基础知识

western使用试剂汇总个人做western已快半年，下面把个人用过的试剂总结一下，可能每个人做的蛋白不一样会有少许出入。但以下试剂应该是必备！希望对各位新做western的朋友有个帮助。主要产品可在公司订购。建议刚开始做先不要买小公司产品，尽量用大公司成套产品做稳定了，再想着从小公司买便宜试剂或粉剂自己配制，以节约费用。其实国内许多公司的成套试剂，质量还不错，比自己配要方便，节约时间。一般产品公司的网站都有 ...

针对核酸序列的新蛋白预测就是在核酸序列中寻找基因，找出基因的位置和功能位点的位置，以及标记已知的序列模式等过程。在此过程中，确认一段DNA序列是一个基因需要有多个证据的支持。一般而言，在重复片段频繁出现的区域里，基因编码区和调控区不太可能出现；如果某段DNA片段的假想产物与某个已知的蛋白质或其它基因的产物具有较高序列相似性的话，那么这个DNA片段就非常可能属于外显子片段；在一段DNA序列上出现统计上的规律性 ...

对蛋白组学方面的新手很有用。MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY REVIEWS, Mar. 2002, p. 39–63Molecular Biologist’s Guide to ProteomicsPaul R. Graves1 and Timothy A. J. Haystead1,undefinedDepartment of Pharmacology and Cancer Biology, Duke University,1 and Serenex Inc.,2 Durham, North Carolina 277 ...

后基因组时代，蛋白质研究又掀起新一轮的高潮，掌握基础的蛋白质技术，是蛋白质研究这个行当中所有人都应该做的。蛋白质技术包括太多，我在这里只想与战友们一起讨论关于蛋白质定点突变的技术。结合自己的实验研究，我翻译了一些手头的资料，拿到这里跟大家讨论，园子里高人甚多，希望我这块砖能引出更多的玉来。参考文献：PCR Approaches to DNA Mutagenesis and Recombination---An OverviewBinzha ...

蛋白纯化经验指南（）摘自中国色谱网1) 白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋问有哪些可能会出现这种原因？怎么解决？测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助溶剂提取后，可以用GST做亲和层析，但效率只有50～60％左右。洗脱完融合蛋白不需要助溶剂，但这样的条件下切割完后目的蛋白会沉淀，我用0.5％CHAPS助溶可勉强溶解部分，目的 ...

把您的实验好习惯说出来！ 作者：judge0zz8 文章来源：科学网论坛 实验中的每个环节都很重要，忽略任何一个都可能导致实验的失败。良好的习惯可以提高工作效率、降低实验成本、实验中出现0失误！每个人在实验中都有自己的一些好的习惯，把您的好习惯说出来吧！让大家相互学习，让大家一起把实验做好！ 下面整合了其他论坛里的一些心血，抛砖引玉，希望大家都把自己的优点说出来： tip头吸完后马上从移液器上取下来，以免忙乱的时候又以同一tip汲取 ...

毕赤酵母表达从入门到提高本文所涉及的技术要点主要来源于相关文献、网络和书籍，此外，一些操作中的技巧及经验等来自于本人及同学、朋友的总结，仅供大家参考，同时也请下载者不要传播尤其是以商业为目的的复制、传播等等；如有转载、传播请注明来源于“螺旋网”。若本文侵犯了您的版权或有任何不妥，请Email：kaosy@163.com告知。此外，由于学识、经验有限，本文难免会存在一些错误或缺陷，敬请不吝赐教，联系方式：kaosy@163 ...

生物传感器是利用附着在传感器界面上的待测生物分子与环境化学物质，或特定分子间专一性的交互作用后产生 感应信号，作为生物分子间交互作用(biomolecular interaction analysis，BIA)的检测装置。随着微机电及光电技术迅速发展，整合了光机电并应用于生物传感器上，已经开发出不同的研究领域，如：共轭焦镭射扫描荧光显微术 (confocal laser scanning fluorescence microscopy，C ...

蛋白的复性是一个世界性的难题，没有通用的方法，甚至没有靠得住的规律，只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了，如果有人知道原创作者或网上出处，请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体：包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性：一般含有50%以上的重组蛋白，其余为核糖体元件、RNA聚合酶、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等，环状或缺口的质粒DNA，以及脂体、 ...

如题。本书全面介绍目前蛋白质技术理论及应用，全书共 3843 页，够厚的吧。目录如下。Chapter 1 Strategies of Protein Purification and CharacterizationUnit 1.1 Overview of Protein Purification and CharacterizationUnit 1.2 Strategies for Protein PurificationUnit 1.3 Protein Purification Flow ChartsU ...

