蛋白质活性测定

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相关专题 蛋白表达技术全攻略 试验的注意事项 1、信号肽识别位点的设计 以质粒pPICZαA为例。在利用PCR反应在外源基因两端引入酶切位点的试验中。如果质粒pPICZαA双酶切中丢失了KEX2蛋白酶的酶切位点Lys-Arg，应该在上游中，增加了编码Lys、Arg的密码子AAA、AGA 。酵母细胞膜中中的KEX2蛋白酶 ...

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相关专题 它们都是BSA A、请问各位高手在进行免疫荧光的实验时浸一抗之前要用的封闭液中1%的BSA是怎么配制? 封闭液封闭后还用PBS清洗干净再浸一抗吗? 1.可以直接用0.02M的PBS配制 2.不用PBS清洗干净，直接浸一抗。 B、各位高手，间接法中我想摸索封闭液BSA的最佳浓度，用抗原包被后，用不同浓度的BSA(0.5%，1%，2%， ...

相关专题 它们都是BSA生物实验中的封闭剂 1.BSA封闭液的配制 石蜡切片做免疫荧光的时候用4%BSA in PBS +0.05% Tween 20 细胞免疫荧光的时候用 1%BSA in PBS + 0.05% Tween 20 2.0.1%BSA怎么配 直接用水配就行了!按体积比就行!看你干什么用!要是用来PCR可以用dd水配制! 3. ...

相关专题 Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合，组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后，带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里，其他的杂蛋白流出。Ni-NTA纯化介质是Ni离子金属螯合介质。 蛋白过镍柱纯化的原理：Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合，组 ...

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相关专题 蛋白纯化技术专题 1.上样 亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。 一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢，所以样品液的浓度不易过高，上样时流速应比较慢，以保证样品 ...

相关专题 蛋白纯化技术专题 1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。其既有分子筛作用，在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一 ...

相关专题 蛋白纯化技术专题 超滤技术存在的主要问题是超滤膜污染。超滤膜在使用过程其性能随着时间的增加，膜透过流速会迅速下降，同时对溶质的阻止率也会明显上升，这是由膜的劣比的附生污垢所引起的。膜易出现污染与堵塞，膜的使用寿命相对较短，有必要对超滤膜的再生进行研究。解决办法一方面是加强料液的前处理，另一方面是对超滤膜的清洗方法的研究。 超滤法的应 ...

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相关专题 该方法是双缩脲法的发展，包括两步反应： (1)在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。 (2)此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原，混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物)，颜色深浅与蛋白质含量成正比。此方法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100倍，定量范围为5~100μg蛋白质。FolIn试剂显色反应由酪氨 ...

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