DNA基础知识

Hahn Lab，The Fred Hutchinson Cancer Research Center and Howard Hughes Medical Institute http://www.fhcrc.org/science/labs/hahn/methods/genetic_meth/yeast_transf_rapid.html ...

Uniplex PCR-based Sequencing Latest update 2-21-00 A.PCR Reactions: B.Processing PCR products: C.Alternative PCR Reaction Cleanup steps instead of passage through Sephadex G-50 usually not performe ...

影响因素 1.肿瘤标志物具有特异性和非特异性的双重特点。 2.各种肿瘤特性的不同，如肿瘤的分期、大小、定位、组织来源及转移趋向等的不同。 3.各种抗体的不同，如多克隆抗体、单克隆抗体、抗体决定簇和抗体亲和性等的不同。 4.各种检测系统的不同，如检测原理、标记物、实验条件、检测技术、检测仪器和检测敏感度等的不同。 5.检验人员的专业水平和技术经验、以及实验室条件和实验的可靠性等的差异。 ...

When just a few transformants are sufficient such as the transformation of a test plasmid or a GAL4BD fusion plasmid the following protocol can be used. This procedure is very flexible and can be appl ...

I am working with birds of prey....i am looking for a simple method for isolating genomic DNA from avian breast muscle....I have found protocols for mammalian tissue...will these work fine? als ...

TaKaRa的内切酶和NEB的内切酶哪个更好一些？ 参考见解： TaKaRa的内切酶、NEB的内切酶两个公司的酶的品质都非常好。NEB公司的酶的活性很高，切出两条小带可能是因为出现星活性，可以试试把酶量减半。NEB的酶很多都是克隆的，所以纯度比较高。 应用磁性微球提取人全血基因组DNA，将提取出的DNA直接用于限制性酶切反应，应用Taq1酶，但发现酶切后产生的是smier片断，即切碎的状态。不知 ...

Growth and storage of Agrobacterium tumefaciens Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3 ...

Preparation of electroporation cells 1. Prepare an overnight of NM522 in minimal medium. 2. Inoculate 1L LB with 10ml (1/100th vol) of the overnight and grow to A600 = 0.5- 1.0. 3. Pellet cells 5krpm ...

碱法提取的质粒DNA即使用RNA酶处理，仍会含有少量RNA。当有些试验需无RNA污染的DNA制品时，则需进行进一步纯化。一般常用Sepharose 2B或Sepharose 4B进行纯化，该方法具有快速，条件温和，重复性好，载体物质可以再利用等优点，因而已广泛用于质粒DNA纯化。 1、将Sepharose 2B经含0.1% SDS的TE（pH8.0）平衡后上柱。 2、将至多1ml的DNA溶液铺 ...

在已知基因部分核苷酸序列或全部核苷酸序列的情况下，基因的制备方法主要可分为两大类：一类是基因化学合成法，一类是基因生物制备法。一般又可将基因生物制备法分为文库法、cDNA 文库法和PCR法等。 1 化学合成法。 就化学本质而言，基因是一段具有特定生物功能的核苷酸序列。如果知道了基因的分子结构，就可以进行基因的化学合成。有关DNA 的化学合成方法主要有磷酸二酯法、磷酸三酯法、亚磷酸三酯法、亚磷酸酰胺 ...

The Preuss LabThe Division of Biological SciencesThe University of Chicago. http://preuss.bsd.uchicago.edu/protocols/enzyme.html ...

Acid Washing Beads Peter Novick Lab Department of Cell Biology Yale University School of Medicine http://info.med.yale.edu/cellbio/Novick/Second/Protocols/AcidBeads.pdf Materials: 1) 0.5 mm glass bead ...

重组DNA技术是现代分子生物技术发展中最重要的成就之一。即是基因工程(Gene Engineering)的核心技术。 重组DNA技术（Recombinant DNA Technique）是人类根据需要选择目的基因（DNA片段）在体外与基因运载体重组，转移至另一细胞或生物体内，以达到改良和创造新的物种和治疗人类疾病的目的。 这一技术的发展和应用，关键在于限制酶的发现和应用。 一、限制酶 限制性内 ...

The Minion Lab College of Veterinary Medicine at Iowa State University http://mycoplasmas.vm.iastate.edu/lab_site/methods/DNA/SmaIvector.html ...

稀释限制性内切酶时，建议使用稀释缓冲液（A，B，C）。建议临用前稀释且稀释终浓度不要小于1000 units/ml。目录及说明书中标注了每一种内切酶相应的稀释兼容性。 注：以下稀释液不适用于耐热DNA聚合酶。欲了解稀释耐热DNA聚合酶的相关情况，请参见相应章节。 稀释缓冲液成份： 稀释液A： 50 mM KCl 10 mM Tris-HCl 0.1 mM EDTA 1 mM DTT 200 &m ...

Has anyone used CTAB to remove polysaccharide during DNA extraction? I tried to use it under high NaCl but have had coprecipitation problem. My lysis buffer contains Tris EDTA NaCl and SDS. After solv ...

临床医生了解基因诊断质控指标的含义，对于合理地选择检测方法和正确地分析与解释结果有很大的价值。 1．灵敏度 简单地说，灵敏度就是检测的最小值。一般来说，我们希望某一种检测技术的敏感度越高越好。理想地，病原体分离培养时能从待测标本中找到一个细菌或一个病毒颗粒或其他任何一个病原体；免疫学检测时，能测出一个抗原或抗体分子，等等，但这些通常都很难做到。然而基因检测则能达到这个理想境界，但在临床实践中，我 ...

一、概述 ...

Hey folks I need Help!! Please! I have to put a 3.5 kB fragment into a 6.5 kB vector. The vector has a Km resistance gene. I use invitrogen chemically competent cells. This is what I do: I PCR amplify ...

1. 质粒制备的基本原理是什么？ 答：做过分子生物学实验的大多数做抽提过质粒，但不是所有人都知道质粒制备的基本原理。所以有必要做一个说明，能帮助您了解和解决实验过程中遇到的一些问题。制备质粒最常用的方式是碱裂解法。质粒被转化到细菌中，单菌落接种到含有特定抗生素的培养基中，一般培养到细菌生长的平台期离心收集细胞；细菌用悬浮液（Solution I 内含RNase A）悬浮细胞，用SDS-NaOH ...