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实验基础

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耶尔森氏菌及检验

耶尔森氏菌属包括11个种,其中对人有致病性的有三种:小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核菌和鼠疫菌。只有小肠结肠炎耶尔森氏菌和假结核菌已确定是食源性病原体。鼠疫耶尔森氏菌引起黑疽病,不通过食品传染。  1981年根据DNA以及生化和形态特征的相关资料,与小肠结肠炎耶尔森氏菌极为密切3个同源群被作为耶尔森氏菌的新种命名,它们是弗氏耶尔森氏菌(Y·frederiksenii)、中间型耶尔森氏菌(Y·inter ...

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霉菌和酵母菌及其检验

一、霉菌和酵母菌介绍:  霉菌和酵母菌及其检验酵母菌是真菌中的一大类,通常是单细胞,呈圆形卵圆形、腊肠形或杆状。  霉菌也是真菌,能够形成疏松的绒毛状的菌丝体的真菌称为霉菌。  霉菌和酵母广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。长期以来,人们利用某些霉菌和酵母加工一些食品,如用霉菌加工干酪和肉,使其味道鲜美;还可利用霉菌和酵母酿酒、制酱;食品、化学、医药等工业都少不了霉菌和酵母。但在某些情 ...

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志贺氏菌属及检验

志贺氏菌属(Shigella) 的细菌(通称痢疾杆菌),是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多,有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等,还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾,其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢,死亡率甚高。  志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别,为革兰氏阴性杆菌,长约2-3& ...

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LB培养基的配制

LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。尽管该培养基的名称被广泛解释为Luria-Bertani 培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语的 lysogeny broth,即溶菌肉汤。LB培养基的配制:成分胰蛋白胨(t ...

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金黄色葡萄球菌检验

1 主题内容与适用范围本文规定了食品中金黄色葡萄球菌的检验方法。本文适用于航空食品的检验。2 设备和材料吸管(1ml、10ml)、恒温培养箱(36±1℃)、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等3 培养基和试剂普通肉汤培养基、胰蛋白胨大豆肉汤、Baird-Prker琼脂平板、缓冲蛋白胨水(BP)、凝固酶试验冻干血浆4 检验程序(非选择性增菌法)金黄色葡萄球菌检验程序如下:检样2 ...

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菌落总数

一、菌落总数介绍:  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃ ...

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PDA培养基的配制

母种培养基的配制同一种菌类培养基的配方虽然有多种多样,但必须含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱度。马铃薯、葡萄糖、琼脂作为各类母种的培养基最为普遍,菌丝都能正常生长。现将常用的培养基配方和配制方法举例介绍。1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮):200g葡萄糖:20g琼脂:20g水:1000mLpH值:自然2.马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基)马铃薯(去皮):200 ...

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LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基在用途上有什么区

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种使菌种成倍扩增达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌我们可以表达大量的外源蛋白也可以拿到带有外源基因的质粒工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础. 牛肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。两者都属于半合成培养基。牛肉膏蛋白胨 ...

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PDA培养基,牛肉膏蛋白胨培养基的配方

牛肉膏蛋白胨培养基(主要是培养细菌用的)牛肉膏 5.0g蛋白胨 10.0gNaCl 5g水 1000mLpH 7.2~7.4PDA培养基(主要是培养真菌用的)马铃薯(去皮) 200.0g蔗糖(或葡萄糖) 20g水 1000mLpH&

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培养基成分及来源,设计与优化

培养基的成分及来源碳源即提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分,同时提供合成目的产物所必须的碳成分。 常见的来源主要有糖类、油脂、有机酸、正烷烃等。 工业上常用的糖类主要包括:葡萄糖、糖蜜(制糖生产时的结晶母液)、淀粉等。氮源氮源主要用于构成菌体细胞物质(氨基酸,蛋白质、核酸等)和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类:有机氮源和无机氮源。有机氮源和无机氮源应当混合使用,在发酵早期 ...

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大豆中提取天然蛋白胨的方法

大豆中提取天然蛋白胨的方法:a、大豆经清洗筛选后进行生物浸油;b、浸油后的大豆粕加入发酵剂、生物分解菌进行固体参数震荡发酵;c、发酵后加入活化酶,进行分离;d、分离后的产品进行超临界萃取,便获得成品。 (责任编辑:大汉昆仑王) ...

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培养基的要求和分类

发酵培养基从广义上而言,是指可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质与原料。同时其也为微生物培养提供其他所必须的条件。发酵培养基的基本作用在于满足菌体的生长,促进产物的形成。它的基本要求为:培养基能够满足产物最经济的合成。 发酵后所形成的副产物尽可能的少。 培养基的原料应因地制宜,价格低廉;且性能稳定,资源丰富,便于采购运输,适合大规模储藏,能保证生产上的供应。 所选用的培养基应能满足总体工艺的要 ...

