DNA基础知识

相关专题 重组DNA技术工具酶 连接酶旧称“合成酶”。DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)， ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求? 一、矛盾之处： (一)DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列不具有专一性要求 支持这一观点的是2008年江苏高考32题，请看具体内容及图示，如下： 32.(8分)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是 ...

相关专题 重组DNA技术常工具酶 (1)限制性内切酶：识别特异序列，切割DNA (2)DNA连接酶：催化DNA中相邻核苷酸间形成磷酸二酯键，使DNA切口缝合，连接DNA片段 (3)DNA聚合酶Ⅰ：a.合成双链cDNA中第二条链;b.缺口平移制做探针;c.DNA序列分析;d.填补3′末端。 (4)Taq酶：催化PCR反应，聚合DN ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 DNA连接酶有两种，一种是从大肠杆菌中分离得到的，称为E.coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间连接起来。 另一种是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4DNA连接酶，它既可以缝合双链DNA片段互补的黏性末端又可以缝合双链DNA片段的平末端。我们通常使用 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 聚合酶-简介 1957年，美国科学家阿瑟·科恩伯格(Arthur Kornberg)首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶，这种酶被称为DNA聚合酶I(DNA polymerase I，简称：Pol I)。1970年，德国科学家罗尔夫·克尼佩尔斯(Rolf Knippers)发现DNA聚合酶II(Pol II)。随后 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 定义 DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。 DNA聚合酶 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。 DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。 真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为D ...

相关专题 S1核酸酶 S1核酸酶来源于稻谷曲霉(Aspergillusoryzae)，是一种高度单链特异的核酸内切酶，在最适的酶催反应条件下，降解单链DNA或RNA，产生带5，-磷酸的单核苷酸或寡核苷酸。对双链DNA、双链RNA和DNA-RNA杂交体相对不敏感。通常水解单链DNA的速率要比水解双链DNA快75000倍。这种酶需要低水平的zn ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 RNA聚合酶(RNA polymerase)：以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 催化转录的RNA聚合酶是一种由多个蛋白亚基组成的复合酶。如大肠杆菌的 RNA聚合酶有五个亚基组成，其分子量为480000，含有α，β，β’，&delta ...

相关专题 用S1核酸酶对RNA作图 三种不同的核酸酶——S1核酸酶、RNA酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行RNA定量，确定内含子位置，以及用来鉴定在克隆的DNA模板上的mRNA 5′端和3′端的位置。当检测RNA被杂交到DNA模板上时，用核酸酶S1进行保护试验的分析;当检测RNA被杂交到来自DNA模板的RNA上时用RNA酶 ...

相关专题 Bal31核酸酶是由海生菌(Alteromonas espeliana)提取的。该酶具有高度特异的单链脱氧核糖核酸内切酶活性，也可在缺口或超螺旋卷曲瞬间出现的单链区域降解双链环状DNA或在3′或5′端，渐进地降解双链线性DNA。Bal 31核酸酶具有核糖核酸酶活性，能降解rRNA和tRNA。该酶反应需要Ca ...

相关专题 核糖核酸酶H是从小牛胸腺中发现而被分离的(Stein and Hausen 1969，Hausen and Stein 1970)，但该酶现已知广泛存在于哺乳动物细胞、酵母、原核生物及病毒颗粒中。所有类型细胞均含有不止一种核糖核酸酶H。核糖核酸酶H(RNaseH)催化DNA-RNA杂合体的RNA部分的核内降解，产生不同链长带3&# ...

相关专题 核糖核酸酶P(Ribonuclease P，简写为RNase P)是一种核糖核酸酶。核糖核酸酶P也是一种核酶，即由一个RNA分子发挥催化活性，它是第一个被发现的蛋白质以外具有催化活性的生物大分子。它的功能是剪切tRNA分子中RNA上多余的或前体的多余序列。它的发现者悉尼·奥尔特曼在1970年代在研究前体tRNA中发现它可以剪切RN ...

相关专题 “基因组编辑核酸酶”当选《自然》年度研究方法 《自然》杂志子刊《自然—方法学》在最新一期推出了2011年度研究方法专刊，评选出了本年度研究方法——基因组编辑核酸酶(Gene-editing nucleases)。专刊包括社论、新闻特写、评论、视频等内容;同时，还评出其他8个值得关注的研究方法。 基因组编辑核酸酶是一类通过基因工程改 ...

相关专题 核糖核酸酶A(RNase A) 来源：牛胰腺。RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对RNA有水解作用，但对DNA则不起作用。RNase A在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的裂开，形成具有 2'3'-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。如 ...

相关专题 核酸分解的第一步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键，在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸酶(RNase)，有些核酸酶只能作用于DNA，称为脱氧核糖核酸酶(DNase)，有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶( ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 组蛋白去乙酰化酶(HDACs)是一组在细胞染色质水平、通过诱导组蛋白去乙酰化来调控包括染色质重组、转录活化或抑制、细胞周期、细胞分化及细胞凋亡等一系列生物学效应的酶，特别是与细胞活化后的基因转录表达调控有关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)则是一类抑制HDACs活性的化合物。 ...

相关专题 催化核酸中磷酸二酯键的水解的酶统称为核酸酶。细胞内存在着多种不同的核酸酶。根据酶作用的部位，核酸酶可以分为外切核酸酶和内切核酸酶。外切核酸酶水解磷酸二酯键后从多核苷酸链的末端释放核苷酸残基;而内切酶可以在多核苷酸链内的不同位置水解磷酸二酯键。表列出了一些常用的来自不同生物的核酸酶以及它们作用的底物和生成的产物。 ...

相关专题 重组DNA技术工具酶 糖原磷酸化酶 磷酸化酶(phosphorylase)作用机理类似水解酶可以将A-B化合物分解为AOH和B-phosphate。 磷酸化酶(phosphorylase)作用机理类似水解酶可以将A-B化合物分解为AOH和B-phosphate。 学习时要注意磷酸酶(phosphatase)和磷酸化酶(phosph ...

相关专题 内参即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。一般要选择一个在处理因素作用的条件下不会发生表达改变的基因作内参。 在进行基因研究的过程中 ...

相关专题 核糖核酸酶保护实验 For quantitating RNA levels from either polyA+ selected RNA or crude RNA preps. Solutions 10X Hybridization Buffer 0.4 M PIPES 12.1 g PIPES (Sigma #P6757) 4. ...