1.目的学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。2.原理细菌在0℃ CaCl2低渗溶液中胀成球形,丢失部分膜蛋白,成为容易吸收外源DNA的状态。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,50ml 微量离心管,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式冷冻离心机,制冰机,恒温摇床,分光光度计,超净工作台,恒温培养箱,摇菌试管,三角烧瓶,接种环。4.试剂E. coli XL1-Blue,LB培养基,0.1 mol/L CaCl2溶液,无菌ddH2O5 ...
摘要: 随着人们对疾病治疗观念的转变,治疗的重点已经由直接杀伤外源性病原体转向调整生物机体自身功能,从而免疫增强剂在医学的应用引起广泛的关注,免疫增强剂的研究已成为应用医学最活跃的研究领域之一。虽然免疫增强剂的种类繁多,不下十几类上百种,但是理想的免疫增强剂并不多见。本文介绍了4种常用免疫增强剂-矿物质硒,中草药黄芪,微生物制剂卡介苗,抗寄生虫药物左旋咪唑的研究新动态,同时还介绍了4种热门免疫增强剂-胸腺肽、核酸制剂 ...
丁香园医学网站创立近三年,其间积累了大量的文献资料和信息资源,但大部分都分散在各个专业版块,难以给人以整体化、综合化的认识。为了更方便大家总结、利用这些资料信息,我们很早就着手准备《丁香园医学电子期刊》(暂定名)的筹备工作。《丁香园医学电子期刊》(暂定名)从逃、hashimoto等主任的初建,到yangster主任从多个角度的完善,这其中得到了许多热情的战友、主任们的大力支持并提出许多有建设性的建议,特别是版主yan ...
Modified Yeast TransformationInoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 ml saturated culture in the evening to get an of OD600 = 1 to 2 the next morning.Transfer enough of this culture to 300 ml YEPD to produce an OD6oo=0.2 (ca. 20 mls.). Inc ...
寄主蛋白指导农杆菌介导植物转化农杆菌在植物转化中已被广泛应用。因为起自然的转移外源DNA到寄主基因组的能力。它同时也是一个重要的植物病原物,这个病原体在几个农杆菌重要的物种中导致crown gall disease ,包括葡萄树、石榴、坚果树。在侵染寄主植物后,细菌从他肿瘤诱导的质粒中转移几种VIR蛋白和T-DNA到寄主细胞。在VIR蛋白的协助下,TDNA转移到寄主细胞的核中并且整合进寄主基因组中,当致癌基因在TDNA ...
美国科学促进会将基因芯片技术列为 1998 年度自然科学领域十大进展之一,足见其在科学史上的意义。现在,基因芯片这一时代的宠儿已被应用到生物科学众多的领域之中。它以其可同时、快速、准确地分析数以千计基因组信息的本领而显示出了巨大的威力。目前在文献上可查到的生物芯片的应用有基因表达谱、HLA分型、SNP分析、丙型肝炎分型、物种鉴定、DNA测序、连锁不平衡作图、HIV-1诊断、BRCA1突变分析、炎症分析、线粒体基因组分析、囊 ...
引言:基因表达谱常被称为是某一生理/病理现象的“分子图像”。这类复杂的“分子图像”,可用于同时检测成千上万个基因的表达水平,再经专门的计算机软件解读出来。研究人员通过比较源于不同病理条件下的“分子图像”的结果,可以识别出引发癌症等复杂疾病的标志物(Marker)。目前,这些标志基因(Marker genes)还有待于大量工作对其作进一步验证。许多科研人员已把注意力投向密度相对较低的功能分类基因芯片(focused DNA mic ...
calcium phosphate transfection protocl:1.Split 293FT cells about 30% confluence, overnight.2.Thaw undefinedHBS room temperature (not in 37 C).3.For 10cm dish:1.5ml tube, 4ug packaging plasmid A, 4ug packaging plasmid B, 4ug expression plasmid, 61ul of 2M CaCl2,Mix properly, and then add distil ...
Some DNA Replication animations:http://www2.kenyon.edu/Depts/Biology/courses/biol14/slides/slides-2.htmlhttp://www.irn.pdx.edu/~newmanl/DNArepl1.movhttp://www.mhhe.com/biosci/genbio/animation_quizzes/graphics/lem6s2b.ramFrom t ...
各位师兄师姐,本人在实验当中碰到一问题,不知道如何让解释好,想请教一下。实验设计向一肿瘤细胞株中转入一外源基因,采用瞬时转染的方法,流式检测对细胞周期的影响,结果如下:转染48hG0/G1(%)S(%)G2/M(%)未转染组62.1630.117.72空载体组52.3828.7818.84目的基因组54.1520.8525.00G0/G1(%)S(%)G2/M(%)未转染组65.8529.424.73空载体组53.4034.4012.21目 ...
