RNA原位杂交

RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种：即特异性cDNA，cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。 1. 单链cDNA探针： 由于cDNA中不存在内含子及其它高度重复序列，又克服了双链cDNA探针在杂交反应中两条链之间复性的缺点，从而提高了杂交反应的敏感性。但由于单链cDNA探针的制 ...

在RNA的杂交检测实验中，应用标记的RNA 探针将获得高灵敏度的杂交检测结果，与DNA 探针相比，检测灵敏度提高10-100倍。因为对于不同的杂交体类型来说，RNA-RNA杂交体的结合强度高于RNA-DNA和DNA-DNA杂交体。对于通过Northern blots检测低浓度mRNA，以及原位杂交的核酸定位检测等应用，RNA探针是一种理想选择。RNA探针同样也适用于Southe ...

在RNA的杂交检测实验中，应用标记的RNA 探针将获得高灵敏度的杂交检测结果，与DNA 探针相比，检测灵敏度提高10-100倍。因为对于不同的杂交体类型来说，RNA-RNA杂交体的结合强度高于RNA-DNA和DNA-DNA杂交体。对于通过Northern blots检测低浓度mRNA，以及原位杂交的核酸定位检测等应用，RNA探针是一种理想选择。RNA探针同样也适用于Southern blots，文库筛选，斑点杂交等应用。但是，在RNA探针制备过程和整个杂交实验过程中，必须注意RNAse的防污染操作。

RNA的斑点杂交--样本RNA点膜【试剂与仪器】（1）20×SSC（标准柠檬酸盐缓冲液）（pH 7.0） NaCl 175.3g 柠檬酸钠 88.2g 加H2O至 1000ml 用10N NaOH or 10N HCl调pH至7.0，高压灭菌。（2）37%甲醛（3）甲酰胺（4）2×Denhardt液（5）硝酸纤 ...

1.相似性序列发生Cross－react引起脱靶效应。2.监测手段：对脱靶效应的监测一般通过基因芯片来监测。Gene expression profiling对脱靶效应。3.脱靶效应的特性：转录物表达模式有序列特异性和靶特异性两种。4.大部分脱靶效应具有siRNA序列特异性。低浓度也可能产生脱靶效应，不仅仅是高浓度能产生脱靶效应的假象。脱靶效应在蛋白和mRNA水平同时考虑进行分析，要缜密分析和确定 ...

Core protocol for both mouse and chick embryos Cepko/Tabin lab Embryo preparationFix embryos in fresh 4% paraformaldehyde (or a thawed frozen aliquot) in PBS at 4° C overnight. Dissect embryos (as nee ...

刘默芳，王恩多(中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，分子生物学国家重点实验室，上海200031)摘　要：小分子调控RNA，包括siRNA (small interfering RNA)、miRNA (microRNA)和piRNA (piwi interacting RNA)、hsRNA (heterochromatin associated small RNA)等，是当前生 ...

人、小鼠和大鼠的多种组织来源的高质量mRNA经电泳分离后预转于尼龙膜上预制的即用型Northern杂交膜，免去RNA电泳操作过程可检测范围：0.5-10kb可重复使用提供ExpressHybTM快速杂交液样品可靠的优良品质从1991年始，公司就向广大的生命科学研究者提供高质量的预制杂交膜。而MTN™膜更是在国际著名的学术期刊上有将近3000篇文献引用。严谨的制作过程1.由人、小鼠和大鼠的组织经Ol ...