其他PCR技术

由于原来的共享平台技术故障，现将共享资源放入新建的信箱。一个好的平台需要大家共同来维护，所以有一些要求，请大家遵守。1.请勿修改登陆密码。2.请勿对外传播本邮箱地址，以及登陆密码。3.请勿更改、删除其中的文件内容。4.有任何问题，请到丁香园PCR技术讨论版相应版块求助。5.为了避免由于访问量和下载量的原因导致信箱被锁的情况发生，请各位站友控制自己单位时间内的下载量。公共信箱：dxypcr_share@126.com密码： ...

PCR讨论总结(PCR、RT-PCR、REAL-TIME PCR本版置顶贴汇总)http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=686472&sty=1&tpg=1&age=0PCR的基础知识http://www.37c.com.cn/topic/004/genediag/http://210.83.8.237/us/tech/tech01.asphttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid= ...

1．材料和方法Access RT-PCR System 试剂盒 (A1250)：Promega 公司产品。500u AMV Rev 目的基因 se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl DNA Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reaction Buff 目的基因1.25 ml MgSO4, 25 mM100ul dNTP Mixture, 10 mM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP50ul Positive Control RNA with Carri 目的基因 (1.25 attomole/ul ...

在丁香园友的奉献和版主的努力下，丁香园引物库和大家见面了。所有引物均为丁香园友提供，欢迎广大战友引用或使用，使用前请自行验证。如使用中有任何问题，请及时反馈我们，以便修订和完善。使用意见反馈请在本贴跟贴，或PM与版主联系。注：不得用于任何商业目的引物库将根据园友提供的引物而不断更新。您付出一点，我们的引物库会更加多姿。提交引物请点击这里人(homo sapiens)内参beta-actin(人或鼠) β-actinβ-act ...

PCR技术讨论版的公共邮箱为：dxypcr@163.com ，备份邮箱：dxypcr@126.com希望战友在上传的时候，同时上传到两个邮箱，谢谢！（大小1G,最大附件30Ｍ）。点击此处去邮箱为了帮助新手尽快熟悉实验，为了方便大家上传及下载资料，我们借鉴蛋白版的宝贵经验，准备设立公共邮箱，欢迎大家踊跃利用邮箱上传及下载资料，战友在上传资料时，先确认公共邮箱中有没有，如果已有上传，原则上不予加分。有需要者ＰＭ与我联系索取密码 ...

最近楼主才回来，由于很长时间不做这方面的工作了，很多新概念和新方法可能跟不上大家了，说的不对请见谅啊。感谢大家的踊跃发言。最近看到很多战友在做miRNA的荧光定量PCR检测试验。也没看见有专门的讨论帖，拿自己以前做的试验晒晒。开个帖子欢迎大家来提问题、讨论。 另外希望各位战友有用没用千万看贴回个贴阿，以免此帖沦丧无尽之海。:D:D:D:D 目录如下：一、MiRNA简介二、反转录引物分类以及设计原理三、引物探针设计四、试验操作 ...

定 量 PCR 技 术 简 介http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=352699&sty=1&tpg=43&age=0定量PCR技术http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=394471&sty=1&tpg=37&age=0竞争定量PCR（competitive quantitative PCR）http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=766244 ...

这是一本有关PCR技术的新书，希望会为你的PCR试验提供帮助！上篇PCR的基本理论与技术第一章 聚合酶链式反应分子克隆(molecular cloning)、DNA测序(DNA sequencing)和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)是当今现代分子生物学的三大主流技术。在这三种技术中，PCR技术在实践中的应用日益广泛并随着分子生物学实验技术的成熟而不断的创新和拓展。早在二十世纪七十年代 ...

前一段时间在百度中搜索，发现多年前写的一个关于荧光定量PCR技术的PPT有很多人看过或引用过，考虑到自己作荧光定量PCR工作已经了五年了，做的实验以及解决的问题远比五年前多了，因此利用过年的时间，写点荧光定量PCR实验中的一些注意事项及感想，无论对错，都是希望对相关的人员有些参考价值。荧光定量PCR原理等大家都已经很熟了，我就不细说了，主要是写一些有人问过的事，希望写的内容是大家都关心的。普通PCR与荧光定量 ...

园子里原来有关于这本书的帖子，采用56邮箱共享，均已失效，现在重新上传，申请版主加分：聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。　　本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR ...

PCR咖啡吧咖啡者，香甘醇酸苦五味俱全，原始而又粗犷，深邃而又耐人寻味。早期“科学咖啡馆”的雏型为J.J.汤姆森在19世纪末建立的卡文迪许物理学会，科学家每天午后茶时漫谈，他们谈他们看到、听到、测试、观察到的现象和发生的事件。卢瑟福在领导这个实验室时把午后茶漫谈变成他领导的科学家们每天最重要时刻。后来传于世的剑桥风格——“在悠闲中治学”、“自由和独立的工作”便源于此。卡文迪许实验室为国际顶尖实验室，在物理、分子生物学方面 ...

一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度 ...

EB是否致癌http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=314272&sty=1&tpg=48&age=0EB浓度的讨论http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=755857&sty=1&tpg=11&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=718917&sty=1&tpg=1&age=0http://www.dxy.cn ...

钓基因的过程中的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=426195&sty=1&tpg=8&age=0PCR的方法作STR的分型http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=632509&sty=1&tpg=8&age=0RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=6 ...

欢迎您来到PCR技术讨论版！最后更新：2006－01－12为了方便新老战友了解和使用本版资源，节省宝贵的搜索查找时间，同时避免一些有价值的帖子随时间的推移而被埋没，我将PCR版从改版后至今的所有帖子筛选了一遍，将有价值的帖子分别进行了归类整理，设此子版。如果把PCR技术讨论版看作是一本书的话，这个整理结果就是本书的目录或者索引。在发贴之前先，请您一定先检索一下相关话题的帖子，以避免对您时间和资源的浪费。帖子的整 ...

请规范发贴，分享贴请在标题前加【分享】，谢谢您的合作。——by 草根我整理的PCR资料.供大家分享.PCR实验技巧增加PCR的特异性：1. prime理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中间序列要多GC,以增加稳定性d. 避免3'端GC rich, 最后3个BASE不要有GC,或 ...

PCR常见问题总汇 　PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在 ...

3月份0回帖:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=2760421&sty=1&tpg=56&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=2764483&sty=1&tpg=56&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=2764651&sty=1&tpg=56&age=0http://www.dxy.cn/b ...

今天查东西，偶然搜到有关ABI荧光定量技术资料，在ABI的代理欧比特网站上，比ABI工程师给的都多，共享出来，大家可以去下载，pdf文件。http://www.orbital.com.cn/jswz.asp?classid1=1定量PCR常见问题解答 相对定量实验入门指南 (AB产品) 绝对定量实验入门指南 (AB产品)基因鉴别试验入门指南 (AB产品) TaqMan Universal PCR Master Mix 使用说明书TaqMan PreAmp master m ...

1. primer Premier 5.0 Demo2.8M。序列分析与引物设计，非常棒的一个软件。http://www.mirror.ac.cn/biosoft/down/PP500Installer.exe2. Oligo 6.65 Demo2.7M，引物分析著名软件，主要应用于核酸序列引物分析设计软件，同时计算核酸序列的杂交温度（Tm）和理论预测序列二级结构。http://www.mirror.ac.cn/biosoft/down/oli6instal ...