熟。这里，我们有篇利用转移成体皮肤细胞核到卵母细胞（已经在体内成熟）中成功克隆两条阿富汗猎犬的报道。结合由狗基因组计划得到的详细资料，这项通过体细胞核转移得到克隆狗的技术，将有助于我们理解遗传因素和环境因子在不同 ...

在显微镜下， 用显微操作装置对细胞进行解剖手术和微量注射的技术属显微操作技术。显微操作仪是在显微镜下对细胞进行显微操作的装置，可用于细胞核移植、基因注入、染色体微切和胚胎切割等手术。

将细胞内的酶与底物相互作用， 再将酶反应的产物作为反应物质，在酶的作用部位进行捕捉，使其在显微镜下具有可见性。这种在酶作用下产生反应产物， 经捕捉反应来间接证明酶定位的反应称为酶的细胞化学反应。酶的细胞化学反应包括两个反应: 第一反应是酶作用于底物的反应， 称酶反应，形成的产物称为初级反应产物;第二反应是捕捉剂与初级反应产物的作用，称捕捉反应，产生最终反应产物：┌─────────酶的细胞化学反应 ...

植物受创伤后，在伤面新生的组织称为愈伤组织。其原因是由于受创伤的刺激后，伤面附近的生活组织恢复了分裂机能，加速增生而将伤面愈合。在植物组织培养中的愈伤组织是指植物细胞在组织培养过程中形成的无一定结构的组织团块，在适宜的条件下，愈伤组织可再分化，形成芽、根，再生成植株。

原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上，加入培养基后进行培养。分散培养则是将组织块用机械法或化学法使细胞分散。如欲从 ...