实验基础

Allergens are characterized by their ability to be bound by gE. The Swiss-Prot protein database currently lists a partial or complete amino acid sequence of in excess of about 350 allergens. It is not clear how allergens participate in the process of allergic sensitization, the generation of spe ...

The study of monoclonal human T-cell populations has had a fundamental impact on our current knowledge of the function, specificity, and mechanisms of activation of these cells. The frequency of antigen-specific T cells in peripheral blood is low, necessitating several enrichment steps ...

CD8 T cells play an important role in the regulation of allergic disease. Human and murine CD8 T cells have been shown to be capable of differentiating into distinct subsets defined by cytokine profiles analogous to the Th1 and Th2 subsets and termed T cytotoxic 1 (Tc1, IFN-γ producing) and 2 (Tc2, IL-4 prod ...

Dendritic cells (DC) are widely considered to be the major antigen-presenting cell (APC) type in immune responses. These cells are obtained from adherent cells or are purified CD14+ monocytes from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) by in vitro stimulation with granulocyte, macr ...

Allergy and asthma are characterized by airway hyperresponsiveness and chronic mucosal inflammation mediated by CD4+ Th2 lymphocytes and their cytokines. It is unclear why allergic individuals make a Th2-type T-cell response whereas other (non-allergic) individuals do not. Rec ...

前几天才把硕士毕业证领到手，领的过程中，被辅导员训斥了一顿，不过无所谓了，面皮现在越来越厚。十月底提前写好论文，找了家私企去实习了，十二月点辞职了，原因就不说了。这几天在学校收拾东西搬宿舍，空闲之余我想，我该做点什么，要不我的研究生就这么度过了，木有结论似的。这些个算是给我的青春一个交代吧。熊掌和鱼肉不可兼得也努力吧，骚年！观世音菩萨，玉皇大帝，如来佛祖，上帝，圣母玛利亚，春哥......保佑我考上你是电 你是光 你是唯一的神话 我只爱你 ...

因为微生物是肉眼看不见的，所以初学微生物学的学生常不知道外界环境和所有与外界接触的身体各部位均有微生物的存在。实际上它们广泛分布于室内外的空气、水和土壤中，桌、椅和板凳的表面，衣服以及身体的皮肤、粘膜（例如鼻腔、口腔、喉头等的粘膜）等处，因此，可以说微生物是无缝不钻，无孔不入的。在学生第一次进入微生物学实验室时，建立起“微生物无所不在”这一概念是特别重要的，因为这样才能体 ...

普通未生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验，培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神；树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。 为了上好微生物学实验课并保证安全，特提出如下注意亊項： 1.每次实验前必须对实 ...

微生物学实验技术和方法是微生物学建立和发展的基础，也曾为整个生命科学技术的发展 做出过积极而重要的贡献。随着分子生物学的诞生及其技术的应用，各学科的交叉和渗进，极大地丰富了微生物学实验技术的内容，井将其推向一个新的发展阶段。而且微生物学实睑技术和方法也已广泛地渗透到现代生命科学的各分支领域，不断发挥着它独特的作用，因此《微生物学实验》是一门十分重要的基础课实验。我们曾分别在1980年和1989年 ...

《微生物学实验》第一版自1980年出版以来已有七八年了，在此期间，经过多次印刷，印数已 达十余万册。它在微生物学的教学和稳定教学秩序方面起了积极的作用，但是也存在不少缺点， 加上近年来微生物学技术发展迅速，因此我们进行了第二版的修订工作。 修订内容和特点如下： 1. 将繁多的实验按类归纳成15个部分，以示条理淸楚，概念分明，每一部分冠以综合性说 明，主要简单介绍该部分的内容W述其在 ...

