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分子生物学

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免疫火箭电泳技术

一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中,在电场作用下,引起抗原抗体的迁移和相互反应,当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰,由于电泳继续进行,样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰,因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前,直到再无游离抗原而反应终止,形成上行火箭状的沉淀峰,其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较, ...

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RNA电泳

①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。 ②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶倒胶时溴化乙锭(E直接加入凝胶中。 ③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE 液面只能刚好同胶面平齐缓冲液不要淹过胶面。 ④点样时样品RNA 每10μl 加入2μl 上样缓冲液上样缓冲液是用DEPC 处理的水配制的5 ...

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醋酸纤维素薄膜电泳

醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体,有以下优点: ①电泳后区带界限清晰; ②通电时间较短(二十分钟至一小时); ③它 对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无 拖尾现象; ④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全 无色。它的电渗作用虽高但很均一,不影响样品的分离效果,由于醋酸纤维素薄膜吸 水量较低,因此必 ...

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毛细管电泳仪的保养

卡槽的清洁 松开固定卡槽前方Holder的螺丝,用羊毛刷及ddH2O清洁卡槽,然后用干净的刷子将其擦干,如果可以的话,可以用异丙醇,甲醇或者乙醇代替水进行清洁,这样保存的时间较长。 压力电极的清洁 吸入端电极的清理非常重要,利用甲醇,异丙醇,或者乙醇清洁内部及其顶端。在电极内部小孔的顶部涂上一层薄薄的润滑油进行有效的防护。压力电极底部边缘的两个小孔需要用羊毛刷和水每个月进行清洁。 毛细管卡槽的清洁 ...

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毛细管电泳仪的使用

准备工作 1. 毛细管的制备: ① 剪略长于需要长度的毛细管(使用专用的裁剪纱布),断端利用镊子小心移除。 ② 烧窗:从毛细管进液端开始到实验者需要长度的位置烧窗,窗口尽量小,过程中可用防护工具对窗口两端的毛细管进行防护,烧好的窗需用粘有酒精的棉花擦拭。 注:检测的有效长度为从毛细管进液端到检测窗之间的距离,这个距离一般根据实验者的需要自己掌握。 ③ ...

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电泳仪电源使用常规问答

用户:请就电泳仪电源的基本性能做一介绍。 工程师:在电脑型电泳仪电源中可分为两类:精简型和多用型,精简型均为双稳型,而多用型都是三稳(三恒)型。无论有几种稳定功能,电泳仪电源在实际工作时只能稳其中一种参数,至于稳哪一种参数,要看电泳仪电源的设定以及电泳仪的等效负载电阻而定。 电泳仪电源输出的所有参数根据其型号的不同都有一个特定的工作范围,如果实际需要超过这一范围,就应当选择能够满足使用的另外型号的 ...

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EPS-300电泳仪的使用方法

使用方法 1、首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。2、电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3、接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。4、工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。注意事项 1、 ...

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交叉电泳实验技术

(一)原理 交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向泳向含抗体的琼脂凝胶中,于是该抗原样品中的各个抗原成分和它相对应的抗体依次形成若干锥形沉淀线,根据沉淀线的位置及面积(或高度)可确定该抗原的质和量。 此试验可以用来鉴定抗原,即与标准抗原抗体系统相比较,就可知待测样品中抗原的质和量。此法也 ...

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ACS2000高效毛细管电泳仪使用说明

一、使用范围 ACS2000高效毛细管电泳仪系统具有高效、快速、经济、进样量小、灵敏度高等优点,可广泛应用于环境保护、生物化学、医学卫生、临床检测、食品卫生、药品检测、农业化学等 领域的生产、教学和科学研究。 二、操作程序 1、接通电源,仪器预热30分钟。 2、将毛细管的内壁用相应的溶液清洗。 3、选择所需的工作参数。 4、进样前先给仪器跑基线,基线平稳后再进样。 5、实验结束后关闭电源,并清洗毛 ...

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DYY-2C电泳仪的使用

1、接好电源线并确定与有接地保护的电源插座相连。 2、按颜色接好电源槽和电泳仪的连接导线,并上好电泳样品。 3、开启电源开关。 4、此时数字显示屏交替显示“dyy”和“2c”字样,然后显示上次工作的设定值,可直接启动输出。 5、若要改变其数值可按上下键调节,若需持续改变,可按住按键不放松,当达到所需数字时松开即可。 6、希望查看并设定电流和定时时间, ...

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电泳仪的使用方法

电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质 ...

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