RNA原位杂交

Reagents: Annealing buffer (5X)Formula 1:50 mM Tris pH 8.0100 mM NaClFormula 2:100 mM Potassium Acetate30 mM HEPES at pH 7.42 mM Magnesium AcetateFormula 3:100 mM Potassium Acetate30 mM HEPES-KOH a ...

Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999) we have systematically analyzed the silencing efficiency of siRNA duplexes as a func ...

SummaryLong DNA oligos containing the target sequence are cloned into LentiLox 3.7 (see protocol). Once clones have been isolated virus is produced by transfecting 293 cells and collecting supernatant ...

My Experience Purifying RNA from E. coliRegarding RNA extraction there is a horrible tendency of people to use kits for RNA extraction with bacteria. With Qiagen (anion exchange) or other silica-bindi ...

PREPARE SOLUTIONS1. SM buffer (1 L):Mix 5.8 g of NaCl 2 g of MgSO4-7H2O 50 mL of 1M Tris-HCl pH 7.5 0.5 mL of 2% gelatin and dH2O to 1 L (Autoclave) 2. TENS buffer (100 mL): Mix 5 mL of 1M Tris-HCl pH ...

PREPARE SOLUTIONS 1. 10mM MgSO4 0.2% Maltose LB (100 mL): Mix 1.0 g of Bacto-Tryptone 1.0 g of NaCl 0.5 g of Yeast Extract and 1.0 mL of 1M MgSO4. Adjust pH to 7.5 with NaOH (Autoclave). Add 2 mL of 1 ...

INTRODUCTION RNA coimmunoprecipitation (co-IP) experiments are an extension of protein co-IP experiments in which in vivo RNA-protein complexes are investigated. This protocol describes how to perform ...

特定基因我们通常可以通过RT-PCR的方法得到其cDNA全场序列，但是在序列两端未知的情况下，这种方法就无法奏效了，这时我们可以根据基因的一段已知序列(或一段同源序列)，利用3'-Race方法获得该基因的3'端序列，或者利用5'-Race方法得到该基因的5'端序列。服务流程:1、先由您提供背景资料，其中包括已知的DNA序列部分，RNA的情况，所扩增基因的估计长度，是否具有同源序列等。2、根据您提 ...

中文版：LightCycler®480 实时荧光定量PCR系统新应用：基于定量PCR的mic roRNA整体分析.pdf英文版：New Application for qPCR-based microRNA Profiling.pdf ...

1 导言小RNA（miRNAs）是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA，它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子，这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说，miRNA通过控制翻译过程来实现对目标蛋白表达的调控。然而，在靶向mRNA降解水平上的基因表达的调控已有报道。因此，有证据显示miRNA能够通过RNA降解来实现对细胞内mRNA浓度 ...

包含siRNA、miRNA、寡核酸合成、LncRNA、细胞组识分析、全基因合成、载体构建、高内涵筛选、小RNA深度测序、表观遗传学等相关的系列产品和服务！提供全面、专业的技术服务和支持！完整的一站式解决方案系统，方便您的研究！让您的研究畅通无阻！Ribobio 2011 总览.pdfRibobio 2011 part siRNA.pdfRibobio 2011 part miRNA.pdf ...

DescriptionRNA extraction using TRI REAGENT. This method gives ample amout of RNA. ProcedureIt is 3 days procedure.Day 1:1. Harvest the cells and centrifuge at 2000 rpm for 5-10 minutes and pour off ...

填补Qiagen空白、不用DNA酶消化的植物RNA提取试剂盒 一般公司多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案 很多植物RNA的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分，造成RNA提取过程中氧化、褐化、降解、由于植物品种的多样性造成情况更加复杂。手工的CTAB类的方法提取因为时间太长，太繁琐，手工方法不在讨论之列。一直以来没有一款好的试剂盒包括qiagen、promega等进口试剂 ...

产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子：人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号，H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA，shRNA经过RISC剪切后形成有2个U突出末端的成熟siRNA。由于H1启动子对转录产物长度的严格限制，基本上杜绝了非特异性干 ...

miRNA mimics是模拟生物体内源的miRNAs，运用化学合成的方法合成，能增强内源性miRNA的功能。 miRNA inhibitor是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶miRNA的抑制剂。 近年来人工合成的miRNA（artificial miRNA，amiRNA）已经成功应用于沉默预期靶基因的表达及其功能研究， 人工合成的miRNAs既能够特异性地沉默单一基因，也可以同时沉默多个相关 ...

核酸序列预测分析的基本思路：0 z' z: X4 }' L# P! }! r5 F当我们得到一个DNA序列时，一般都需要对该片段进行分析，确定它的功能区域，寻找调控区域、编码区域，预测其编码蛋白，这些就是我们研究DNA序列的目的。' }2 I. k8 Q! K# Z5 X% P5 i& e5 N核酸序列的预测就是在核酸序列中寻找基因，找出基因的位置及功能位点，以及标记已知的序列模式等过程。在此过程 ...

　　RiboNucleic Acid 　　由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸因含核糖而得名简称RNA。RNA普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内。RNA和蛋白质生物合成有密切的关系。在RNA病毒和噬菌体内，RNA是遗传信息的载体。RNA一般是单链线形分子;也有双链的如呼肠孤病毒RNA；环状单链的如类病毒RNA；1983年还发现了有支链的RNA分子。 　　　 ...

RNA快速提取程序 　　组织RNA的提取： 将约10～100 mg的组织块置于匀浆仪中，加入1 ml RNA快速提取试剂，进行匀浆；将匀浆液倾入1.5 ml离心管中，加入0.1体积的氯仿，振荡混合20 s；冰上放置5 min；4℃离心12　000 r.min－1 15 min。离心管中的液体分为3层: 上层为无色透明的无机相，RNA保留于此相中；下层为呈淡黄色的有机相，蛋白质 ...

第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因，因为人体细胞自身就是几十分钟（20min？）mRNA被降解一轮，所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素，最常见的就是毛发尤其头发，灰尘，唾液，塑料手套这四个兄弟。针对它们我们应该戴帽子，口罩，橡胶无菌手套，在清 ...

动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解，以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料：Trizol试剂研钵，匀浆器，镊子，铝箔都高温灭菌即可；二、具体过程：1、样品在离体后应迅速冷冻在液氮中，若是比较大块的组织，要尽量把组织剪切成黄豆大小的块，使液氮迅速渗透到组织内部而防止组织内部的RNA降解。组织用铝箔包好或放入冻 ...