DNA基础知识

相关专题 世界上绝大多数的组织样品是使用福尔马林固定石蜡包埋(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded，FFPE)的方法处理的。要想提取出其中的核酸信息，相当有难度，因为FFPE样品中的DNA和RNA已经部分降解了，且DNA往往与组蛋白紧密交联。但是这个领域的科学家们也不是等闲之辈，他们近几年已经摸索出了更有 ...

相关专题 随着MicroRNA（miRNA）研究的深入，很多人开始从miRNA的发现转入功能分析。miRNA抑制是一种确定miRNA功能的强大技术。如何开展，需要注意些什么？Exiqon公司的专家给出了五点建议。 1. 选择合适的抑制剂 若希望miRNA功能分析成功，首先要选择一个最适合您实验的抑制剂。 •检查您的目的miRNA是 ...

相关专题 为了对以个特定序列进行PCR做重复检测，需要三个不同的区域，每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出。 1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：1)PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2)组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需 ...

相关专题 ABI公司推出的310型测序仪具有应用广泛、自动化程度高、全自动电脑控制等特点，一经上市即得到广大科研用户的认同。本文介绍其具体的日常清洁维护和实验操作方法。 一.Pump Block的清洁及维护 在机器运行前，必须确认Pump Block是干净的，使用POP-6测序时，注意POP-6室温下4天须更换。 1. 打开310主机，然后 ...

相关专题 提取样品的总RNA后，一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构，因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳，得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。 一、试剂： DEPC（Sigma公司产品），MOPs（Bocherigmer公司产品），甲酰胺（Formamide，Sigma公司产品），溴酚蓝（Bromph ...

相关专题 胸腺内单分子标记阳性T细胞发育图，图片来自维基共享资源。 根据2012年2月26日发表在《自然-医学》期刊上的一篇研究论文，来自美国罗耀拉大学的研究人员报道了一种大有希望的新技术：它能潜在地将免疫系统杀伤性T细胞(killer T cell)变成更加强有力的对抗感染和可能对抗癌症的武器。 这种技术涉及传送DNA到免疫系统的抗原呈 ...

相关专题 RT-PCR核酸实验技术专题 随着现代生物学实验方法的快速发展和应用，关于我们的劲敌之一——癌症的研究和检测方法越来越多样，其中FQ-PCR技术占据了重要的一席之地，本文着重介绍了几种PCR技术在癌症中的强大应用之道。 1.单管荧光定量PCR技术的原理 单管荧光定量PCR(fluorogenic quantitative PCR F ...

相关专题 Life Technologies公司新一代Ion Proton测序仪将于本月上市。最先推出的是Ion Proton I芯片，适合外显子组测序。而在今年底或明年初，Life Tech将继续推出Ion Proton II芯片，用于全基因组测序。 据Life Tech透露，它已经收到了超过100台的订单。一些临床中心，包括波士顿儿童医 ...

相关专题 在过去20年间的研究中，RNA研究的主要方向多关注于编码蛋白的mRNA及其在细胞过程中的功能，比如疾病和发育等。但是随着研究的不断深入，研究者陆续发现了多种非编码RNA在生命过程中起着重要的调控作用，例如microRNA，siRNA，piRNA以及众多长片段非编码RNA。最近，研究人员逐渐认识到人类基因组中有至少10000个不编码 ...

相关专题 DNA文库的构建在物种基因组学研究、基因表达调控、基因片段分离和提取等实验中具有重要作用。本文介绍基因组文库的构建步骤和操作中需注意的因素以及BAC 提取DNA的两种方案。 一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无疑问，高质量的基因组DNA对于基因组文库构建是至关重要的。需要通过经验来选择合适的基因组DNA 分离方法，在分离过程中保 ...

相关专题 基因的结构、功能分析及其表达调控是现代生命科学研究中的主要课题，而基因的分离和纯化是研究的基础。基因文库的构建使基因的分析变得简单而快捷。真核或原核细胞的染色体DNA经物理或化学方法使基因组DNA分裂成为一定大小的片段，而后选择适当的载体与这些片段进行体外重组，并将这些重组体转染细菌后，可得到一组含有不同DNA片段的分子克隆混合体 ...

相关专题 实验室的需求 生物学实验室研究产生大量的EST/cDNA序列，如何分析数据成为现实问题。应用人工上网用blast比对分析1000个EST，约需2个月的工作量，且结果单一，数据不可靠。 (1)分析体系处理仅需1-2个小时，并且可以得到深入的分析结果，数据准确可靠。 (2)分析体系的完善需求 目前已经实现过相应的系统， 我们在分析思路 ...

相关专题 DNA连接与转化 质粒DNA的转化 【原理】 转化是将外源DNA分子导入到受体细胞，使之获得新的遗传特性的一种方法。转化所用的受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶(R-，M-)。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后，细胞膜、的通透性发生暂时性改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进 ...

相关专题 DNA连接与转化 LB培养基 液态培养基 根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔著)配制每升培养基应该在950 ml去离子水中加入： 胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解，用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。 LB ...

相关专题 1. 实验目的和要求 通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 2. 相关知识及原理 感受态细胞(Competent Cells): 受体细胞经过一些特殊方法(如：CaCl，RuCl等化学试剂法)的处理后，细胞膜的通透性发 ...

相关专题 DNA连接与转化 DNA胶回收电泳时通常选择跑大孔的琼脂糖凝胶。对于大孔的琼脂糖凝胶，电泳之后的待回收DNA条带通常分布面积较大，弥散且不够清晰，给后续的切胶和回收带来不便。尝试用小孔加样方式对待回收DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，取得了不错的效果。 选择两种不同长度的待回收DNA样品(约800 bp和1700 bp)，分别用小孔和大 ...

相关专题 生物芯片技术从诞生以来就受到相关科研人员的广泛关注与认同，是未来10年最具发展潜力的技术。本文从生物芯片的特点、分类、制备步骤、发展动向、相关仪器、各种芯片之间的差别等方面对这一技术进行全面介绍。 一、生物芯片的定义 生物芯片(Biochip或Bioarray)是指包被在固相载体上的高密度DNA、抗原、抗体、细胞或组织的微点阵(m ...

相关专题 仅仅不到三十年的时间，聚合酶链式反应PCR席卷了生命科学研究，成为了许多生物实验室必备的实验技术。虽然其基本前提——扩增目的DNA样品——不变，但近年来出现了不少创新，将这一技术发展到了许多应用领域，比如利用定量PCR分析特异性RNA转录的拷贝数，来确定基因表达水平。另外基因组研究的发展也促使研究人员增多了PCR的应用，比如缩小重 ...

相关专题 近年来，尽管测序技术在快速发展，但DNA提取方法却鲜有改进。对于宏基因组研究，这是必需的一步。然而，许多微生物无法在实验室中培养，这成为分析大量微生物样品的一个主要瓶颈。参与美国NIH的人类微生物组计划(Human Microbiome Project)以及地球微生物组计划(Earth Microbiome Project)的科学 ...

相关专题 ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。Veriti系出名门，秉承了一贯的可靠性，并是真正意义上的梯度多重控温(六合一)梯度PCR仪。 温度梯度PCR仪进展 温度梯度PCR仪最先由eppendorf公司在1998年研发成功推向市场(Mastercycler Gradient)，此后Biometra ...