基因克隆

网络 第五节　其它免疫电镜技术 　　一、凝集素电镜标记技术 　　凝集素的特性及标记原理详见第五章　，近年来，凝集素电镜标记技术应用日益广泛，且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多，常用的有凝集素―酶（常用为HRP）、凝集素―生物素―酶电镜标记技术。现将凝集素―酶电镜标记技术（包埋前染色）简介如下（Sterit 和Kreatzberg1987 ...

网络 第四节　免疫电镜胶体金标记法 　　金标法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时，在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色，不需加外进行染色。在电镜水平，金颗粒具有很高的电子密度，清晰可辨。因此，免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地 ...

网络 第四节　免疫电镜胶体金标记法 　　金标法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时，在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色，不需加外进行染色。在电镜水平，金颗粒具有很高的电子密度，清晰可辨。因此，免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地 ...

网络 第三节　免疫酶细胞化学技术 　　一、基本原理 　　免疫酶细胞化学技术是以酶作为抗原抗体反应的标记物，在既不改变抗原抗体的免疫反应特异性也不影响酶活性的条件下，与相应的酶底物作用，形成一种不溶性的反应产物。在光学显微镜下观察时，要求反应的终末产物是不溶性的有色物质，具有可观察性。在电镜下观察时，则要求底物的终末产物具有较高的电子密度。由于辣根过氧 ...

网络 第三节　免疫酶细胞化学技术 　　一、基本原理 　　免疫酶细胞化学技术是以酶作为抗原抗体反应的标记物，在既不改变抗原抗体的免疫反应特异性也不影响酶活性的条件下，与相应的酶底物作用，形成一种不溶性的反应产物。在光学显微镜下观察时，要求反应的终末产物是不溶性的有色物质，具有可观察性。在电镜下观察时，则要求底物的终末产物具有较高的电子密度。由于辣根过氧 ...

网络 第二节　免疫铁蛋白技术 　　一、基本原理 　　铁蛋白是一种含铁约占23%的蛋白质，分子量460kD直径10～12μm。抗体与铁蛋白通过低分子量的双功能试剂结合为一种双分子复合物。此复合物既保留抗体的免疫活性，同时因为铁蛋白含有致密的铁离子核心，铁胶粒直径核心为55～60nm含2000～3000个铁原子，分布于四个区域，形成四个圆形致密区，具有很 ...

网络 第二节　免疫铁蛋白技术 　　一、基本原理 　　铁蛋白是一种含铁约占23%的蛋白质，分子量460kD直径10～12μm。抗体与铁蛋白通过低分子量的双功能试剂结合为一种双分子复合物。此复合物既保留抗体的免疫活性，同时因为铁蛋白含有致密的铁离子核心，铁胶粒直径核心为55～60nm含2000～3000个铁原子，分布于四个区域，形成四个圆形致密区，具有很 ...

网络 第四节　免疫细胞化学技术的某些新进展 　　免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章　叙述，本节　仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 　　【半 ...

网络 第七章　电子显微镜免疫细胞化学技术 第一节　电子显微镜免疫细胞化学技术概述 　　免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可 ...

网络 第三节　凝集素 　　凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。其常见种类见表6-1。常用的为植物 表6―1 常见的凝集素一览表 凝 集 素 缩 定 特异性结合 花生（ Peanut aggluti ...

网络 第二节　葡萄球菌蛋白A（SPA） 　　葡萄球菌蛋白A（Staphylococal Protein A SPA）是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。早在1940年，Vevwey发现在某些金黄色葡萄球菌中，含有一种物质，在双向扩散试验中能与正常人血清形成沉淀。Jensen（1959）也发现类似现象，并将其命名为A抗原。直到1963年Lofkvist ...

网络 第二节　葡萄球菌蛋白A（SPA） 　　葡萄球菌蛋白A（Staphylococal Protein A SPA）是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质。早在1940年，Vevwey发现在某些金黄色葡萄球菌中，含有一种物质，在双向扩散试验中能与正常人血清形成沉淀。Jensen（1959）也发现类似现象，并将其命名为A抗原。直到1963年Lofkvist ...

网络 第一节　抗生物素―生物素免疫细胞化学染色法 　　一、基本原理 　　很早以前，人们就注意到给动物饲以大量的鸡蛋白，会引起明显的“维生素H缺乏症”，也称为“蛋白质伤害”。经研究发现，在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白，分子量为68000，属于糖蛋白，当时命名为卵白素（Avidin），卵白素具有4个同维生素H（Riotin又名生物素）亲合力极高的结合点。给动 ...

网络 第一节　抗生物素―生物素免疫细胞化学染色法 　　一、基本原理 　　很早以前，人们就注意到给动物饲以大量的鸡蛋白，会引起明显的“维生素H缺乏症”，也称为“蛋白质伤害”。经研究发现，在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白，分子量为68000，属于糖蛋白，当时命名为卵白素（Avidin），卵白素具有4个同维生素H（Riotin又名生物素）亲合力极高的结合点。给动 ...

网络 第六章　亲合组织化学技术及免疫细胞化学技术的某些进展 　　70年代以来，由于免疫组织化学方法的广泛应用，在技术方法上不断得以改进，涌现了一批新的技术方法，其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素（Lectin）、生物素（Biotin）和葡萄球菌A蛋白（Staphylococcal Protein A SPA）等被应用于免疫细胞化学技术，从 ...

网络 第六章　亲合组织化学技术及免疫细胞化学技术的某些进展 　　70年代以来，由于免疫组织化学方法的广泛应用，在技术方法上不断得以改进，涌现了一批新的技术方法，其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素（Lectin）、生物素（Biotin）和葡萄球菌A蛋白（Staphylococcal Protein A SPA）等被应用于免疫细胞化学技术，从 ...

网络 第八节　免疫胶体铁细胞化学　 　　胶体铁（Ferric　Colloid）是一种阳离子胶体，可通过普鲁士蓝反应呈色，其颗粒有一定的大小及电子密度，最初被用于光镜及电镜下定位组织中的阴离子部位（Hale1946Senoetal 1983Murakami， et al 1986）。1989年日本学者Seno等在抗体分子上标记了胶体铁，将胶体铁引入免疫细胞化 ...

网络 第八节　免疫胶体铁细胞化学　 　　胶体铁（Ferric　Colloid）是一种阳离子胶体，可通过普鲁士蓝反应呈色，其颗粒有一定的大小及电子密度，最初被用于光镜及电镜下定位组织中的阴离子部位（Hale1946Senoetal 1983Murakami， et al 1986）。1989年日本学者Seno等在抗体分子上标记了胶体铁，将胶体铁引入免疫细胞化 ...

网络 第七节　光镜免疫金银细胞化学方法 　　一、免疫金染色 　　（一）免疫金法（IGS） 　　1987年，Geoghegan等首次应用免疫金探针检测B淋巴细胞表面抗原，建立了用于光镜水平的免疫金法（Immunogold staining IGS）。IGS的特点是染色程序简便，不要显色，就能检测细胞表面的抗原，又能检测细胞内抗原。染色时免疫金法一 ...

网络 第七节　光镜免疫金银细胞化学方法 　　一、免疫金染色 　　（一）免疫金法（IGS） 　　1987年，Geoghegan等首次应用免疫金探针检测B淋巴细胞表面抗原，建立了用于光镜水平的免疫金法（Immunogold staining IGS）。IGS的特点是染色程序简便，不要显色，就能检测细胞表面的抗原，又能检测细胞内抗原。染色时免疫金法一 ...