DNA酶切相关技术

我们描述了观察由噬菌体复制系统中的蛋白质介导的单分子DNA实时复制的方法。

Werner综合症由编码DNA解旋酶和外切核酸酶的WRN基因突变引起，我们提出了一个可以用来研究Werner综合症核酸代谢过程中某些定义不清的基因功能的酵母模型。

基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶，如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等，在基因工程的操作中有着广泛的用途。1．限制性内切核酸酶 限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并在合适的条件下使每一条链一定位 ...

本文主要介绍了DNA是如何修复一些常见的错误

本文主要介绍了质粒DNA的准备

Restriction enzyme digestions are performed by incubating double-stranded DNA molecules with an appropriate amount of restriction enzyme in its respective buffer as recommended by the supplier and at ...

1) The ligation mixture contains the following: vector DNA (~100 ng) insert DNA (equimolar or 2 or 3 X molar concentration of vector) water added to 18 µl 2) Heat the mixture at 45 °C for 5 min. to me ...

Prepare a ligation mix:Ligation Mix (2x)10x ligase buffer1.0 mldigested vector(0.1 mg/ml)1.0 mlH2O6.0 mltotal8.0 mldivide ligation mix into two Eppendorf tubesLigation Rxn InsertControlligation mix ...

Prepare a 100 µl reaction mixture containing the DNA of interest in the appropriate 1X restriction enzyme buffer. Divide the reaction mixture between five prechilled microcentrifuge tubes such that tu ...

1.Vectorpedia： 输入质粒骨架，直接查询，非常方便;http://www.addgene.org/pgvec1?f=v&cmd=listvecinfo2. google检索式子：质粒名 ＋ map 质粒名 ＋sequence ＋filetype:txt or filetype:pdf或者：进入google，点击"图片搜索"，直接查找图谱.3.google scholar: http: ...

限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的DNA序列位点上并在此切割双链DNA。绝大多数限制性内切酶识别长度为4、5或6个核苷酸且呈二重对称的特异序列，切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异。一些酶恰在对称轴处同时切割DNA双链而产生带平端的DNA片段，另一些酶则在对称轴两侧相对的位置上分别切断两条链，产生带有单链突出端（即粘端）的DNA片段。1个单位限制性内切酶是指在最适条件下，在50 ...

DNA重组是将外源DNA与载体分子连接，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。 重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。常用的DNA连接酶是T4噬菌体DNA连接酶，它不但能使粘性末端的DNA分子连在一起，而且能使平末端的双链DNA分子连接起来，但这种连接 ...

分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。

分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。

分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。

质粒载体中限制酶切位点的种类极为繁多，因而通常都有可能找到某种带限制酶切位点恰恰与外源DNA片段本身毫无二致的载体。

质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质

DNA 的定量与连接反应：纯化的gusA 片段与经BamHI/HindIII 作用的pQE31 片段混合后，末端序列互补的部份会进行黏合，但仍须藉由DNA ligase 催化phosphodiester bond 的形成，将缺口接合起来。

Restriction enzymes are expensive ($40 to $200 a vial): keep the enzymes at -20℃. Plan your digests to be small and convenient. The digest is composed of DNA sample (volume should not be more than abo ...