琼脂糖凝胶电泳

Sample preparation and solubilization are crucial factors for the overall performance of the 2-D PAGE technique. Protein complexes and aggregates should be completely disrupted in order to avoid appea ...

MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc EDTA and ethidium bromide solutions should also be DEPC treated. Tris has a reactive amine and can''t ...

The overall quality of an RNA preparation may be assessed by electrophoresis on a denaturing agarose gel; this will also give some information about RNA yield. A denaturing gel system is suggested bec ...

The overall quality of an RNA preparation may be assessed by electrophoresis on a denaturing agarose gel; this will also give some information about RNA yield. A denaturing gel system is suggested bec ...

Protocol for Bioanalyzer RNA nano chip preparation of material 12 samples per chip quantitative range 25�500 ng/μl quantitation accuracy 20%CV (for ladder as sample) cleaning gel preparation (start 40 ...

如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象已成为实验室研究人员比较头疼的问题！1. 固定玻璃板时，先将厚薄玻璃板在桌面对齐后在垂直面上稍微向厚板倾斜20度，使底面薄板略高于厚板。2. 将固定好的玻板固定于放有海绵垫的制胶架上，固定时用手稍用力往下压，此时封闭的灌胶系统准备完毕。3. 除了以上安装技巧外，由于海绵橡胶垫用久后会老化或者损坏，从而导致漏胶的现象时常发生，建议 ...

如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象已成为实验室研究人员比较头疼的问题！1. 固定玻璃板时，先将厚薄玻璃板在桌面对齐后在垂直面上稍微向厚板倾斜20度，使底面薄板略高于厚板。2. 将固定好的玻板固定于放有海绵垫的制胶架上，固定时用手稍用力往下压，此时封闭的灌胶系统准备完毕。3. 除了以上安装技巧外，由于海绵橡胶垫用久后会老化或者损坏，从而导致漏胶的现象时常发生，建议 ...

等电聚焦电泳技术 等电聚焦（isoelectricfocusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区 ...

等电聚焦电泳技术 等电聚焦（isoelectricfocusing，IEF）是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位，因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。如前所述，蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区 ...

其他电泳技术 ⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SDS-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。IEF ...

其他电泳技术 ⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SDS-PAGE双向电泳。其中IEF电泳（管柱状）为第一向，SDS-PAGE为第二向（平板）。在进行第一向IEF电泳时，电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外还应有二硫苏糖醇以促使蛋白质变性和肽链舒展。IEF ...

简 介　　这个方法是应用最早也是最常用的突变筛查方法之一，在过去的十年中经历了很大的改进，并被诊断室所广泛使用，最近有篇关于该问题的综述（Fodde和 Losekoot 1994 年）。原 理　　如果 DNA 双链分子全长不断增加温度或用化学变性剂处理，两条链就会开始分开（解链）。首先解链的区域由解链温度较低的碱基组成。 G.C 碱基对比 A.T 碱基对结合得要牢固，因此 G. C 含量高的区 ...

简 介　　这个方法是应用最早也是最常用的突变筛查方法之一，在过去的十年中经历了很大的改进，并被诊断室所广泛使用，最近有篇关于该问题的综述（Fodde和 Losekoot 1994 年）。原 理　　如果 DNA 双链分子全长不断增加温度或用化学变性剂处理，两条链就会开始分开（解链）。首先解链的区域由解链温度较低的碱基组成。 G.C 碱基对比 A.T 碱基对结合得要牢固，因此 G. C 含量高的区 ...

相关专题 麻省理工学院(MIT)新型分子筛(molecular sieve)能够加速对蛋白的精确分类，有望协助疾病的检测和治疗。 分析复杂生物溶液，如血液中的蛋白对于研究患病机理和发展新型治疗手段越发重要。MIT机械工程部研究生傅建平(Jianping Fu，音译)率领的研究小组，设计出一种埋在硅芯片中的筛网，能够对包含蛋白的生物样本进行分 ...

相关专题 来自宾夕法尼亚州费城杰佛逊医学院(Jefferson Medical College)外科系，以及Kimmel肿瘤中心(Kimmel Cancer Center)的研究人员申请到了一项新专利，这项专利也许未来某天会成为DNA分析过程中的关键技术，而且这一发现也可以应用于多个领域，比如法医鉴定，克隆或者生物恐怖(bioterrori ...

相关专题 要开展蛋白质组学研究，双向电泳是你必须了解掌握的最基础的蛋白质分离技术，正如普通凝胶电泳对于核酸纯化。可是一提起双向电泳，多数人还是会直皱眉头----别摇头摆手又叹气啦，今天的双向电泳早已深入改进了，特别是其中最热门的荧光差异凝胶电泳技术(DIGE)，因为消除了传统双向电泳的一些弊端，已经使得好多实验室对双向电泳重拾信心，并逐渐得 ...

相关专题 蛋白质组学的研究终究离不开双向电泳，无论你喜欢与否。但双向电泳中的不确定性却一直困扰着研究人员，让人颇为烦恼。通用电气医疗集团的生命科学部拥有着市场上最多的双向电泳用户，无疑也就有了最丰富的疑难排解经验。据介绍，其实绝大部分问题源自于实验结果中不可控的系统误差。怎么办?可不能让这些系统误差扼杀了我们的研究成果。 为了解决这些问题， ...

相关专题 全球电泳系统巨头Bio-Rad公司近日推出一款高通量的等电聚焦系统PROTEAN i12 IEF系统，能在12个独立的通道同时对12个IPG胶条进行等电聚焦。 市场上大部分的IEF系统都有多个通道，但各个通道的条件都是相同的，因此每次只能摸索一个条件。传统的IEF槽将总电流平均分到所有通道。除非所有的样品有着相同的电导率，否则电流 ...

相关专题 凝胶迁移或电泳迁移率实验原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 具体实 ...

相关专题 一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞 ...