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琼脂糖凝胶电泳

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SDS-PAGE凝胶制实验及其各实验试剂的配制方法

相关专题 SDS-Page凝胶制备属于实验室最常规的操作了,刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方,这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。 1. 分离胶(12%) ...

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单细胞凝胶电泳的操作流程与注意事项

相关专题 单细胞凝胶电泳(又名彗星实验)的操作流程主要包括单细胞悬液的制备、凝胶板制备、细胞裂解与解旋、电泳与中和、染色和观察等步骤。本文总结了单细胞凝胶电泳操作步骤和注意事项,希望对初入实验的同学有帮助。 1、分离制备单细胞悬液: (1)体外培养的细胞株:用胰酶消化,最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液,细胞要计数,具体的量我前边已经说过。 ...

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DNA电泳带型原因分析及解决办法

相关专题 DNA跑完电泳后,需要进行带型分析,电泳图上的带型可能有出现许多状况。那么如何根据DNA电泳带型结果调整自己的实验呢?这里简单的做个介绍。 DNA电泳需要进行带型分析,在实验过程中常会发现所得的带型出现在这样那样的问题。在此,对DNA带型做了相应的分析。带型原因分析解决办法弱带或无带上样的DNA量不够增加DNA的上样量,聚丙烯酰 ...

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变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验操作技术方法与步骤

相关专题 变性梯度凝胶电泳主要分离原理是利用DNA链的熔解性质达到分离目的,低熔点和高熔点的DNA局部解链的程度不同,分子的迁移速率不通过,进而分离。 一、实验原理 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm) ...

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国内电泳技术水平的现状与展望

相关专题 本文讲述了国内电泳技术水平与国外电泳技术水平的差距以及讲述了国内电泳技术提高的展望及前景。 电泳仪 中国在电泳技术临床应用上与国外相比,存在一定的差距。若按照国外实验室标准,国内三级甲等、三级乙等医院均需配备自动电泳仪,但目前国内不少三级甲等医院仍没有使用这类设备。电泳项目国内一般也只以血清蛋白为主,而国外所做项目包括血清蛋白、 ...

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琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验的内容

相关专题 本文介绍了琼脂糖凝胶电泳检测DNA的设备、材料以及详细的实验步骤,也讲述了琼脂凝胶的特性供广大读者参考。 琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DN ...

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毛细管电泳的介绍及基本原理

相关专题 本文介绍了毛细管电泳的兴起与发展、毛细管电泳基本原理。毛细管电泳于1981年由Jorgenson等人创立至今已发展达到国际先进水平。 毛细管电泳仪 一、 毛细管电泳的兴起与发展 毛细管电泳(capillary electrophoresis CE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一.1981年 ...

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聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术催化剂的介绍

相关专题 本文讲述了聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术的一些催化剂的具体介绍以及聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术的注意事项。 聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)是根据被分离物质所带来的电的荷多少及其分 子大小、形状的不同,在电场的作用下,产生不同的移动速度而分离的方法。 它具有电泳和分子筛的双重作用。 1、聚丙烯酰胺的聚合丙烯酰胺单体和交联剂N1 ...

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血清蛋白质电泳技术介绍及基本操作

相关专题 本文介绍了血清蛋白质电泳技术的基本原理、实验的试剂仪器和操作过程以及影响电泳结果的主要因素,还就讲述血清蛋白质电泳技术的临床意义了供广大读者参考。 血清蛋白质电泳仪 【 实验原理】 1. 电泳的基本原理 带电颗粒在电场中向着与其电性相反方向移动的现象称为电泳。 电泳时不同的带电粒子在同一电场中泳动速度不同。带电颗粒 ( 球形分子 ...

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华人学者:取代双向电泳的新技术

相关专题 麻省理工学院(MIT)新型分子筛(molecular sieve)能够加速对蛋白的精确分类,有望协助疾病的检测和治疗。 分析复杂生物溶液,如血液中的蛋白对于研究患病机理和发展新型治疗手段越发重要。MIT机械工程部研究生傅建平(Jianping Fu,音译)率领的研究小组,设计出一种埋在硅芯片中的筛网,能够对包含蛋白的生物样本进行分 ...