表观遗传学实验手册,本书由(美)托尔夫波(Tollefsbol,T.O.)主编,是目前比较权威的表观遗传学实验技术手册,里面包含了表观遗传学基本实验技术,是入门级战友首选。由于有文件上传大小有限制,故本书共8个分卷,请逐个下载。下载请打开连接:http://d.dxy.cn/detail/5686921如果有问题,请联系。内容简介:本书是《表观遗传学——原理、技术与实践》的姐妹篇。本书的英文原著《Epigenetics Protoc ...
如需提供发票,还需要额外增加15%的费用(免费提供载体图谱或序列)载体名称载体抗性载体价格载体名称载体抗性载体价格PET11bAmp+300元(2-4ug)PCALSL-mir30Amp+500元(2-4ug)PET12aAmp+300元(2-4ug)PESC-HisAmp+500元(2-4ug)PET16bAmp+300元(2-4ug)PESC-LEUAmp+500元(2-4ug)PET23bAmp+300元(2-4ug)PESC ...
现状目前基于DNA的生物芯片主要应用在两个方面。一是作为某些疾病的特定基因突变诊断。这方面的主要例子是Affymetrix的GeneChip,它的P53基因芯片用于P53肿瘤抑制基因的多态性检测;HIV基因芯片用于检测HIV-1蛋白酶基因和病毒逆转录酶基因突变;P450基因芯片用于肝脏药物代谢酶的基因检测。Affymetrix还有许多此类基因芯片在开发中,如检测乳腺癌基因的BRAC1,以及用于细菌性病原体 ...
走过很多弯路,也做了许多无用功,现在终于有了一点经验,拿出来请大家指教电转化protocol:a.incubation in MRS (10mL)with 1% glucose for 6 hours till OD600=0.4-0.6b.Pretreated with 10ng/mL Ampicillin for 60 minc.Washing with washing buffer two times, and then washing with electroporation buffer one time, resusp ...
绝版分子生物学实用技术分享:I: 20 种用于各种DNA marker 制备的PLASMID:P1: 2k+1.5k+1k+800+700+600+500+400+300+200X2+100X4 (100BP ladder)P2: 3k+1.5k+1k+900+700+500+300X2 (200BP ladder 奇数)P3: 3k+2k+1.4k+1k+800+600+4X2 (200BP ladder 偶数) (P3\P4\P5 组合, 可拓展为1KB ladder)P4: 4k+2k+1.4k+1k+800+6 ...
收到你的邮件,得知你做转染遇到一些麻烦,看看这个有帮助吗?1。转染方法:有大量的技术和试剂用于将大分子转导至真核细胞中。这些大分子与胞内的组分反应,从而导致基因表达、蛋白质合成、细胞分化的诱导或抑制、细胞形态的改变、细胞的无限增殖或恶性转化。针对不同转染实验的各种目的和要求,没有任何一种方法或试剂对于所有的大分子转导都是最佳的。既然可以象转导蛋白质和小分子一样将DNA,RNA和寡聚核苷酸转导到各种细胞中,本手册将 ...
本内容需要回复后才能下载! 本书版权归作者所有,请于下载后24小时内删除基因的分子生物学(2013高清英文版)Molecular Biology of the Gene, 7th Ed名称Molecular Biology of the Gene作者James D. Watson, Tania A. Baker, Stephen P. Bell, Alexander Gann,Michael Levine, Richard Losick版本7, 插图版出版商Benjamin-Cummings Publishing C ...
It is quite common to send small samples of plasmid DNA or other relatively stable material to other researchers. The most convenient method of doing this is to include it in a plain envelope mailed to the recipient at the cost of a first-class stamp. We have observed that it is common practice to pipet a few micr ...
被寄予很大希望的基因疗法最近因为一名美国病人的死亡而再度蒙上阴影。这已不是基因疗法的第一例死亡1990年,美国科学家安德森(William French Anderson)对一名患自身免疫疾病的4岁女孩进行了开创性的基因疗法,至今这一被寄予很大希望的新方法已经经受了17年的风风雨雨。尽管基因疗法取得了很多成果,但是近期一名美国病人的死亡又为这一技术蒙上阴影。这已不是基因疗法的第一例死亡。乔妮·莫尔之死36岁的乔妮· ...
GenBank Overview基本信息什么是GenBank?GenBank是一个有来自于70,000多种生物的核苷酸序列的数据库。每条纪录都有编码区(CDS)特征的注释,还包括氨基酸的翻译。GenBank属于一个序列数据库的国际合作组织,包括EMBL和DDBJ。纪录样本 - 关于GenBank的各个字段的详细描述,以及同Entrez搜索字段的交叉索引。访问GenBank - 通过Entrez Nucleotides来查询。用acc ...