细菌

微生物检验总则

SPA提取的方法很多，包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下： 1.煮沸提取法 ⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上，37℃培养20h~24h。 ⑵ 以0.15mol/L pH5.9PB液将菌苔洗下，配成10%（V/V）的悬液。 ⑶ 水浴中煮沸1h，迅速冷却至4℃，4 000r/min离心20min ...

Purifying Large E. coli Restriction Fragments from Pulsed-Field Gels DNA Preparation E. coli chromosomal DNA is prepared following the method of Heath et al. ( J. Bacteriol. 174 1992). Cells ...

各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，这里主要介绍碳水化合物的代谢试验 1．糖（醇、苷）类发酵试验 （1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解 ...

Folin—酚试剂法（Lowry法） （一）实验原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋 ...

随着分子生物学的迅速发展 细菌的分类鉴定亦从传统的表型分类进入到各种基因型分类水平 如(G+ C)mo l%、DNA 杂交、rDNA 指纹图、质粒图谱和16S rDNA 序列分析等。rRNA 存在于所有细菌中rRNA 基因由保守区和可变区组成 在细菌中高度保守。rRNA 基因包含5’端到3’端的若干种成分 分别是16S rDNA、间区、23S rDNA、间区和5S rDNA ...

摘要： 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质 ...

自杀性质粒载体：一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上，通过接合等使其进入宿主，由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白（如Pi蛋白等），其无法复制，在外界选择性压力的作用下自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组，产生了带有突变的突变株；而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。至于一次重 ...

革兰氏染色是细菌鉴定上一个最重要和广泛应用的方法。根据此法染色结果可将细菌分成两大类。一类细菌能够保留初染色剂（结晶等）于细胞中，不受脱色剂（酒精）的影响，而最后细菌被染成紫色或深蓝色者称为革兰氏阳性（Gram-positive）；另一类细菌可因脱色剂的作用而洗出结晶紫，然后被另一染色剂（藏红花）染成红色，称为革兰氏阴性（Gram-negative）。也有一些菌种革兰氏染色是可变的。 【实验目的】 ...

简单染色通常只用一种染色剂，使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态、大小和排列方式等。 【实验目的】 1、掌握单染色的操作技术 2、观察细菌的基本形态 【实验原理】 单染色即用单纯的种染料进行染色，多数采用美蓝、结晶紫或石碳酸复红等碱性染料。此法仅能显示细胞的外部形态，而不能辨别其内部结构。 染色前必须将细胞固定，其目的是杀死细菌，并使它粘附在载玻片上。此外，还可以增加菌体 ...

园友sakuyaandy： 我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养，如果没有的话，用厌氧瓶或厌氧缸都可以。培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸不过这都是培养用的培养基如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用，具体文献名称为 园友jerrycs： 厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，其生理 ...

lipmail1112：因7H11培养基萎缩后H37RV就不可能再生长。我之前已经用封口膜封好，培养箱内的湿度也可以保证“箱内已放灭菌水提供湿度”。 tb9981：1、改用试管进行培养 2、如果用平皿用封口膜可能影响生长，把平皿放饭盒里，饭盒内放上加水的纱布，每天观察保持湿度就可以。 ...

（一）实验目的：学习细菌的鞭毛染色法 （二）实验原理：细菌的鞭毛极细，直径一般为10—20nm，只有用电子显微镜才能观察到。但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。现推荐以下两种染色法。 （三）实验器材 1. ...

园友loveswh2006 提供的微生物实验指导（黄文芳，张松编著，华南师范大学生命科学学院）在实验15微生物数量的测定中有详细的操作介绍。 微生物数量的测定 细菌群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法(direct microscopic count)、平板菌落计数法(plate count)、光电比油法(turbidity estimation by ...

提纯蛋白质后，需要测定其最小抑菌浓度（MIC），有文献提到根据MIC测得的结果计算抑菌率： 抑菌率（%）= (阳性对照OD值—试验OD值) / (阳性对照OD值—阴性对照OD值 )X100 样品的MIC与同性质药物和一些常用药物的MIC进行比较才有意义，不能单纯通过自己样品的结果就判断出高低，并且不能只用一种细菌。要考虑用不同种类的细菌进行实验，还要做质控。根据抑菌率大小 ...

细菌药敏实验常用方法

细菌保存的常用方法

alimama_pid="mm_10043573_137377_1822161"; alimama_titlecolor="FF9900"; alimama_descolor ="552c55"; alimama_bgcolor="f7f7f7"; alimama_bordercolor="f7f7f7"; alimama_linkcolor="552c55"; ...

介绍了两种细菌计数的简便方法

脑膜炎球菌和李斯特菌的培养