在经历了一段时期测量技术的发展和近期物理学家带来的技术革新的冲击后,2008年,生物学家强有力的工具--高分辨率荧光显微镜问世了。
《Nature Mothods》2008年年度技术
有关膈淋巴系统的分布和结构,目前仅有少量的文献报道,而且多数的实验结果为来自鼠类,迄今为止,对家兔膈淋巴系统的系统研究尚未见有报道。搞清膈淋巴系统的分布和结构可为研究腹膜腔内物质的转运机制提供形态学资料。我们采用自行研制合成的一种水溶性淋巴管铸型剂(合成树脂三元共聚体的乳状溶液,共聚体含量占50%),用扫描电镜淋巴管铸型技术对家兔膈淋巴管的三维结构进行了研究。 材料和方法 一、标本 家兔58只,平 ...
专家姓名:宁进,男 单位:Leica公司 职称:高级工程师 主讲内容:显微镜和图像处理 讲课形式:专家答疑 其主要围绕以下几点进行答疑: 1.常规显微镜的原理及应用 2.荧光显微镜的原理及应用 3.激光共聚焦显微镜的原理及应用 4.图像采集、处理、分析的原理及应用 1.【清风笑】请教:CCD的类型,以及市场上常见的型号、厂家和价格?Metor II型号属于什么档次的采集卡? ...
chujun_hust:我现在已经筛选出高表达EGFP的细胞,我想测量细胞数量与GFP荧光强度的相互关系,我设计了一个方案:把不同个数的细胞接种到96孔板中(比如1X102~1X105个/ml),然后只利用倒置荧光显微镜测量出每孔的总荧光强度,不知道能不能测出来啊?????不知道怎么测啊?或者有没有其它好方法啊? schoman:还是用流式来测吧,比荧光显微镜方便,结果好。流式现在到处都是,而且又 ...
一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低, 传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构) 产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦 ...
激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),有时也被称为激光扫描细胞仪(Laser Scanning Cytometer,LSC)是八十年代迅速发展起来的用于分析细胞学的新型仪器。LSCM与普通光学显微镜相比优点明显,分辨率、灵敏度、放大率和荧光检测信噪比大大提高。对活细胞可以做分层扫描后,进行三维重建和测量分析,对细胞内微细结构的动态变化 ...
yszwyd117:在2003年的一篇综述中侯春林提到显微外科未来的发展方向是应用超级显微镜,请各位高手指教:何谓超级显微镜?如何界定?应用范围?是否就是神经外科的那一种? whoami:侯春林那篇文章主要是讲显微外科与皮瓣的。超级显微镜提了一下,是指先进的光学成像设备。超级显徽外科技术具有三个显著的特点。 ①使用更精细的显徽手术器械。 ②发挥更高超的显徽操作技能。 ③完成更细小的显徽血管吻 ...
火流:偏振光显微镜和相差显微镜是不是一种东西? goooogle:偏光一般用在看矿石,晶体等非生物样品上,在生物学领域用的很少。相差是一种增加对比度的方法。可以在不染色的情况下看到活体细胞。 goooogle:显微镜哪个牌子好? Fang CY:当然是日本的OLYMPUS了,不过价钱也很好了。 JianH:功能最多、质量最佳的是德国莱卡,但价格最高;最便宜的是日本OLYMPUS,质量居中;价格合 ...
激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning Confocal Microscopy ,简称LSCM)是近代生物医学图像仪器的最重要发展之一,它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。已广泛应用于细胞生物学、生理学 ...
显微镜按工作媒介可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。本编介绍这两类显微镜的工作原理和适用的样品制作方法。 第一节 光学显微镜工作原理 1.1 人眼睛的分辨率 人的眼睛是目视光学仪器的最终接收器,这里仅研究与我们有关的内容人眼睛的分辨率。眼睛能分辨开两个很靠近点的能力称为“眼睛分辨率”,这与眼睛的结构有关。以下从三个方面来讨论人 ...
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。 —、光学显微镜 (一)、普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组成,是显微镜的主体,为了消除球差和色差,目镜和物镜都由复杂的透镜组构成;③机械装置,用于固定材料和观察方便(图 ...
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Introductory Concepts When specimens living or non-living organic or inorganic absorb and subsequently re-radiate light we describe the process as photoluminescence. If the light emission persists for ...
共聚焦显微镜的优势: 1、高分辨率 16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光,共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及,这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。 2、断层扫描 共聚焦采取电动马达自动控制步距,使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴上成像的XZt、YZt的操作变得简单易行。而且断层扫描的优势明白人一想就 ...
一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面 ...
丁香园网友dwp123的问题为: 我实验室有广州光学仪器厂生产的倒置显微镜一台和数码相机一台,想给细胞拍照,有人说直接从目镜中拍摄,有资料说需要一转换接口,有没有哪位院友有这方面的经验,可否介绍介绍,能不能提供转换接口的型号及其厂家 丁香园网友swan119的观点为: 根据以下步骤你就可以 1、确定你数码相机的品牌和型号 2、确定你显微镜的品牌和型号 3、准确搞清楚数码相机镜头直径以及是否可以加装 ...
电镜的主要结构:电子光学系统、真空系统、供电系统。 1.电子光学系统1)照明部分 (1)阴极:又称灯丝,一般是由0.03~0.1毫米的钨丝作成V或Y形状。 (2)阳极:加速从阴极发射出的电子。为了安全,一般都是阳极接地,阴极带有负高压。 (3)控制极:会聚电子束;控制电子束电流大小,调节象的亮度。 阴极、阳极和控制极决定着电子发射的数目及其动能,因此,人们习惯上把它们通称为“电子枪&r ...
全内反射荧光显微术(Total internal reflection fluorescence microscopy TIRFM)是利用全内反射产生的消逝波激发样品,使样品表面数百纳米厚的薄层内的荧光团受到激发,再用高灵敏度和高时间分辨率的摄像机CCD来捕捉荧光并用计算机进行显像,从而实现对生物样品观测的一种新生技术。由于消逝波特点及CCD的优势使全内反射荧光显微镜具有高信噪比和高时间分辨率,因此它在对单分子的动态观测具有很高的应用价值。本文将对全内反射荧光显微镜的原理及应用和发展展望作一个简要的介绍。
1、使用方法: (1)将材料片放在载物台上。 (2)开启荧光显微镜稳压器.然后按下启动组点燃紫外灯15min内不得关闭,关闭后3min内不得再启动。 (3)将激发滤光片转至v,分色片调到v,选用495或475nm阻挡滤光片。 (4)选用uvFL40、uvFL100荧光接物镜镜检。 (5)在玻片上加无荧光油,先用40 x,再用100 x调焦镜检.呈现荧光。 (7)因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长 ...