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骨髓细胞染色体标本的制备

一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养可分短期培养和直接制片法,无论哪种其培养液中均不需加PHA。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操 ...

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微生物鉴定方法-代谢指纹法

目前常见的微生物鉴定原理有以下几种:1. 酸碱反应:细菌代谢碳水化合物,一般产生酸性物质;分解蛋白质或氨基酸,则产生碱性物质,根据不同细菌的理化性质不同,测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色,来判断菌种。2. 酶谱分析:根据细菌生长产生酶的特性,在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中的酶结合成荧光物质,可以在较短的时间判定菌种。3. 高压液相色谱分析:用气相色谱检测细菌在液体培养基 ...

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细胞的破碎

1、高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。2、玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。3、超声波处理法:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用 ...

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放射性同位素概述

一、放射性同位素的特点  众所周知,放射性同位素(radiosotlope)是不稳定的,它会“变”。放射性同位 素的原子核很不稳定,会不间断地、自发地放射出射线,直至变成另一种稳定同位 素,这就是所谓“核衰变”。放射性同位素在进行核衰变的时候,可放射出α射线、 β射线、γ射线和电子俘获等,但是放射性同位素在进行核衰变的时候并不一定能同 时放射出这几种射线。核衰变的速度不受温度、压力、电磁场等外界条 ...

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常见化学实验仪器的名称及功能

实验仪器是进行化学实验的重要工具。“工欲善其事,必先利其器”,实验工具的齐备与否,直接影响到实验的成功与失败。根据不同的实验目的,应选择相应的实验方法,用不同的实验仪器才能进行实验。而实验仪器的构造和性能又决定了它特有的操作方法和不同的适用范围。所以必须对化学仪器的有关知识及功能有一个完整的了解,才能掌握它、正确地使用它,迸而在熟练基础上达到得心应手;完成好各种实验。 这里向大家介绍常见化 ...

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检测数据处理基础知识

误差及相关概念 → 真实值与标准值  误差是测量值与真实结果之间的差异,要想知道误差的大小,必须知道真实的结果,这个真实的值,我们称之“真值”。   1. 真实值  从理论上说,样品中某一组分的含量必然有一个客观存在的真实数值,称之为“真实值”或“真值”。用“μ”表示。但实际上,对于客观存在的真值,人们不可能精确的知道,只能随着测量技术的不断进步而逐渐接近真值。实际工作中,往往用“标准值”代替 ...

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试验室盐雾试验溶液调制方法

中性盐雾试验(NSS试验)A、覆盖层,a盐溶液采用氯化钠(化学纯、分析纯)和蒸馏水或去离子水配制,其浓度为(5%±0.1)(质量百分比)。雾化后的收集液除挡板挡回部分外,不得重复使用;b.雾化前的盐溶液的PH值在6.5~7.2(35±2℃)之间。配制盐溶液时,可采用化学纯的稀盐酸或氢氧化钠的溶液来调整PH值,但浓度仍要符合a点的规定。铜加速乙酸盐雾试验(CASS试验)B.金属覆盖层,a.将氯化钠 ...

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标准溶液的配制方法及基准物质

1标准溶液的配制方法及基准物质 标准溶液是指已知准确浓度的溶液,它是滴定分析中进行定量计算的依据之一。不论采用何种滴定方法,都离不开标准溶液。因此,正确地配制标准溶液,确定其准确浓度,妥善地贮存标准溶液,都关系到滴定分析结果的准确性。配制标准溶液的方法一般有以下两种:1.1直接配制法用分析天平准确地称取一定量的物质,溶于适量水后定量转入容量瓶中,稀释至标线,定容并摇匀。根据溶质的质量和容量瓶的体积 ...

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General Reference

Units1 mg = 10-3 g1 ug = 10-6 g1 ng = 10-9 g1 pg = 10-12 g 1 kb of double stranded DNA = 660 kD 1 kb of single stranded DNA = 330 kD 1 kb of single stranded RNA = 340 kD Average MW of a deoxynucleotid ...

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Protocol for Trichloroacetic Acid (TCA) Precipitation

IntroductionThe efficiency of nucleotide incorporation in DNA/RNA polymerization reactions (e.g. transcription reverse transcription and DNA replication) can be determined by trichloroacetic acid (TCA ...

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Ethidium bromide

Introduction Ethidium bromide (EtBr) 38-diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide is commonly used as a non-radioactive marker for identifying and visualizing nucleic acid bands in electropho ...

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Exposing gels and plates containing radioactive samples to X-ray film

Although most people use the PhosphorImager for western blots kinase assays and methionine-labeled samples X-ray film remains the best way to expose peptide maps and prep gels. Terminology Autoradiogr ...

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Bench Top Radioactive Work Protocol

Log in radioactive material received and deduct amount of radioactive material used in each experiment in Radioisotope Log Book. Clear your bench top work area and make sure it is clean. Put on your l ...

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Radioiodination

Purpose and backgroundsPrinciple of radioiodinationAddition of oxidizing reagents (such as chloramine-T or peroxidase+H202) converts I- to I+ or I3-. This highly reactive molecule attacks o-position o ...

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Use of Micropipets

A. Gilson-style Pipetmen Micropipets (and similar models) We primarily use the Gilson micropipets in the core course labs. We have four sizes identified by the number on the round button on the plunge ...

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Histochemistry - Introduction

A few cell types are thin enough to be viewed directly in a microscope (algae protozoa blood tissue cultures) but most tissues (kidney liver brain) are too thick to allow light to be transmitted throu ...

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Mouse Compete Blood Counts

Materials: 250 µL of fresh mouse blood in plastic tubes containing EDTA. RBC lysis buffer (388 mM NH4Cl 29.7 mM NaHCO3 25 µM Na2EDTA) 20.75g. NH4CL2.5g NaHCO30.093g Na2EDTA1L H2OHemocytometer Hema ...

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General Cloning Protocols

Large Scale Preps: (See Large scale plsasmid prep protocol for more details) Cultures: Inoculate a 5 mL LB/Amp (50 - 100 µg/mL) culture in early a.m. with a single colony. Use all 5 mL to inoculate a ...

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糖尿病动物模型原理及方法

StzSTZ 诱发糖尿病动物模型原理如下:STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏,可造成1型糖尿病模型;而注射较少量STZ时,由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能, ...

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Complete Mouse Necropsy

Euthanasia Euthanasia and mouse necropsies require prior IACUC approval. The mode of euthanasia should be chosen which minimizes pain or distress to the animal and provides biologically meaningful sam ...

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