基因克隆

网络 　　十、放射性核素数据 1．放射性核素衰变表 3H 35S 32P 125I 131I 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) ...

网络 　　十、放射性核素数据 1．放射性核素衰变表 3H 35S 32P 125I 131I 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) 时间(年) 剩余活性(%) ...

网络 第二节　溶胶的基本概念 　　一、胶体金 　　即金的水溶液，它也具有一般溶胶的特性。分散体系的分类：体系就是一定空间范围内作为我们研究对象的物质，某一种或几种物质分散到另一种物质中所组成的体系叫做分散体系。被分散相质点的大小而改变，因此，按分散相质点的大小不同，可将分散体系分为三类。 　　（一）离子分散体系 　　指分数散相以小分子或离 ...

网络 第二节　溶胶的基本概念 　　一、胶体金 　　即金的水溶液，它也具有一般溶胶的特性。分散体系的分类：体系就是一定空间范围内作为我们研究对象的物质，某一种或几种物质分散到另一种物质中所组成的体系叫做分散体系。被分散相质点的大小而改变，因此，按分散相质点的大小不同，可将分散体系分为三类。 　　（一）离子分散体系 　　指分数散相以小分子或离 ...

网络 第五章　免疫金银及铁标记技术 第一节　免疫金技术发展史 　　早在一个世纪以前，化学家就对胶体金进行了研究，当时只是研究它的结构和金属性质。在1939年Kausche和Ruska把烟草花叶病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察见金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于免疫组织化学研究是在1971年，Faulk 和Taylor首先将兔抗沙门 ...

网络 第四节　ICC的几种特殊应用 　　近年 ICC技术在下述方面的应用，令人注目，有着广阔的前景。现介绍如下：　 　　一、ICC在铺片中应用 　　铺片（Whole Mount Stretch Preparation） 是研究神经分布应用较早、较广的方法。19世纪末，Dogiel和Cajal等利用铺片技术，结合镀银及甲基蓝染色，观察肠道神经丛模 ...

网络 第三节　结果分析 　　ICC染色结果判断与其它组织化学相似，应在熟悉所应用方法、抗体的优点和局限性的基础上，避免主观意识，进行客观判断。一般认为在严格操作、控制染色的条件，选择特异性抗体等条件下，所得结果是阳性时才有积极意义。而阴性时，不一定意味着该物质或抗原不存在，即不能排除实验过程所致的抗原丢失或抗体选择不当等引起人工假象。另外根据ICC染色强弱 ...

网络 第三节　结果分析 　　ICC染色结果判断与其它组织化学相似，应在熟悉所应用方法、抗体的优点和局限性的基础上，避免主观意识，进行客观判断。一般认为在严格操作、控制染色的条件，选择特异性抗体等条件下，所得结果是阳性时才有积极意义。而阴性时，不一定意味着该物质或抗原不存在，即不能排除实验过程所致的抗原丢失或抗体选择不当等引起人工假象。另外根据ICC染色强弱 ...

网络 第二节　染色方法 　　一、本科标抗体法 　　酶标抗体技术是通过共价键将酶连结在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于光镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位。 　　（一）酶的种类及特点 　　从理论上讲，用细胞化学方法能显示的酶，均可用于标记抗体，进行ICC染色，但 ...

网络 第二节　染色方法 　　一、本科标抗体法 　　酶标抗体技术是通过共价键将酶连结在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于光镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位。 　　（一）酶的种类及特点 　　从理论上讲，用细胞化学方法能显示的酶，均可用于标记抗体，进行ICC染色，但 ...

网络 第一节　固定和切片 　　一、固定 　　若想得到理想的ICC染色结果、正确地判断抗原物质在组织细胞内的位置，除需有良好酶和抗体外，保持组织细胞内抗原物质的不动性（Immobility）和免疫活性也是至关重要的。换言之，如果抗原物质在组织细胞间弥散、丢失或失去免疫活性，无论如何努力染色都是徒劳的，所以说固定是ICC染色中非常重要的一环。ICC与其它 ...

网络 第一节　固定和切片 　　一、固定 　　若想得到理想的ICC染色结果、正确地判断抗原物质在组织细胞内的位置，除需有良好酶和抗体外，保持组织细胞内抗原物质的不动性（Immobility）和免疫活性也是至关重要的。换言之，如果抗原物质在组织细胞间弥散、丢失或失去免疫活性，无论如何努力染色都是徒劳的，所以说固定是ICC染色中非常重要的一环。ICC与其它 ...

网络 第四章　免疫酶细胞化学 　　免疫酶细胞化学是免疫细胞化学（ImmunocytochemistryICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下，借助于酶细胞化学的手段，检测某种物质（抗原/抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术：即预先将抗体与酶连结，再使其与组织内特异抗原反应，经细胞化学染色后，于光镜或电子显微镜下观察分析的形态学 ...

网络 第四章　免疫酶细胞化学 　　免疫酶细胞化学是免疫细胞化学（ImmunocytochemistryICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下，借助于酶细胞化学的手段，检测某种物质（抗原/抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术：即预先将抗体与酶连结，再使其与组织内特异抗原反应，经细胞化学染色后，于光镜或电子显微镜下观察分析的形态学 ...

网络 第五节　非特异性染色的消除方法 　　一、非特异性染色的主要因素 　　组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： 　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 　　（3）除去检查的抗原以外，组织中 ...

网络 第五节　非特异性染色的消除方法 　　一、非特异性染色的主要因素 　　组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： 　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 　　（3）除去检查的抗原以外，组织中 ...

网络 第四节　荧光显微镜检查法 　　一、荧光显微镜 　　荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（图3-15）。 图3-15　荧光显微镜的结构和主要部件 　　（一）光源 　　现在多采用200W的超高压汞 ...

网络 第三节　免疫荧光细胞化学染色方法 　　一、标本制作 　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 　　二、荧光抗体染色方法 　　（一）直接法 　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室 ...

网络 第二节　荧光抗体的制备 　　荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一，制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。 　　一、荧光素 　　荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止（一般持续10-7～10-8s）。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素。目前主要常用 ...

网络 第一节　免疫荧光细胞化学的原理 　　免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞 ...