DNA基础知识

相关专题 Semiquantitative RT-PCR analysis to assess the expression levels of multiple transcripts from the same sampleMaria Maronundefined Simona Mozzetti Daniela De Ritis Luca Pierel ...

相关专题 RT-PCR AnalysisSolutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1% Triton X-10025 mM MgCl2use at a concentration of 1.5 mMLysis Solution4M GuSCN 250 g g ...

相关专题 从RNA到电泳鉴定 一、RT-PCR原理提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA 作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA 为模板，用VI 型胶原蛋白的α1 链的编码序列的特异性引物进行PCR 扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR 使RNA 检测的灵敏性提高了几个数量级， ...

相关专题 This method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center. The following is a great RT-PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at ...

相关专题 For quantifying mRNA we use a competitive RT-PCR protocol with internal standard RNAs. These are added in a defined quantity to the RNA sample prior to the RT reaction ...

相关专题 Application: Quantitative RT-PCR is used to quantify mRNA in both relative and absolute terms. It can be applied for the quantification of mRNA expressed from endogeno ...

相关专题 【原理】 限制性显示 PCR 技术 (Restriction Display PCRRD-PCR) 技术的思路是在获得反转录的 cDNA 之后 进行 Sau 3AI 酶切? Sau 3AI 识别位点是四个碱基 理论上计算平均每 256 个碱基有一个识别位点 然后在酶切片段的两端加上通用接头?接头由 15bp 和 21 bp 长 ...

相关专题 OverviewThe use of reverse transcriptases to perform first-strand cDNA synthesis has had a huge impact on the study of biological processes. Finally an RNA could be co ...

相关专题 A glaring problem in most areas of biochemical research is obtaining sufficient amounts of the substance of interest. For example a 10 L culture of E. coli grown to it ...

相关专题 问题1：无扩增产物 现象：正对照有条带，而样品则无 原因: 1.模板:含有抑制物，含量低 2.Buffer对样品不合适 3.引物设计不当或者发生降解 4.反应条件：退火温度太高，延伸时间太短 对策: 1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2.更换Buffer或调整浓度 3.重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结 ...

相关专题 一、限制性内切酶对DNA消化的方案1.限制性内切酶反应在灭菌的0.5ml离心管中进行。2. 20μl体积反应体系如下：DNA 0.2-1 μg10×酶切buffer 2.0 μl限制性内切酶 1-2 u（单位）加ddH2O 至 20 μl限制性内切酶最后加入，轻轻混匀，稍加离心，放置于最适温度水浴并按所需的时间温育，一般为37℃水浴 ...

相关专题 问：SMARTTM cDNA 技术的原理是什么？答： SMARTTM cDNA 合成技术利用总RNA 或者Poly A+ RNA 作为模板，以一种改造的oligo(dT)寡苷酸作为引物，在MMLV 反转录酶催化作用下合成第一链。当反转录酶到达mRNA 的5"末端时，反转录酶的末端转移酶活性会在第一链 cDNA 的3"端加上3-5 个 ...

相关专题 Prehybridization/Hybridization Solution0.1% SDS50% Formamide5x SSC50 mM NaPO4 pH 6.80.1% Sodium Pyrophosphate5x Denhardt"s Solution50 ug/ml Sheared Herring Sperm DNA1) ...

相关专题 I. Via random hexamers1. Solutions:10X hexa nt miundefined:500 mM Tris-Cl pH 7.2100 mM MgCl21 mM dithioerythritol (DTE)2 mg/ml BSA62.5 A260 units/ml (1.56 mg/ml) random hexan ...

相关专题 Retroelements and their derivatives are a ubiquitous and abundant component of plant genomes. From the 1990s PCR based techniques have been developed to isolate the el ...

相关专题 Antisera are important tools for studying gene products - proteins Once a putative identity has been established by sequence comparisons it is possible to purify the c ...

相关专题 SSCP gel preparation:Assemble the gel casting apparatus first. Clean the casting glass with distilled water followed by ethanol to remove any grease from the surface. ...

相关专题 准备工作：①制做选择平板LB+25 mg/l Kan。②核对好要转化的质粒DNA，在15 ml Falcon tube 和cuvette（电转化用的石英样品槽，两面磨光，两面磨砂）标好质粒名称。将Falcon tube、cuvette、质粒DNA、SOC培养基按顺序对应置于冰上预冷或解冻。转化前将大肠杆菌（45 µl aliquot ...

相关专题 TAIL-PCR（thermal asymmetric interlaced PCR） 在分子生物学研究中基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列，TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR，能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环，利用不同的退火温度选 ...

相关专题 朱　靖1，杜立新2 （1.山东农业大学动物科技学院生物工程实验室，山东泰安 271018; 2.中国农业科学院畜牧研究所，北京 100094） 摘　要:　运用mRNA反转录差异显示技术可以了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况，为研究生命活动过程提供重要信息。文章对差异显示反转录聚合酶链式反应技术的基 ...