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AFLP-PCR

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【心得】我三年来关于AFLP的科研体会,服务大家(原创)

各位战友,如果你是奋战在AFLP的战场上,我想说的是无论何时你一定得战胜平时科研中得难以名状得痛苦,甚至是老师和同学不以理解得寂寞。AFLP的确是种技术难度很高得分子标记,从酶切到银染,步步艰辛。往往分子标记大家都觉得以PCR为基础,不至于太难,其实做出来AFLP,尤其是做出好的结果真不是件容易的事儿。我曾经在研究生第一年没有任何结果,建立方法和平台都不知道从哪里下手,身边没有一个可以帮助我的人。我是强烈的推荐 ...

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AFLP-PCR实验

一、原理 AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺序和接头顺序就作为以后PCR反应的引物结合位点。实验中,根据需要通过选择在末端上分别填加了1~3 ...

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AFLP-PCR简介

概述 AFLP(amplified fragment length polymorphism,扩增片段长度多态性)是由荷兰科学家Pieter Vos等于1995年发明的分子标记技术。文章发表于《Nucleic Acids Research》Vol.23。AFLP是基于PCR技术扩增基因组DNA限制性片段,基因组DNA先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到DNA片段的末端,接头序列和相邻的限制 ...

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AFLP-PCR

简介 AFLP-PCR或AFLP是一种基于PCR的工具,用于遗传学研究,指纹,DNA和基因工程技术在实践中的。在20世纪90年代初开发的Keygene,AFLP使用限制性内切酶消化基因组DNA,然后连接适配器的粘性末端的限制性片段。限制性片段的子集,然后选择被放大。此选择是通过使用的适配器序列互补的引物,内的限制性酶切位点的片段(如在下面详细描述)的限制位点的序列和几个核苷酸来实现。的扩增片段在 ...

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分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接连接后的粘末端顺序和接头顺序就作为以后PCR反应的引物结合位点。实验中根据需要通过选择在末端上分别填加了1~3个选择性核苷 ...

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