蛋白质活性测定

相关专题 ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay，IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。 1.1　抗原 抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后，可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中，抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生 ...

相关专题 近日，美国俄亥俄州立大学、国立卫生研究所(NIH)信息技术中心的研究人员在《Nature chemistry》杂志上发表最新研究成果“Protein fold determined by paramagnetic magic-angle spinning solid-state NMR spectroscopy”，他们将固体核磁 ...

相关专题 1.固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整，但因偏酸，对抗原有一 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 一项由著名的制药业市场调查公司BioInformatics LLC做出的限制性内切酶市场报告分析“The Market for Restriction Enzymes: Cutting Out Your Competition”对目前这一市场主要的影响因素进行了首次的全面评估，分析认为新英格兰公司(New En ...

相关专题 NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明，并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发，特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今，已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA重组技术中对核酸的“精雕细刻”主要用酶作为工具。分子生物学研究过程中发现的酶，许多都用作工具，表20-列出最常用的几种工具酶。限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)在重组DNA技术中有重要地位，在此较详细介绍。 一、限制性核酸内切酶的概念 核酸酶可分为两类：核酸外切酶(exo ...

相关专题 重组DNA技术工具酶基因工程让一切皆有可能 限制性内切酶是基因工程常用工具酶。一、限制与修饰(Restriction and modification)1.限制与修饰现象早在 50 年代初，有许多学者发现了限制与修饰现象，当时称作寄主控制的专一性(host controlled specificity)。 l 噬菌体表现的现象便具有代 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶限制性核酸内切酶产品选择专题 30多年前，当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时，首次发现了限制性内切酶。细菌可以抵御新病毒的入侵，而这种"限制"病毒生存的办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR I和EcoR II，以及来源于He ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验探针的原理及其应用 RNA酶保护试验((RNase Protection AssayRPA)是通过液相杂交的方式，用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点： 1. 检测灵敏度比Northern杂交高。由于Northern杂交步骤中转膜和洗膜都 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶限制性核酸内切酶产品选择专题 【基本原理】 限制性内切酶已有百余种，每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性，酶的活性需Mg+2来激活。不同的酶也有许多差别：有些酶除需Mg 2+外，还需ATP等其他辅助因子的激活;切割位点和识别序列间的距离不同;有的内切酶同时具有甲基化作用。根据这些差别，可将限制性内切酶分为I、II ...

相关专题 重组DNA技术工具酶限制性核酸内切酶产品选择专题 实验目的 学习和掌握限制性内切酶的特性 掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法 并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。 相关基础知识 限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。它是基因工程中用于体外剪切基因片段的重要工具酶。 上世纪七 ...

相关专题 在蛋白质定量试验中，最常用的方法是BCA法蛋白定量。那么为什么我们要选择用BCA法?而且常常使用到BCA蛋白定量试剂盒（BCA Protein Assay Kit）。因为BCA法蛋白定量具有很多优点，如1.实验操作十分简单方便;2.实验耗时短，快速;3.试剂灵敏度高，实验结果准确;4.所用的试剂稳定性好，而且经济实用，抗干扰能力强 ...

相关专题 Western免疫印迹(western blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体， ...

相关专题 Benzonase 核酸酶（BENZONASE NUCLEASE）是一种常用的核酸内切酶，属于混合型核酸内切酶，它能够消化所有结构的DNA和RNA。 应用范围：Benzonase 核酸酶的应用领域包括：降低样品粘度以利操作(例如重组蛋白纯化，哺乳动物细胞裂解特下游要求粘度较低等情况)：减少存放的外周血单核 细胞(PBMC)的结块现 ...

相关专题 聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法 蛋白质是生命活动的真正执行者，与生命健康息息相关。因此，对于蛋白质互作研究有助我们了解生命奥秘。近日，国际权威杂志上就刊登了两篇有关蛋白质相互作用的重要研究成果。 蛋白质的防碰撞策略 蛋白质分子在形成过程中，可以避免相互之间硬性碰撞，日本福岛县立医科大学的研究人员最近发现了其中的机制。研究人员用独特 ...

相关专题 聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法 1.3DID(3D interacting domains) 网址：http://3did.irbbarcelona.org http://gatealoy.pcb.ub.es/3did/ 简介：搜集3D结构已知的蛋白质的互作信息，可通过结构域名称、基序名称、蛋白质序列、GO编码、PDB ID、Pf ...

相关专题 聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法 研究蛋白-蛋白相互作用是理解生命活动的基础。蛋白质—蛋白质互作网络是生物信息调控的主要实现方式，是决定细胞命运的关键因素。检测蛋白质间相互作用的实验方法有哪些？这些检测方法各有什么优缺点?总结如下。 1. 生化方法 ●共纯化、共沉淀，在不同基质上进行色谱层析(需要补充) ●蛋白质亲和色谱 基本原理是 ...

相关专题 必需氨基酸指人体不能合成或合成速度远不适应机体的需要，必需由食物蛋白供给，这些氨基酸称为必需氨基酸。共有10种其作用分别是： (一) 赖氨酸：促进大脑发育，是肝及胆的组成成分，能促进脂肪代谢，调节松果腺、乳腺、黄体及卵巢，防止细胞退还; (二) 色氨酸：促进胃液及胰液的产生; (三) 苯丙氨酸：参与消除肾及膀胱功能的损耗; (四) ...

相关专题 聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法 蛋白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分，蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。本文对蛋白质相互作用方法进行总结。 一、酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结 ...

相关专题 聚焦蛋白质互作研究进展与实验方法 本文对2011年蛋白质互相作用的研究成果进行盘点。常言道，物以类聚，人以群分，其实这对于生命活动的基本执行者——蛋白质而言，同样合理。因此科学家们常利用蛋白质之间的这种相互作用进行相关的研究，并获得一定的成果。 近年来随着蛋白研究技术的发展，科学家们也开始建立蛋白相互作用整体网络，不过这种网络连接这 ...