实验基础

相关专题 酵母培养操作规程主要介绍了酵母扩培(培养基制备与接种操作)、实验室菌种的保藏及活化、 酵母检测的方法等等，希望对大家有用，不对的地方，望指正。 第一章 酵母扩培 §1-1 实验室扩培 1培养基制备 【试剂】：冷麦汁、蒸馏水、新鲜鸡蛋。 【器具】：试管(15×150)及(18×180)、小巴氏瓶(三角瓶)、大巴氏瓶(大三角瓶)、卡氏 ...

相关专题 用LB培养基来设计 不同的离子对大肠杆菌生长状况的影响的实验应该怎么设计，怎么做? 以下方法仅供参考： 1、首先养几个平板固体培养基培养的大肠杆菌，保证这些细菌来自于同一个克隆; 2、采用液体培养并用分光光度计测定浊度来评价大肠杆菌生长。 3、盐可选择氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化锌、铵盐、磷酸盐等; 4、浓度差别可做，可不做; 5 ...

相关专题 配制每升培养基，应该在950 ml去液态LB培养基离子水中加入： 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。 1、LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基 ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 目的 认识酵母菌的形态特征，了解培养酵母菌的方法。 实验前的思考 人类认识和利用酵母菌的历史悠久，早在史前时期，先人们就学会酿酒。约在6000年前，就发明发面的方法。直到十九世纪有了显微镜，人们才窥探到醉母菌的真面目。对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯，他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入 ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 一、目的 1. 掌握微生物分批培养的生物反应器操作; 2. 掌握的菌体浓度、总糖等参数测定方法; 3. 掌握分批培养的生长动力学及生长曲线的测定方法。 4. 了解酵母的生长特性。 二、原理 分批反应操作是指基质灭菌、接种以后，除了好氧反应需要在反应过程中通入无菌空气、消除泡沫所用的消泡剂以及维持一定pH值所用酸碱 ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 第一部分 酿酒酵母培养基和培养平板配方 所有的液体培养基需用磷酸缓冲液配制：Na2HPO4-7H2O 10.19g/L NaH2PO4-H2O 8.56g/L. 称量好所需组分，先把氨基酸、氮源等添加到水中，再添加糖最后添加10X的磷酸缓冲液。液体培养基的PH需在6.25左右。 液体选择培养基和丰富培养基可以选择 ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 毕赤酵母表达的培养基配制 2.1 LB(Luria-Bertani)培养基： Trypton l% Yeast Extract 0.5% NaCl l% PH 7.0 制作平板时加入 2%琼脂粉。121℃高压灭菌 20min。可于室温保存。用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeoc ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 问：现在老板要我养酵母，本人对酵母这块不是很了解，希望帮友发一些酵母的基础知识以及酵母培养中需要注意的问题和培养酵母的培养基的配制等等，多谢大家! 答：酵母菌是一些单细胞真菌，目前已知有1000多种酵母。酵母可以通过出芽进行无性生殖，也可以通过形成子囊孢子进行有性生殖。无性生殖即在环境条件适合时，从母细胞上长出一 ...

相关专题 在钓鱼的时候，使用适当的诱饵，才有可能钓到真正的大鱼。科学研究也是一样，我们需要适当的显微镜来观察那些最小的分子和原子。如今，研究人员正在改进他们的光学显微镜，以捕捉细菌和古细菌中那些最小的分子。 过去认为细菌是由一些无任何空间结构的生物分子所组成，如今看来，这种观点已经过时。细菌的染色体似乎有着特定的结构，但要解析这种结构，研究 ...

相关专题 LB培养基的配方及实验指南 本文总结了毕赤酵母表达常用的一些载体以及14种毕赤酵母表达所用培养基，即：LB(Luria-Bertani)培养基、LLB(Low Salt LB)培养基、 YPD (又称YEPD)、BMGY培养基、BMMY培养基、YPDS + Zeocin 培养基、最小甘油培养基(MGY)、葡萄糖再生培养基（RD)等。 ...

