一、免疫共沉淀和亲和层析共分离 免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。 常用的小珠: GST-Agarose(不需要抗体) ProteinA-Agarose(用时需加抗体) 基本方法: 1.表达蛋白质A 2 ...
一、Osprey 作者: Bobby-Joe Breitkreutz Chris Stark Mike Tyers 网址:http://biodata.mshri.on.ca/osprey/servlet/Index 编程语言:Java 操作平台:Window2000/xp/9x; LinuxUnix; 介绍:a network visualization system. A so ...
随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成,基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。 生物体系的运作与蛋白质之间的互作密不可分,例如:DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合体的作用。能够发现和验证在生物体中相互作用的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质是认识它们生物学功能的第一 ...
麻省理工学院的研究人员利用新一代测序仪,开发出一种名为HiTS-FLIP的新技术,能以前所未有的深度对DNA-蛋白的结合亲和力进行定量测定。 新一代测序技术自问世以来,为生物学带来了深刻的变化。它极大地推动了非模式物种的全基因组测序工作,越来越多的物种基因组信息相继公布。同时,通过基因组重测序,人们可以了解到单核苷酸多态性、突变热点、基因组结构变异、群体多态性等重要信息。此外,新一 ...
一、引言 在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。 重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要: 1. 鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件。 2. 分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子。 这些问题 ...
举世瞩目的基因组计划使大量的新基因不断被发现,然而单纯的基组DNA序列尚不能解答许多生命问题。基因是相对静态的,而基因编码的产物-蛋白质则是动态的,具有时空性和调节性,是生物功能的主要体现者和执行者。蛋白质的表达水平、存在方式以及相互作用等直接与生物功能相关。 在所有生命活动中,蛋白质之间的相互作用是必不可少的,它是细胞进行一切代谢活动的基础。细胞接受外源或是内源的信号,通过其特有 ...
本文对2011年蛋白质互相作用的研究成果进行盘点。常言道,物以类聚,人以群分,其实这对于生命活动的基本执行者——蛋白质而言,同样合理。因此科学家们常利用蛋白质之间的这种相互作用进行相关的研究,并获得一定的成果。 近年来随着蛋白研究技术的发展,科学家们也开始建立蛋白相互作用整体网络,不过这种网络连接这与生物途径不同,后者主要是通过一系列的分子相互作用,达到一个 ...
为探究生物进程的分子机制,需要确定介导这个过程的蛋白质-蛋白质间的相互作用。研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下: 一、酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后,诱饵蛋白结合于报道基因的启动子,启动报道基因在酵母细胞内的表达,如果检测到报道基因的表达产物,则说明两者之间有相互作用,反之则 ...