细胞分析

调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析过程1．离心收集细胞，PBS洗1～2次。2．1％多聚甲醛低温下固定15min。3．3ml PBS洗1次，70％乙醇固定，冰箱内放置1～3天。4．PBS轻洗1次5．细胞与TdT标记液37℃孵育，时间1～2h。6．PBS轻洗1次。7．细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。8．含0.1％ Triton-X 100的PBS轻洗1次。9．1ml ...

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备，染色后也能在荧光显微镜下进行观察，在某些实验条件下 ...

1．离心收集细胞，PBS洗1～2次2．1%多聚甲醛低温下固定15min。3．3ml PBS洗1次，70%乙醇固定，冰箱内放置1～3天。4．PBS轻洗1次。5．2×105细胞与12.5μl的缺口平移缓冲液在15℃共孵育6h，每过15min振动1次。6．PBS轻洗1次。7．细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。8．含0.1%Triton-X 100的PBS轻 ...

流式细胞仪血小板分析应用范围 通过分析信号传递、细胞骨架结构、颗粒释放、糖蛋白构形、膜磷脂、与抗凝因子的结合和微粒形成，分析血小板活化，血小板对刺激物的反应性 通过分析受激后表面结合蛋白触发凝血链式反应和表面糖蛋白缺陷检测，分析血小板止血功能的获得性和遗传性缺陷 结合血小板大小，检测血小板RNA含量，分析血小板成熟度，计数网织血小板 发现血小板抗体，做定性和定量分析 血小板分析的临床应用 血小 ...

基本原理　　其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。研究表明，用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色，其DNA可染性降低。许多学者把这种D ...

流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin V/PI双染色法 基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V是一 ...

基本原理　　经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细 ...

活体流式细胞仪(In vivo Flow Cytometer IVFC) 是一种新的生物医学光学仪器，结合活体（近红外）实时高速影像方法和体外流式细胞仪的概念，可实时检测活体CTC并可以进行定量分析与检/监测，可用于实验室对肿瘤治疗效果的早期实时监测及评估，药物的早期筛选等。 IVFC技术原理是：带有荧光标记的癌细胞在流动过程中经过放置于血管某处横截面的一束激光，其受激发 ...