相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） 酵母细胞的细胞壁比较厚，不容易破壁，不如大肠杆菌的质粒容易提取，最近做了些酿酒酵母的实验，从酿酒酵母中提取质粒，现在就总结下实验的方法和步骤。 酵母细胞质粒提取步骤 1. 接种单菌落(待检测酵母细胞)于25mLYNB(补加氨基酸营养物)培养基中，30℃振荡培养过夜。 2.第二天取一滴菌液于进行显微镜 ...

相关专题 酵母细胞的培养专题 本文主要介绍了四种酵母培养基的配制方法与原理，主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。具体如下： 一、目的要求 了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。 学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。 二、基本原 ...

相关专题 相信每个致力于微生物研究的研究人员都会面临一个问题，那就是菌种的保藏!今天， 小编将几种常用的菌种保藏方法整合起来，希望对大家有些帮助。 几种常用的菌种保藏技术 基本原理 微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干 ...

相关专题 本文主要介绍了大规模培养脊髓灰质炎病毒(Polio virus)后纯化的的4个步骤。脊髓灰质炎病毒是一种已被广泛研究的危害人体健康的病毒。 脊髓灰质炎病毒( 在开展人体病毒实验工作以前，让实验工作人员获得抵抗这种病毒的免疫力是非常必要的。脊髓灰质炎病毒疫苗很容易获得，大多数工作人员可能已经获得免疫，但重新免疫是必要的预防措施 ...

实验目的：掌握培养基的配制原则与方法； 掌握划线分离纯化微生物的原理与方法 熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项； 实验材料：器材：试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。 试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等 实验原理： 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素、能源和水。根 ...

分子生物学技术的应用使肠道微生态学的研究取得了突破性的发展。目前研究最多的是16S rRNA。近几年来国外学者采用不同的分子生物学方法对细菌的16SrRNA进行研究，得到了广泛的细菌16SrRNA序列库。使用该方法可以检测肠道中常规方法不能培养或生长缓慢的细菌。rRNA分子在生物体中普遍存在，生物细胞rRNA分子的一级结构中既具有保守的片段，又具有变化的碱基序列。在生物进化的漫长过程中rRNA分子 ...

材料、设备及试剂 一、材料种子培养液一、设备 1. 7L发酵罐2. 5ml离心管3. 分光光度计三、试剂100mmol/L IPTG贮存液1mg/mL卡那霉素（Km）贮存液操作步骤1．接上pH电极的插头 接通底部冷却水管和空气出口处的冷凝器上的冷却水管 将各硅酮管置于相应的蠕动泵上。2．把搅拌马达置于搅抖联动装置上。3．把光标调到“Temperature”档 设定温度为30℃。4．校正DO电极的满 ...

材料、设备及试剂 一、材料1. 可诱导表达目的蛋白的重组大肠杆菌BL21二、设备 1. 超净工作台2. 恒温震荡培养箱3. 250mL、500mL三角瓶4. 7L发酵罐5. 分光光度计三、试剂1． 胰蛋白胨（Tryptone）2. 酵母抽提物（Yeast extract）3. 氯化钠（NaCl）4. 磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O）5. 葡萄糖（glucose）6. 卡那霉素（Km）7. ...

材料、设备及试剂一、材料取样的5ml发酵物二、设备5ml管离心机25ml磨砂口刻度试管电磁炉三、试剂35-二硝基水杨酸溶液：6.5g 35-二硝基水杨酸溶于少量水中，移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙酮，定容到1000ml。操作步骤1． 细胞干重的测定发酵过程中收集的样品，4000r/min离心10min（上清转移至干净的试管中），加入5 mL去离子水 ...

细菌超声破碎的小总结细菌工程菌胞内表达主要分为两种形式，一种是在强启动子条件下的高效表达，由于蛋白的过度表达，使蛋白不能及时有效折叠而发生无规则卷曲，以固体颗粒的形式堆积于胞间质中，这就是所说的包涵体，另外一种是间质内的可溶性表达，即可以发生正常折叠，具有生物活性。一般情况下，细菌只要被正常破壁就可以通过离心的形式将包涵体和可溶性表达的蛋白分离开。超声破碎的条件一般是300w，10s/10s，20 ...