细胞培养

In general terms cultured cells require a sterile environment and a supply of nutrients for growth. In addition the culture environment should be stable in terms of pH and temperature. Over the last t ...

1.Primary Cultures Primary cultures are derived directly from excised normal animal tissue and cultured either as an explant culture or following dissociation into a single cell suspension by enzyme d ...

Large numbers of cell lines look identical. Cell lines with very different origins and biological characteristics typically cannot be separated on grounds of morphology or culture characteristics. Inf ...

1.Risk Assessment The main aim of risk assessment is to prevent injury protect property and avoid harm to individuals and the environment. The performance of risk assessment is a legal requirement und ...

1.Laboratory Design Perhaps one of the most under-rated aspects of tissue culture is the need to design the facility to ensure that good quality material is produced in a safe and efficient manner. Mo ...

ECACC and Human Genetic Research The European Collection of Cell Cultures (ECACC) was first established within CAMR Salisbury UK in 1984 and has grown to be one of the largest animal cell culture coll ...

细胞培养基本概念 细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。 细胞培养目的与用途 1、科学研究：药物研究开发与基础研究 药物研究与开发 (1) 新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。 (2) 疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗 ...

无菌操作技术 体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室，若实验者粗心大意，技术操作不规范也会导致污染。因而为在一切操作中最大可能地保证无菌，每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠。 Terms to remember 消毒(disinfection)和消毒剂(disinfectant) 灭菌(sterilization) 防腐(antis ...

韩雪梅证实“小黑焦虫”为硅的化合物 我院肿瘤研究室韩雪梅副研究员领导的科研小组，利用多学科先进技术和方法，经过几年研究，在国内外首次证实，目前广泛影响细胞培养的污染物“小黑焦虫”，乃是一种非生命物质——硅的化合物，并初步提出了解决这一问题的方法。参加成果鉴定会的专家们一致认为，这一发现是我国细胞培养工作史中的重大突破，为组织培 ...

Marc 145细胞培养和维持有关资料综述 一、 细胞及培养 1、Marc145细胞 上皮样细胞，来源于猴肾细胞，从母细胞（MA 104细胞）克隆而得到，可连续培养。 2、生长培养基 DMEM（高糖型，含4500mg/L D－葡萄糖、L-谷氨酰胺，和110mg/L丙酮酸钠，不含碳酸氢钠）＋5－10％新生牛血清+ 1%双抗（青霉素和链霉素）的培养液。 3、冻存液 生长培养基＋10% DMSO 4、细 ...

HepG2细胞培养的相关条件 HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性，还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。 1.HepG2细胞的复苏条件 1.1 复苏温度的选择 唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏：快速将所冻存细胞40℃水浴摇床60转/ min慢摇至其溶解，溶解 ...

足细胞来源： 丁香园网友yulinlong的观点为： 很多细胞中心就有卖的，或者有的公司可以代理ATCC公司的就可以。 有的文献用的永生化细胞系是他们自己建的系或者别人建系赠予的，你也可以考虑向国内或者国外去请求馈赠。有的会给的。 丁香园网友wenyueqiang的观点为： 美国爱因斯坦大学的PETER MUNDEL有 足细胞培养方法： 大鼠原代足细胞： 丁香园网友gaoxueyan99的观点为： ...

一、 细胞培养实验室的设置及设备 （一）细胞培养实验室的设置 组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。目前，超净工作台的广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。 细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。 1．无菌操作区 （1）无菌操作室：无菌操作区只 ...

1、认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败， 2、粉末培养基配制好后 ( 加了血清 ) ，一般在 4 度尽量不要超过 1 个月，如在 -20 度 存放时间 可长一些，但最好也不要超过 3-4 个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，但我在过去的 4 年里一直是作原代细胞培养的，细胞娇弱，经验表明放置时间不宜过长。 3、关于实验用品 ...

1、保存血清最好的方法? 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。 2、如何解冻血清才不会使产品质量受损? 建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。 3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 血清中沉淀物 ...

体内组织细胞在体外培养时，所需培养环境基本相似，但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同，各自要求条件有一定差别，所采取的培养技术措施亦不尽相同，现介绍个别组织细胞培养的要点如下: 上皮细胞培养 上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分，又由于癌起源于上皮组织，故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞，培养时生长速度往往超过上皮细胞，并难以纯化，同时上皮 ...

组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞和在体外培养的肿瘤细胞，其差异较小，但也并非完全相同。培养中的肿瘤细胞具以下突出特点： （－）形态和性状 培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态，大多数肿瘤细胞镜下观察比二倍体细胞清晰，核膜、核仁轮廓明显，核糖体颗粒丰富。电镜观察癌细胞表面的微绒毛多而细密，微 ...

无菌操作基本技术 1、实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌 ...

器材与试剂： 干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤： 一、水的制备 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二、PBS的制备与消毒（也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制） 1.溶解定容：将药品（NaCl8.0g，KCl0.2g，Na2HPO4•H2O 1.5 ...

贴壁法原代培养 1.1　细胞培养 1.1.1　培养液配制　DMEM（美国Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），链霉素 （100mg/ml），优质胎牛血清（原代培养浓度20%，传代培养浓度10%，美国Hyclone）。 1.1.2　培养器皿　25cm2塑料培养瓶（Costar），培养面积25cm2；直径3.5cm培养皿。 1.1.3　大鼠血管平滑肌细胞培养　动物 ...