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微生物学实验室常用试剂及其使用方法

常用试剂及其使用方法 一、诊断用纸片 ⑴ 杆菌肽纸片(0.04U/片): 抑菌圈10mm为敏感。质控菌株: D群链球菌阴性 A群链球菌阳性。 ⑵ SMZ纸片(1.25μg/片、23.75μg/片): 出现抑菌圈即为敏感。质控菌株:D群链球菌阳性, A群链球菌阴性。 ⑶ 新生霉素纸片(5.0μg/片): 抑菌圈≥16mm为敏感。质控菌株:表皮葡萄球菌阳性,腐生葡萄球菌阴性。 ...

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微生物学实验室基础培养基

一、液体基础培养基 1.蛋白胨水 用于细菌靛基质试验;以及一般细菌培养和传代。 蛋白胨(或胰蛋白胨)10g,氯化钠 5g,蒸馏水1L。 将上述成分溶于水中,校正pH 至7.2分装试管,每管2~3ml,置121℃灭菌15min备用。 大肠埃希菌生长良好,靛基质阳性;伤寒沙门菌生长良好,靛基质阴性。 2.营养肉汤 一般细菌的增菌培养,加入1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。 蛋白胨10g,牛肉膏3g ...

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蛋白胨水的使用方法和注意事项

蛋白胨水使用方法:1、称取本品25g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加热搅拌溶解煮沸至完全溶解,分装小试管,121℃高压灭菌15min。2、挑取少量待检菌的新鲜纯培养物,接种至培养基中,于36±1℃培养24—48h。必要时可培养4—5d。3、滴加(029030)靛基质试剂约0.5mL,覆盖于培养液表面,在两液接触处呈现玫瑰红色者为阳性反应,无红色者为阴性反应。蛋白胨水注意事项:1、试剂应密闭于棕色瓶 ...

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微生物学实验室保存和增菌培养基

一、菌种保存培养基 蛋白胨10g,牛肉膏5g,氯化钠3g,磷酸氢二钠2g,琼脂粉4.5g,蒸馏水1L 。 将上述的成分混合于水中,加热溶解,调pH至7.4~7.6,分装试管2/3左右高度,121℃高压灭菌15min,成为半固体培养基,备用。 培养基呈淡黄色半固体状。大肠埃希菌(ATCC 25922)生长良好动力阳性;福氏志贺菌(ATCC 12022)生长良好动力阴性;金黄色葡萄球菌(ATCC ...

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微生物学实验室中如何分离培养基

一、革兰阳性杆菌分离培养基 1.罗-琴改良培养基 用于结核分枝杆菌培养。 磷酸二氢钾2.4g,硫酸镁0.24g,枸橼酸镁(或枸橼酸钠) 0.6g,天门冬素3.6g,甘油12ml,蒸馏水600ml,马铃薯淀粉30g,新鲜鸡卵液1L,2%孔雀绿水溶液20ml。 先将磷酸盐、硫酸镁、枸橼酸镁、天门冬素及甘油,加热溶解于600ml蒸馏水中。再添放马铃薯粉,边放边搅,并继续置沸水中加热30min,待冷却 ...

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霍乱弧菌的微生物学诊断

霍乱弧菌(V.cholera)是人类霍乱的病原体而霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一,曾在世界上引起多次大流行,主要表现为剧烈的呕吐,腹泻,失水,死亡率甚高,属于国际检疫传染病。 霍乱弧菌包括两个生物型:古典生物型(Classical biotype)和埃尔托生物型(EL-Tor bio-type)。这两种类型除个别生物学性状稍有不同外,形态和免疫学性基本相同,在临床病理及流行病学特征上没有 ...

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霍乱弧菌的生物学性状

(一)形态与培养特性 从病人分离出古典型霍乱弧菌和ELtor弧菌比较典型,为革兰氏阴性菌,菌体弯曲呈弧状或逗点状,菌体一端有单根鞭毛和菌毛,无荚膜与芽胞。经人工培养后,易失去弧形而呈杆状。取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察,可见细菌运动极为活泼,呈流星穿梭运动。营养要求不高,在PH8.8~9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的 ...

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霍乱弧菌的发病机理及防治原则

(一) 霍乱弧菌的发病机理 正常胃酸可杀灭霍乱弧菌,当胃酸分泌缺乏或低下,或入侵的霍乱弧菌数量较多时,未被杀灭的弧菌就进入小肠,在碱性肠液内迅速繁殖,并通过粘液对细菌的趋化吸引作用、细菌鞭毛活动以及弧菌粘蛋白溶解酶和粘附素等的作用,粘附于小肠粘膜的上皮细胞表面,并在此大量繁殖。 霍乱弧菌产生强烈的外毒素,即霍乱肠毒素,由A亚单位和B亚单位组成。B亚单位与该处粘膜上皮细胞表面受体——神经节苷脂结合 ...

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