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生物大分子样品的保存

生物大分子制成品的正确保存极为重要,一旦保存不当,辛辛苦苦制成的样品失活、变性、变质,使前面的全部制备工作化为乌有,损失惨重,全功尽弃。影响生物大分子样品保存的主要因素有:⑴空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物的污染可使样品腐败变质,样品吸湿后会引起潮解变性,同时也为微生物污染提供了有利的条件。某些样品与空气中的氧接触会自发引起游离基链式反应,还原性强的样品易氧化变质和失 ...

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特染: 结缔组织染色

一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml(2)苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液 酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。(2)重铬酸钾液10min。(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。( ...

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沉降系数测定

沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。  1.原理  沉降系数的测定原理就是在恒定的离心力场下测定样品颗粒的沉降速度。因为样品颗粒很小,不能直 ...

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实验室纯水制备小常识

总有机碳在实验室纯水系统中的在线监测实验室纯水在分子生物学科研领域有着举足轻重的作用。衡量纯水的指标一般有电阻率、总有机碳(TOC)、细菌及热源等等。其中有机碳含量会直接影响实验的检测结果和重复性,并会破坏纯水系统的反渗透膜和树脂功能,增加细菌生长。为了确保水中的有机物保持在实验要求以内,科研工作人员需要对实验室纯水系统中的总有机碳即TOC进行监测。总有机碳的监测必须能够提供可靠准确的参数,使研究 ...

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高压锅使用

很多实验室的研究生都要自己清洗试验用品并进行高压灭菌,这里有一份高压锅注意事项,希望对大家有用。啊?不能上传附件,那么就拷在这里吧。使用HVE-50高压蒸汽灭菌器时请先阅读此说明WARNING一.不能使用此高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致爆炸或腐蚀内胆和内部管道,以及破坏垫圈。危险物品清单:1. 爆炸物质乙二醇二硝酸酯(硝化甘醇),硝酸甘油,硝化纤维素( ...

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各动物采血法

采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、CI- ...

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微生物染色液配制及染色法

2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝           0.3g95%乙醇          30mL0.01%氢氧化钾溶液    100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.3 结果菌体呈蓝色。2.2 革兰氏染色法2.2.1 结晶紫染色液结晶紫        1g95%乙醇 ...

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水浴恒温操作方法创新

近日用水浴锅控温处理细胞摸索出一个小方法比较实用故贴出以供借鉴:以往为恒温常把器皿包埋在水底或漂在水面这样不是操作不便就是控温不好为此我终于想出了一个两全方法: 器材要求有较大容积水浴锅比较好的大塑料袋塑料袋平放水中底部用适当面积较重的金属平板放入塑料袋中使之底部侵入水中塑料袋要够长开口能拉在水面以上这样就构成了一个水下平台可从塑料袋中向平台上取放瓶皿等水会紧紧的把瓶皿压在平板上. 这样即保证了温 ...

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谈实验室用水

水是实验室内一个常常被忽视但至关重要的试剂。实验室用水有那些种类?能达到什么级别?不同实验对水的要求有那些?这些问题以前对我来说具有一些模糊的概念,前几天参加学校的纯水装置的招标,阅读有关的一些资料,初步了解了相关的知识,现在拿来和大家分享,绝大多数都是本人从外文资料翻译过来的,不当之处还望各位批评。这些资料也包括freecell战友在该版块的精华贴,在此也表示感谢!实验室常见的水的种类:1、蒸馏 ...

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核酸分子量、拷贝数计算方法

1A260 吸光度值=ds DNA50mg/ml=ss DNA33mg/ml=ss RNA40mg/ml(OD260) x (dilution factor) x / (1000) = mg/mlMW = 克/摩尔 1 摩尔= 6.02 x 1023 摩尔分子(拷贝数)平均分子量:dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基)ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基)ssRNA=( ...

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免疫检测试剂中常用的防腐剂

免疫检测试剂中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。1. 叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;2. 硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;3. 市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。4. 如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试剂放4度冰箱,抗体、酶等加甘油分装冻存即可。 ...

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疟原虫培养方法

疟疾不完全培养基(Uncomplete Malaria-Culture Medium,UMCM)成分包括RPMI1640 10.43 g/L,Hepes 5.92g/L,NaHCO3 3g/L,调至pH 7.3-7.4,不加血清,过滤除菌,�20℃保存。临用前加AB+血清至终浓度为10%即配成疟疾完全培养基 (Complete Malaria-Culture Medium,MCM),4℃保存,限用 ...

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多肽的基本常识

保存:  大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问 ...

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同步加速器简介

同步加速器是做蛋白质晶体 X-ray 衍射必不可少的大型设施。同步加速器是一��形的粒子加速器,使用磁�(���粒子在�行中可以改�方向)及��(加速��粒子)��行中的��粒子束同步化操作。粒子�旋加速器使用均�的磁�及固定�率�化的��加速��粒子,如果改�其中一���同步粒子�旋加速器,�者都改���同步加速器。藉著改���使��粒子�得能量,同步加速器中的粒子束具有固定�道,在抽真空的�境 ...

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核磁共振的原理

NMR(核磁共振)nuclear magnetic resonance。A phenomenon in which transitionsin the magnetic energy states of the nuclei of atoms are induced when the atoms are placed in a static magnetic fieldand subjected ...

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植物血凝素的制备方法

植物血凝素也称为植物凝集素(PHA),可自制也可购自商品。自制的方法常用生理盐水提取法。  (A)干品制备法(1)选广东鸡子豆10g,用蒸馏水冲洗,置培养皿内用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留间隙置37℃。恒温箱内24-48小时;(2)在无菌条件下研碎鸡子豆,加生理盐水30ml,摇匀后放入4℃冰箱24小时,第二天再加生理盐水70ml,再置4℃冰箱内24小时。每8-12小时摇荡一次。(也可一次性加1 ...

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吉姆萨染色的原理

吉姆萨(Giemsa)染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液 ...

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移液器使用宝典-规范操作、日常维护和你所不知道的技巧

1 设定移液体积l 从大体积调节到小体积时,为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可;l 从小体积调节至大体积时,可先顺时针调至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证最佳的精确度。2 装配移液器吸头l 单道移液器,将移液端垂直插入吸头,左右微微转动,上紧即可 用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的,这样操作会导致移液器部件 ...

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小鼠免疫程序

一、抗原的准备1、收到抗原时,首先要了解抗原的种类、性质和浓度,以便采取不同的处理方法。2、多肽抗原,一般分多肽―偶联KLH和多肽―偶联BSA(或GGG)或裸多肽三种。多肽―偶联KLH一般用于免疫,而多肽―偶联BSA或裸肽一般用于检测,在免疫时注意区分使用。3、分装(1)收到抗原后,应及时按免疫需要分装,避免反复冻融。(2)如抗原是大肠杆菌重组蛋白,可能存在不溶性沉淀,分装前,应用超声粉碎仪粉碎, ...

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比色皿的使用

比色皿清洗液:浓盐酸:甲醇:水=1:4:3如果比色皿被有机物污染,宜用盐酸―乙醇(1:2)混合液浸沉,也可用相应的有机溶剂浸泡洗涤。如:油脂污染可用石油醚浸洗,铬天青显色剂污染可用硝酸(1:2)浸沉等。比色皿不可用碱液洗涤,也不能用硬布、毛刷刷洗。一个干净的比色皿装满水后,相对于空气应有表中所得到的吸光度: λ(nm) 吸光度光学玻璃皿 650 ...

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