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提速DNA电泳速度

相关专题 来自宾夕法尼亚州费城杰佛逊医学院(Jefferson Medical College)外科系,以及Kimmel肿瘤中心(Kimmel Cancer Center)的研究人员申请到了一项新专利,这项专利也许未来某天会成为DNA分析过程中的关键技术,而且这一发现也可以应用于多个领域,比如法医鉴定,克隆或者生物恐怖(bioterrori ...

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定量蛋白质组学荧光差异凝胶电泳技术

相关专题 要开展蛋白质组学研究,双向电泳是你必须了解掌握的最基础的蛋白质分离技术,正如普通凝胶电泳对于核酸纯化。可是一提起双向电泳,多数人还是会直皱眉头----别摇头摆手又叹气啦,今天的双向电泳早已深入改进了,特别是其中最热门的荧光差异凝胶电泳技术(DIGE),因为消除了传统双向电泳的一些弊端,已经使得好多实验室对双向电泳重拾信心,并逐渐得 ...

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通用电气为双向电泳提供新的协同解决方案

相关专题 蛋白质组学的研究终究离不开双向电泳,无论你喜欢与否。但双向电泳中的不确定性却一直困扰着研究人员,让人颇为烦恼。通用电气医疗集团的生命科学部拥有着市场上最多的双向电泳用户,无疑也就有了最丰富的疑难排解经验。据介绍,其实绝大部分问题源自于实验结果中不可控的系统误差。怎么办?可不能让这些系统误差扼杀了我们的研究成果。 为了解决这些问题, ...

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Bio-Rad推出新一代高通量等电聚焦系统

相关专题 全球电泳系统巨头Bio-Rad公司近日推出一款高通量的等电聚焦系统PROTEAN i12 IEF系统,能在12个独立的通道同时对12个IPG胶条进行等电聚焦。 市场上大部分的IEF系统都有多个通道,但各个通道的条件都是相同的,因此每次只能摸索一个条件。传统的IEF槽将总电流平均分到所有通道。除非所有的样品有着相同的电导率,否则电流 ...

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凝胶迁移或电泳迁移率实验技术进展

相关专题 凝胶迁移或电泳迁移率实验原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 具体实 ...

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双向电泳技术

相关专题 蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心.双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白并表明蛋白质谱不是稳定的而是随环境而变化.双向电泳原理简明第一向进行等电聚焦蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点;随后再沿垂直的方向进行分子量的分离.目前随着技术的飞速发展已能分离出10 000个斑 ...

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非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

相关专题 Native-PAGE原理: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳常用于同工酶的鉴定和提纯.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用因而可 ...

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高效毛细管电泳(HPLC)的基本原理

相关专题 高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是近年来发展起来的一种分离、分析技术,它是凝胶电泳技术的发展,是高效液相色谱分析的补充。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等,HPLC分析 ...

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Native-PAGE常见问题

相关专题 1. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时预电泳是怎么回事的?预电泳时要加6×DNA上样缓冲液吗?电泳1-2小时再加结合反应产物吗? 预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体和聚合引发剂提高分辨率不加任何物质一般30-60分钟后加样电泳. 2. 银染的步骤是什么?银染的关键因素是什么? 步骤是: (1) 固定:10%冰乙酸30min. (2) ...

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一些双向电泳的分类

相关专题 非变性2D-PAGE:两向均在非变性条件下进行这样分离的蛋白质点的等电点和表观分子量同生理条件下获得的这些蛋白的值是一样的; 非变性/SDS-2D-PAGE:第一向采用非变性IEF之后在2%SDS溶液中平衡;第二向也在SDS存在的条件下进行.适于分析非共价键连接的蛋白-蛋白间的相互作用. 非变性/还原/SDS-2D-PAGE:非变 ...

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