基因克隆

确定特定基因的方法--定位克隆 由于许多遗传病的基因位点已经有了精确的染色体定位和相应的DNA标记，所以可以用定位克隆的策略分离这些基因。杜兴肌营养不良、慢性肉芽肿、亨廷顿氏舞蹈症等几十个基因的克隆分离就依靠此种方法。 ①通过染色体缺失或平衡易位以及连锁分析，确定该基因在染色体上的位置，并将这个位置精确到2 000 kb左右的范围内。 ②利用距该基因最近的DNA标记，筛选Y ...

人体环境中寄居着各类微生物，这些微生物的菌群结构对人类健康有着重要影响。曾有研究报道，不同个体之间肠道菌群的结构与数量是不同的，这些差异与人类易感癌症或其他疾病的几率有着极大的关联性。

德国多特蒙德工业大学19日发表公报说，该校研究人员开发出一种用生物手段生产药用大麻的活性成分――四氢大麻酚的新方法。

本文主要介绍了DNA复制的机制

本文主要介绍了DNA克隆的一些基本知识

本文主要介绍了噬菌体载体的作用

本文主要介绍了克隆基因诱变的几种类型

本文主要介绍了什么是组构以及克隆基因的组构

本文主要介绍了如何鉴定克隆出来的基因是否是自己想要的目的基因

差异基因表达的研究受到了广泛的关注，常用的技术有DD-PCR；GENE-FISHING；GENE CHIP等。简单介绍如下： DDRT―PCR技术即mRNA差异显示聚合酶链式反应技术，此技术是以PCR技术和聚丙烯凝胶电泳技术为基础，结合银染或放射性自显影等显色技术，能快速有效地鉴定并克隆两个或多个平行材料之间的差异表达基因。DDRT―PCR技术的基本过程如下：①提取两组平行材料中的总RNA或m ...

（一）DNA的酶切与连接 　　（1）酶切反应　　同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。　　（2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。　　（3）15000rpm离心15min，弃上清。　　（4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。　　（5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性化载体DNA。　　（6）测 ...

EST电子延伸系统主要包括以下几个部分组成：预处理(pre-processing)、聚类(clustering)、拼接(assembly)和分析(analysis)。一、预处理Ø用crossmatch程序，去除载体序列（载体序列库：ftp://ncbi.nlm.nih.gov/repository/vector）。 处理时应注意的问题： 1、如果是用自已 ...

来自加州理工大学，NanoString Technologies公司，系统生物学研究院ISB，华盛顿大学以及英国伦敦学院等处的研究人员公布了一项新的研究成果：一种新型基因表达系统，这一系统原理基于彩色编码（color-coded，注）基因转录的数据检测，灵敏度比芯片更高（与实时PCR相近），能直接检测mRNA的表达水平，并且这一过程不需要酶学反应。这一研究成果公布在《Nature Biotechn ...

在基因表达研究中，研究者比较注意选择合适的表达载体和宿主系统，而往往忽视基因本身是否与载体和宿主系统为最佳匹配这样一个实质性问题。基因的最佳化表达可以通过对基因的重新设计和合成来实现，如消除稀有密码子而利用最佳化密码子，二级结构最小化，调整GC含量等。以下就密码子最佳化、翻译终止效率和真核细胞中异源蛋白表达的问题加以说明。密码子最佳化（codon optimization） 遗传密码 ...

PCR克隆主要有TA克隆法 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一 ...

1)Prior to any ligation reactionyou should always run one gel in which purified insert and cut backbone are run side by sidepreferably beside a known amount of cut DNA.You can then use this to estimat ...

Subcloning should be easy and fast and work every time. The following protocols minimize the number of manipulations required to prepare DNA fragments for ligations thereby both saving time and increa ...

Instructions Modified for Simpson Lab1.PCR: Perform a standard PCR reaction using taq polymerase. (Do not use tfl as the PCR product must have a 3' adenine overhang that only taq generates.) Include a ...

The overall sequence of events is:• Titer and plate out phage • Lift plaques onto filters and prepare them for screening • Make a probe • Hybridize the probe to the filters • ...

单拷贝克隆产量低，高拷贝克隆稳定性差，一直让研究者在克隆 表达时难以选择。蛋白的表达就有诱导表达系统，可以实现人为地控制蛋白的表达时间和表达量——现在连质粒的拷贝数可以借助诱导的方法来人为控制了！Epicentre的专利技术——CopyControl克隆 系统能够让您共享单拷贝和高拷贝的优点。CopyControl克隆，首先以单拷贝形式生长——单拷贝可以确保插入稳定及成功克隆，编码毒性基因序列—— ...