DNA定点突变

eleven1113 我还在看关于高IgE综合征的文章，这篇文章Yoshiyuki Minegishi et al.Dominant-negative mutations in the DNA-binding domain of STAT3 cause hyper-IgE syndrome nature 2007 448: 1058-1063怎么叫Dominant-negative mutations？请教大家哈，谢谢了zhujoker dominant negative mutant中文名是 ...

请教高手，我做一蛋白的定点突变，采用overlap的方式，但当我把短片段扩出来后，就怎么也不能将全片段（1.58Kb）扩出来，我不知道是不是引物的问题，请大家帮我看看这是整个CD序列：ATGGAACTGAAGGCCGAGGAGGAGGAGGTGGGTGGCGTCCAGCCGGTGAGCATCCAGGCCTTCGCCAGCAGCTCCACACTGCACGGCCTGGCCCACATCTTCTCCTACGAGCG ...

近年来，CRISPR技术掀起了基因组编辑的热潮。短短一年间，CRISPR技术已登上了数个知名榜单，包括Science的十大科学突破，Nature Methods的值得关注技术，以及Technology Review的十大突破技术。利用CRISPR技术发表的文章更是层出不穷。今天就和大家分享下CRISPR实验的主要步骤及需要考虑的因素。第一步，你要确定你做CRISPR的目的，即选一个CRISPR系统你要考虑清楚为什么 ...

T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶，它可以催化平端DNA片段的连接（Sgaramella和Khorana1972;Sgaramella和Ehrlich1978），由于DNA很容易成为平端，所以这是一个极为有用的酶学物性。有了这样的物性，才能使任何DNA分子彼此相连。 优点： 1、没有连不上的，只有切不开的。平末端连接不牵扯到粘性末端的碱基突出问题，所以，理论上任何两条DNA序列都能 ...

基因突变是指由于DNA 碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化。基因突变在生物界中是普遍存在的，它是生物变异的主要原因，是生物进化的主要因素。但大多数基因突变对生物体是有害的，如果发生基因突变，就有可能破坏这种协调关系。绝大多数的人类遗传病如人的色肓、糖尿病、白化病等遗传病，都是突变性状，是由基因突变造成的，这些病对人类健康构成了严重威胁。目前突变研究手段比较，大致有三大类：一类是以荧光共 ...

基因突变是遗传物质分子结构的改变，包括在DNA分子编码区的密码子和密码阅读框的改变。 基因突变可以发生在体细胞，也可以发生在生殖细胞中，这两种突变有完全不同的后果。发生于生殖细胞中的基因突变可以遗传给后代。发生于机体其他组织细胞中基因突变的体细胞突变，可以引起发生突变个体的形态或生理上的变异，只能通过无性生殖的形式传递给后代，而不能通过有性生殖遗传下去(在胚胎细胞 ...

基因突变的分子机制 基因突变包括DNA上碱基对的改变和碱基对的插入或缺失。1．碱基替换 碱基替换是指一种碱基被另一种碱基所替代。当DNA分子中一个嘌呤被另一个嘌呤、或者一个嘧啶被另一个嘧啶所替代时，称为转换(transition)；而嘌呤与嘧啶之间的替换称为颠换(transversion)。碱基替换改变了原有DNA核苷酸的顺序，对多肽链中氨基酸顺序产生影响，导致同义突变、错义突变或 ...

本文主要介绍了能使DNA复制产生诱变一些影响因素

For use with GibcoBRL Random Primer DNA labeling system. Objective: To produce radioactively labeled DNA strands for the detection of target DNA or RNA sequences in various applications including Sout ...

加、减、换一个载体的MCS的位点（给一个表达载体加、减、换小表达标签，如His6， His10，strep II等，和MCS改造是一样的），其实技术不是问题，问题在于位点的选择，因为载体设计时应该设计者也考虑过mcs的问题，应该给使用者越多的选择越好，但为什么有的载体只给有限的几个位点呢，一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多，因而MCS位置的选择比较少，二就是设计者是自用的载体，没有 ...

美国研究人员报告说，开发出一种简单、方便的新方法，可在短时间内检测出牛奶中是否含有三聚氰胺。

定点诱变(DpnI法)：每条引物都要携带有所需的突变位点，引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。

体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能，二者之间的关系是蛋白质组研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或 者插入，可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构，对突变基因的表达产物进行研究有助于我们了解蛋白质结构和功能的关系，探讨蛋白质的结构/结构域。而利用定点突变技术改造基因，相信大家也非常 ...

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Mutagenesis is a fundamentally important DNA technology which seeks to change the base sequence of DNA and test its effect on gene or DNA function. The mutagenesis can be conducted in vivo (in studies ...

体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能，二者之间的关系是蛋白质组 研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或者插入，可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构，对突变基因的表达产物进行研究有助于我们了解蛋白质结构和功能的关系，探讨蛋白质的结构/结构域。而利用定点突变技术改造基因，相信大家也非常熟 ...