双向电泳实验前一天将所需的烧杯,试瓶,玻棒,量筒等泡酸.并向准备间要求大量的双蒸水.第一天,准备试剂.1.水化液Reagent Quantityurea12gChaps0.5gBromphendblue50μl 1%solution加双蒸水定容至25ml,1ml分装贮存于-20℃1)加双蒸水搅拌均匀,要求没有气泡和颗粒,否则会影响实验结果.尿素可以在27℃水浴中溶解,温度不可过高.2)DTT和IPGbuffer临用前加:1ml ...

～～～蛋白质技术讨论版170000帖庆典活动～～～蛋白质技术讨论版作为实验技术讨论区一个重要的板块，长久以来得到众多热心的战友厚爱和支持。为了答谢战友们的关心和维护，现举办十七万帖有奖抓图活动，希望广大战友在这个充满激情的夏天变得更加富有活力。我们有信心把蛋白版办成丁香园的精品版块，我们将向更高的目标迈进！我们期待每一位战友的参与！在这里感谢大家长久以来的热心和关爱，你们才是蛋白版的支柱和主人～～～第十七万帖抓图 ...

以下是关于蛋白质测序的论坛帖子,希望有所帮助:蛋白质测序公司http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1424257&sty=3&keywords=%B5%B0%B0%D7%D6%CA+%B2%E2%D0%F2蛋白质测序联系http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/50023_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65 ...

现在大家都是做SDS-PAGE或者双向电泳比较多，而做非变性电泳的似乎少一些。而我本人接触非变形电泳较多，一直认为它还是很有特点的，能够有很多独特应用之处的，所以在此结合我本人经历向大家介绍一下非变性电泳。非变性电泳，蛋白质在电泳过程中是处于非变性的，电泳时蛋白的迁移率取决于蛋白的电荷和分子量，非变性电泳在完成电泳后，可以进行蛋白质活性测定（如果是酶的话，可以进行酶活检测）或者检测同功酶，或含亚基的完整蛋白的分 ...

整理了一下十月份无人应助贴，以支持版主的工作已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接，谢谢【求助】我想求教一个关于WESTERN的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4772826&sty=1&tpg=7&age=0【求助】 请问有做pgap表达系统的么http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id= ...

无需破坏胚胎，能够量身定做，没有排异反应，甚至可以克隆某年某月的某一天，脑子坏了，不再识字；从口腔刮点细胞，导进几个转录因子，变成干细胞；回种到脑子里，神经再生，突触再连，恍然大悟—原来这就是今夏炒得沸沸扬扬的诱导干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS cells），为包括Nature在内的各大媒体竞相报道，为大大小小实验室人员广泛研究讨论，丁香园干细胞版亦有精华讨论【新进展】干细胞新进展－－成体细胞 ...

给大家分享一下做了两次itraq实验和分析后的一些经验，有什么说的不对的，请各路大神指教蛋白质组学中itraq数据一般来说做如下分析的比较多1.差异蛋白筛选 2.层次聚类分析 3.差异蛋白GO分类 4.差异蛋白pathway分析 5.差异蛋白互作网络构建我也只能简单介绍一下这些数据分析1.差异蛋白筛选，一般用到的两个值是foldchange值和p值，其中前者是表达量的倍数值，后者是学氏-T检验值，一般都是运用这个两个值来筛选的 ...

蛋白质的自述　我姓蛋，名白质。出生在核仁医院里，从小我就没有见过我的父母，据护士姐姐告诉我，我是由mRNA大叔和tRNA阿姨把我送进医院的，而我的父母DNA早在我还没有出生的时候就过世了，这在常理来说有点奇怪，可我们蛋氏家族向来如此。我的父母在死前留下了一串密码，用了家族的语言—核苷酸语，只有我们家族的人才能看懂，交给了mRNA叔叔：3个核苷酸编码就是一种氨基酸，tRNA阿姨就帮我找来了氨基酸，才让我得以诞生。我非常 ...

下面这个网站，大家可以看看。http://www.stcsm.gov.cn/learning/lesson/shengwu/20030211/lesson-1.asp第一课　概论　　一、蛋 白 质 组 学（Proteomics）　　90年代初期开始实施的人类基因组计划，在经过各国科学家近10年的努力下，已经取得了巨大的成就。不仅完成了十余种模式生物（从大肠杆菌、酿酒酵母到线虫）基因组全序列的测定工作，还有望在2003年提前完成人类所有基因的全序列测定。那 ...

本人原创制作PDF，内容链接十分齐全，阅读十分便利。感谢墨尔本大学分子生物学实验室的网页内容。同时支持icesugar75 Frederic codegreen 三位版主的工作。（read MM ：chhualongdxy）ContentsIsolation of DNA fragments using glass milk (GENE-CLEAN) SOUTHERN BLOTSOUTHERN ANALYSIS OF MOUSE TOE/TAIL DNA Northern transfer p ...