《微生物学实验》一书是根据1977年10月成都综合性大学生物类教材会议制定的大纲编写 的。在编写过程中，为配合武汉大学、复旦大学编的《微生物学》教材，在内容上有所增加和修改。 本书共有实验40个，内容较多，其中包括与《微生物学》相配合、印证理论以及进行微生物实验所需的基本操作和技能的训练两大部分，各校可根据具体条件酌侑选做。 本书为方便教学，每一实验基本上都按目的要求、基本原理、 ...

微生物广泛存在于周围环境中，其中有些又是病原微生物，从预防感染出发，医务工作者必须严格执行无菌操作，对所用的物品和工作环境进行消毒灭菌，确保医疗与科研正常进行。消毒灭菌主要是通过理化因素使微生物的主要代谢发生障碍，或菌体蛋白质变性凝固，或破坏其遗传物质，导致微生物死亡。这里主要介绍物理因素杀灭微生物的几种方法，以及相关器材的使用。 (一)高压蒸汽灭菌器 1. &nbs ...

感染性疾病的诊断关键在于病原菌的分离与鉴定，人工培养法为细菌提供必要的生长条件，使其在体外生长繁殖。本章着重介绍常用细菌培养基的制备、细菌的接种方法及生化反应鉴定法，最后简介了内毒素的检测。要求同学们了解培养基的制作原则和方法，掌握细菌的分离培养技术。 培养基是指在人工培养细菌时，提供给细菌生长繁殖所必需的营养物质的制品。基础培养基中所含的营养物质能满足一般病原菌生长繁殖所需的氮源 ...

组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点：　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。　　（3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。　　（4）从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清 ...

1．培养细胞到对数生长期（约107细胞/ml）。2．直接取0.1ml甲醛加到含有1ml培养物的离心管中固定细胞（甲醛浓度为3.7％；标准母液是37％）。3．在甲醛中培养细胞30分钟或稍长时间。4．用PBS洗两次，离心5分钟收集细胞。5．用50μl的PBS悬浮细胞，加5个单位的罗丹明或荧光素连接的鬼笔环肽。6．用PBS洗3次，重新悬浮在小体积的封固剂中。7．用罗丹明或荧光素滤片观察。 ...

　　（一）直接法　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30min，切片置入能保持潮湿的染色盒内，防止干燥。　　2．洗片 　倾去存留的荧光抗体，将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次，搅拌，每次5min，再用蒸馏水洗1min，除去盐结晶。　　3．用50%缓冲（0.5mol/ ...

消除荧光抗体非特异性染色的方法应根据产生的原因采取适当的方法，常用的方法有以下几种：　　（1）动物脏器粉末吸收法　　常用肝粉（猪、大白鼠或小白鼠），其次是骨髓粉、鼠脑粉和鸡胚粉等。每毫升荧光抗体中加入肝粉50～100mg在离心管中充分混匀，在室温中振动2h，4℃中过夜，再搅拌10min，高速离心（3000～15000r/min）30min，1～2次后，即可使用其上清液。吸收一般应在临用前进行，吸收 ...

　 时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassayTRFIA）是近十年发展起来的一测微量分析方法，是目前最灵敏的微量分析技术其灵敏度高达10-19，较放射免疫分析（RIA）高出3个数量级。　　时间分辨荧光分析法（TRFIA）实际上是在荧光分析（FIA）的基础上发展起来的，它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外－ ...

1）核DNA和线粒体DNA1．当细胞培养到约107细胞/ml时，离心（5秒）收集细胞，再悬浮在70％乙醇中。2．固定5分钟或5分钟以上，用水洗2次。3．将细胞悬浮在含有50ng/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚的封固剂中。1mg/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚母液可在－20℃下贮存。4．用紫外滤片观察。 2）线粒体1．在生长培养基中培养细胞达到约107细胞/ml时，加入100ng/ml 3，3’ ...

石蜡组织切片的HE染色1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4μm切片。2．切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。3．苏木素染色5min，自来水冲洗。4．盐酸乙醇分化30s（提插数下）。5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。6．置伊红液 ...