RNAi

T℃OS-M6 cells grow in 6-well plates 2ml media total T℃V1PD cells grow in 100mm plates.1: Aspirate off the media from the cells and was the cell monolayers with 2x5ml (To 100mm dish) or 2x1ml (to 6-wel ...

Based on: Wan C.-Y. and Wilkins T.A. 1994. Anal. Bioch. 223:7-12. 1.Collect young expanding leaves (or other tissue) and freeze in liquid N2 and store at -80℃. 2.Pulverize tissue to a fine powder in a ...

Chemicals needed:Glucose L-( )-Arabinose Sigma Cat # A3256 L-Rhamnose Sigma cat # R3875 Cb (carbenicillin) Sigma cat # 1389DL-p-Chlorophenylalanine Sigma cat # C6506Media Recipes:YEG recombination pla ...

RNA interference (RNAi) is a biological process in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into a cell results in targeted post-transcriptional gene silencing.Historically RNAi has been ...

RNA interference (RNAi ) by double stranded RNA (dsRNAs) molecules of approximately 20-25 nucleotides termed short interfering (siRNAs) is a powerful method for preventing the expression of a particul ...

Chemicals needed:Glucose L-( )-Arabinose Sigma Cat # A3256 L-Rhamnose Sigma cat # R3875 Cb (carbenicillin) Sigma cat # 1389DL-p-Chlorophenylalanine Sigma cat # C6506Media Recipes:YEG recombination pl ...

We use the Promega Ribomax Large Scale RNA Production System T7 (Cat. No.: P1300) to produce dsRNAs and the RNAi Exp.html" target=_blank Jack Dixon protocol ( RNAi _Dixon.html" target=_blankdownloaded ...

The Easiest Route to Guaranteed SilencingIncreasing numbers of researchers are using small interfering RNAs (siRNAs) to reduce the expression of specific mammalian genes. Applications of siRNA induced ...

在人细胞中快速、高水平地表达目的蛋白 在2至3个星期内即可获得高效价的病毒 无需噬斑纯化 靶细胞可以是分裂或不分裂的细胞（dividing/or nondividing cell） CLONTECH的Adeno-X™表达系统是一个特别 高效的腺病毒表达系统，用于在人细胞中瞬时及高水平地表达目的蛋白质。由于Adeno-X™病毒DNA中含有特别设计的克隆位点，你可以在2星期内获得高效价的腺病毒 ...

Restriction Map and Cloning Site of the RNAi-Ready pSIREN-DNR Vector. Unique restriction sites are in bold. RNAi-Ready pSIREN-DNR is provided as a linearized vector digested with BamH I and EcoR I. N ...

RNA Marker ( RL1000; RL6000; RL10000) 可以进行一般琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。以RL10000为例，具体使用方法如下：普通琼脂糖凝胶电泳时1.按下列组份配置RNA Marker样品。2.均匀混合后65℃加热10分钟，迅速冷却至室温（最好用PCR仪)。3.使用高质量的琼脂糖，用1×TAE Buffer制备3%凝胶，制胶时凝胶中请加入溴乙锭(最终浓度：1 ...

1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3．分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 Da，计算DNA的终浓度（pmol/ml）。4．将载体DNA去磷酸化。5．按下表将适量的DNA转移至无 ...

体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能，二者之间的关系是蛋白质组研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或 者插入，可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构，对突变基因的表达产物进行研究有助于我们了解蛋白质结构和功能的关系，探讨蛋白质的结构/结构域。而利用定点突变技术改造基因，相信 ...

TRTn3 terminal inverted repeatslacZ5'-truncated lacZ gene encoding beta-galactosidaseLEU2LEU2 gene from S. cerevisiaeampEncodes beta-lactamaseloxPlox site target for Cre recombinaseUses: Gene disrupti ...

摘要 RNAi技术是研究基因功能的重要工具。其原理是对某个已知基因，设计诱导其沉默的dsRNA，通过合适手段导入细胞或机体使产生干涉效应的信号分子siRNA，导致基因表达水平下降或完全沉默。通过基因表型变化，鉴定该基因功能。从RNAi的研究背景和作用机制出发，对近年来利用RNAi技术研究植物基因功能的概况、诱导方法和载体作一综述。 　　关键词 基因沉默；RNAi技术；植物基因功能 　　 　　1RA ...

在活体RNAi关键点：类似药物属性的引入，如稳定性、细胞内的传送、组织的生物可溶性进入合成的siRNA.授予siRNA类似药物的属性化学稳定性的胆固醇共聚的siRNA 显著的改善了其在体内和体外的药物属性。化学稳定性增强的方法：对正义和反义链进行部分的phosporothioate backbone和 2’－O－methyl sugar 修饰，增加其在血清中和组织匀浆中对核酸内切酶和外切酶的抗性。 ...

激活转录因子-5(Activating transcription factor-5,ATF5)在黑素瘤中高度表达，其可促进肿瘤细胞的存活。作者利用基因组规模的RNAi筛选方法，鉴定了ATF5的转录调节因子。

中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所沈南教授领导的研究组整合上海交通大学附属仁济医院风湿科的临床优势和健康所的基础研究力量，继2009年在风湿病学领域最有影响力的杂志ARTHRITIS & RHEUMATISM上报道了miRNA作为负反馈调节分子在狼疮关键致病通路中起了重要作用后，近日又在国际学术期刊Journal of immunology发表了有关miRNA参与狼疮T细胞低甲基化调控的最新研究成果。该工作揭示了miRNA参与狼疮发病的新机制，为今后发展miRNA为靶点的干预治疗提供了重要依据。

microRNA的定量检测与功能分析方法，由QIAGEN公司带来更好的技术支持。讲座内容提要：microRNA研究背景知识介绍；基于SYBR Green real-time PCR的方法做miRNA表达量分析；通过miRNA的模拟物或抑制剂。

奥地利分子病理学研究所，德国Max Planck研究所分子细胞生物与遗传学实验室，Wellcome Trust Sanger研究所等多国的科研工作者在人类染色体分离蛋白研究方面取得新进展，相关成果文章Systematic Analysis of Human Protein Complexes Identifies Chromosome Segregation Proteins公布在Science在线版上。