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蛋白质活性测定

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蛋白分离纯化概述(An overview of protein isolation)

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High Level Expression of Recombinant Proteins in E. coli

相关专题 High Level Expression?Protein BiochemistryWesterns and pull-down assaysEnzyme AssaysSub-mg quantitiesProtein StructureStructural BiologistsNMR and X-ray crystallograph ...

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Determination of target protein solubility

相关专题 Materials LB medium Kanamycin stock solution Ampicillin stock solution Lysis buffer for purification under native conditions 1´ PAGE sample buffer 2´ PAGE sample buffe ...

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Rapid screening of small expression cultures

相关专题 Materials Ni_NTA Spin ColumnsLB mediumKanamycin stock solutionAmpicillin stock solutionIPTG stock solutionBuffers A–D 5× SDS-Page sample buffer1. Pick single colonies ...

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紫外分光光度法测定蛋白质含量

相关专题 摘要:考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。1. 实验部分1.1 仪器与试剂:Labtech UV POWER紫外分光光度计;玻璃比色 ...

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绿色荧光蛋白测定(EGFP assay)

相关专题 IntroductionEGFP will be measured by direct visualisation with a UV microscope and the appropriate filters. By using an inverted microscope we are able to assay the Ce ...

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氨基酸的离子交换柱色谱分离

相关专题 【原 理】本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于Asp的pI值,则Asp可解离为阴离子,不能被树脂吸附而直接流出色谱柱,在pH 12条件下,因高 ...

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蛋白质的定量测定实验

相关专题 蛋白质的定量分析是生物化学和其它生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品,药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,则是经常进行的一项非常重要的工作。蛋白质是一种十分重要的生物大分子:它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给 ...

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Folin

相关专题 一、 目的掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。二、原理Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便,灵敏度比双缩脲 ...

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蛋白质分离纯化

相关专题 蛋白质的分离纯化(一)材料 1、选材 2、破碎 3、混合物的分离 (二)粗分级 (三)细分级 (四)结晶蛋白质的分离方法根据蛋白质的溶解度差异分离 —沉淀技术根据蛋白质分子大小的差异分离根据蛋白质的荷电差异分离根据蛋白质与某些物质的吸附差异—吸附分离利用生物分子专一性结合的特性—亲和层 ...

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High Throughput Methods in Proteomics

相关专题 David WishartUniversity of AlbertaEdmonton ABdavid.wishart@ualberta.caProteomicsProteomics employs an incredibly diverse range of technologies including:molecular biol ...

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蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用

相关专题 原 理 蛋白质分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值,携带的静电荷不尽相同,致使它们在电场中的迁移率各异,从而达到分理的目的。电泳原理示意图在蛋白质组学中对电泳的分类一维电泳(one dimensi ...

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Western Blot Analysis by SDS

相关专题 MaterialsReady Gel Precast GelsBio-Rad Mini-Protean-3 Cell apparatusPrestained protein markers Reagents6x Laemmli reducing sample buffer Distilled H20 (dH20)Running bu ...

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SDS PAGE and Western Blotting

相关专题 Conduct SDS-Page according to standard procedures. 1. Cast gel and allow to polymerize 2. Prepare samples to be resolved 3.Load gel 4.Run gel ( Transferring proteins ...

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Protein Purification and Analysis

相关专题 Levels of Structure in ProteinPrimary: A description of all covalent bonds. The sequence of AA residuesSecondary: particularly stable arrangements of AA giving rise to ...

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蛋白质纯化(Protein Purification)

相关专题 In order to carry out detailed studies of a protein (structureenzyme activity amino acid sequence etc) it has to be very pureHow is a single protein isolated from all ...

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蛋白质纯化的原理和方法(Protein Purification Principles and Methods)

相关专题 Proteins•Complex polymeric asymmetric and sensitive molecules•Contain covalent bound prosthetic groups and non-covalent bound cofactors•Many non-covalent bounds e.g. H ...

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蛋白质组技术

相关专题 一、研究材料 1995年,Wasinger等在第一篇蛋白质组研究文章中研究的对象为目前已知最小但能自主复制的原核微生物——支原体Mycoplasma genitalium。1996年,研究对象即扩展到单细胞真核生物——酵母以及人体正常组织及病理标本 ...

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小鼠β

相关专题 动物组织RNA的提取 实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙 ...

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酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量

相关专题 一、 相关理论1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。2、 血清(浆)蛋白质的分类:目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。1) 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白(Albumin Alb 或A)和球蛋白(Globulin G)2 种2) 醋酸纤维素薄膜电泳可 ...

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