基因克隆

网络 第四章　免疫酶细胞化学 　　免疫酶细胞化学是免疫细胞化学（ImmunocytochemistryICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下，借助于酶细胞化学的手段，检测某种物质（抗原/抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术：即预先将抗体与酶连结，再使其与组织内特异抗原反应，经细胞化学染色后，于光镜或电子显微镜下观察分析的形态学 ...

网络 第五节　非特异性染色的消除方法 　　一、非特异性染色的主要因素 　　组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： 　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 　　（3）除去检查的抗原以外，组织中 ...

网络 第四节　荧光显微镜检查法 　　一、荧光显微镜 　　荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（图3-15）。 图3-15　荧光显微镜的结构和主要部件 　　（一）光源 　　现在多采用200W的超高压汞 ...

网络 第三节　免疫荧光细胞化学染色方法 　　一、标本制作 　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 　　二、荧光抗体染色方法 　　（一）直接法 　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室 ...

网络 第二节　荧光抗体的制备 　　荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。 　　一、荧光素 　　荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止（一般持续10-7～10-8s）。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素。目前主要常用 ...

网络 第三章　免疫荧光细胞化学技术 　　免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一，是由Coons等（1950）建立，经过近43年的发展，免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞（或组织）化学。它与亲合化学技术如葡萄球菌A蛋白（SPA）、生物素与卵白素、植物血凝素（ConA等）相结合拓宽了领域；与激光技术、电子计算机和扫描电视等技术结合 ...

网络 第一节　免疫荧光细胞化学的原理 　　免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞 ...

网络 第三节　抗体的提取与纯化 　　本节暂缺，如果您能帮助寻找，请与管理员联系，谢谢。 相关新闻 ...

网络 第二节　抗体的制备 　　一、抗血清的制备 　　有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 　　（一）用于免疫的动物 　　作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般 ...

网络 第三节　有关细胞和组织学技术 　　一、细胞和组织 　　免疫组织化学技术是用标记物或显色物标记的抗体检测细胞和组织内的抗原，从而达到诊断和研究疾病的目的。抗原的准确显示和定位与制备的细胞和组织标本质量的好坏有着密切的联系。由于各种抗原的生化、物理性质不同，如温度高低、酸碱度强弱及各种化学试剂的作用均可影响抗原的免疫学活性，良好的细胞和组织学结构将 ...

网络 第二节　免疫细胞化学的有关技术概述 　　根据标记物的不同，免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术，免疫酶细胞化学技术，免疫铁蛋白技术，免疫金-银细胞化学技术，亲和免疫细胞化学技术，免疫电子显微镜技术等。近些年来，核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针，和免疫细胞化学技术密切结合，发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学 ...

网络 第一节　有关的免疫学理论 　　本节暂缺，如果您能帮助寻找，请与管理员联系，谢谢。 相关新闻 ...

网络 第一章　总论 　　免疫细胞化学又称免疫组织化学、其主要原理是用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定量检测，经过组织化学的呈色反应之后，用显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察。凡是能作抗原、半抗原的物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可用相应的特异性抗体的组织、细胞内将其用免疫细胞化学手段 ...

网络 前言 　　免疫细胞化学(Immunocytochemistry)又称免疫组织化学(Immunohistochemistry)是组织化学的分支它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行细胞和组织原位的检测技术。Coons及其同事们于1941年首次用荧光素标记抗体检测肺组织内肺炎双球菌获得成功，开创了细胞化学中“免疫细胞化学”这一新 ...

DNA片段的克隆需要合适的载体，载体或是质粒，或是噬菌体，或是病毒，通常大多经过人工改造，载体上常有筛选标记，如对抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。 一、质粒 常用的有pBR322，pUC系列质粒等。 （ ...

网络 第四节　样品的前处理 　　样品的正确收集与处理，是蛋白质及多肽激素放射免疫分析取得成功的前提。不同的样品与测定项目，其前处理有不同的要求。下面以神经肽测定为例，介绍样品的前处理方法。 　　一、脑、脊髓与垂体中神经肽的提取（以大鼠为例） 　　1．大鼠称重后，在尽量安静的情况下，迅速断头、取躯干血。 　　2．尽快取下全脑、脊髓（某段）与 ...

网络 第三节　结合和游离部分的分离 　　放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微，反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物，但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的（B）和游离的（F）抗原，所以，B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节　。根据抗原―抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同，可采取各种分离技术。 　　一、对分离方法 ...

网络 第三节　结合和游离部分的分离 　　放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微，反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物，但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的（B）和游离的（F）抗原，所以，B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节　。根据抗原―抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同，可采取各种分离技术。 　　一、对分离方法 ...

网络 第二节　放射性碘标记 　　在RIA中，标记抗原质量的优劣，直接影响测定结果，必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原，并保持免疫活性不受丧失。 　　一、同位素的选择 　　同位素有稳定性和放射性两种。放射性同位素可利用其衰变时放出的放射线进行测量，这种测量较灵敏而方便，故多用放射性同位素。标记抗原，常用的放射性同位素有3H、14C、131I和1 ...

网络 第八章　蛋白质与多肽激素的放射免疫分析 第一节　概述 　　1960年，美国学者Yalow 和Berson 创立了放射免疫分析（Radioimmunoassay，RIA），并首先用于糖尿病人血浆中胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破，开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测定的极微量而又具有重要生物学意义 ...