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[请教]如何解决血清抗原的阴性对照偏高的问题?

我做的间接ELISA,用猪血清作为包被抗原,兔抗体作为一抗,HRP-羊抗兔作为二抗。阳性的反应基本正常,而且抗体效价不错。可就是阴性对照老是很高,使用小牛血清封闭好想基本没有效果(我试过用pH7.4 的pbs和pH9.6 的cbs 稀释1%、5%、10%浓度的小牛血清,另外还有明胶)。以下是我昨天做的一个结果,一抗从1:12800稀释(阴性阳性均同),抗原从1.25ug/ml开始包被,都是倍比稀释。1234563.0273.0463.00 ...

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【共享】滤血膜使用方法

滤血膜使用方法说明(适用于本公司推荐型号GF2;whatman-MF1及国产MF-B02)一:申明,本说明是公司技术人员多年工作所得经验,请转载者标明源自上海杰一生物技术有限公司;该说明不敢说最好,使用过程中如果您发现更好的处理方法,欢迎联系,互相交流互相学习。二:在使用滤血膜之前请理解使用这个耗材的目的,是为产品更加方便简捷而做,让产品的终端使用客户无需把血液离心为血清,而更进一步的节省了检测时间增加效率,直接使 ...

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【请教】大家帮我看看这个ELISA结果有没有效?

经过一番摸索,现在我所作 的间接ELISA的阴性本底总算降下来了。不过我不知道该怎样判断那个值有效.贴出来,请高手指点一下。(以下是筛选抗原抗体最佳工作浓度的)1234563.5523.7953.5523.2512.5851.8821.8511.1930.7150.4020.2890.1814.1143.6713.1072.2291.4140.9541.2430.6960.4090.2170.1500.1262.4341.6071.2 ...

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(讨论)液相芯片资料

请认真阅读本版的《重要通知》,将帖子规入最相近的子版中。请合作,否则扣分警告!Luminex™100 Liquid Array液相芯片分析平台Luminex™100是一个多功能的液相芯片分析平台,通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。Luminex™100有机地整和了有色微球(color-coded microsphere or bead)、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则,造就了 ...

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【转贴】教您几招,如何鉴别假冒伪劣ELISA试剂盒

近来许多客户向我们反映一些唯利是图的公司和小作坊,用假冒伪劣的ELISA试剂盒坑害广大的科研工作者,他们往往唯利是图,无视科学研究的严谨性和严肃性,让广大的科研工作者被动造假,严重扰乱了科研工作,严重扰乱了市场秩序,所以我们有义务,有责任揭露这些作伪造假者制作假冒伪劣ELISA试剂盒的手法,同时提供如何鉴别这些假冒伪劣ELISA试剂盒的方法,供广大的科研工作者和用户参考,让那些挂羊头卖狗肉,冒牌进口试剂,以及 ...

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【整理】ELISA的原理和类型(一)

1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质 ...

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【共享】组织芯片的分类、优势、制备等全面解读

组织芯片具有省时高效误差小等优点,自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的特点、制备方法、制备过程、分类、优点、应用、研究分析等方面对这一技术进行介绍组织芯片具有省时高效误差小等优点,自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的特点、制备方法、制备过程、分类、优点、应用、研究分析等方面对这一技术进行介绍。组织芯片的概述组织芯片(tissue chip),也称组织微阵列(tissue m ...

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【交流】时间分辨荧光免疫分析技术

时间分辨荧光免疫分析技术前景看好  时间分辨荧光免疫分析技术的进展,将会带动相关新产业结构的企业形成。国内外高度重视其科研与应用。我国科学家领先一步的这项科研成果,将进一步促进该技术产品全面国产化,进一步提高我国临床诊断及研究的整体水平。  15年的艰苦攻关,终于取得丰硕成果。2月20日,我国多位专家联合攻关的课题“镧系元素时间分辨荧光分析技术及仪器的配套研究”,荣获2003年度国家科技进步二等奖。这个课题是由第二军医大 ...

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【信息】【新年促销】德国IBL儿茶酚胺类ELISA试剂盒优惠大促销 5.5~7.5折优惠

德国IBL儿茶酚胺类ELISA试剂盒优惠大促销!5.5~7.5折!德国IBL国际有限公司是一家有着近30年经验的专业医疗诊断试剂研发制造商,其产品均已经通过ISO9001、ISO13485和欧洲CE认证,并且通过了美国FDA的认证。公司产品系列包括生物胺系列、传染病系列、新生儿筛查系列及不孕系列等ELISA产品及放免产品。深圳市科润达生物工程有限公司,为德国IBL公司中国(含港澳地区)独家代理商!现我公司推出德国 ...

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【整理】FISH(荧光原位杂交)技术全攻略

荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示核酸序列位置的方法。该技术问世与70年代中期左右,其曾多于与染色体异常的研究,近年来随着FISH探针种类的不断增多,使得该技术逐步应用于各种领域。该技术具有快速,安全,灵敏度高以及探针可长期保存等特点,目前已广泛应用于细胞遗传学,肿瘤生物学,基因定位,基因作图, ...

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(请教)Competitive ELISA

一篇文献中的ELISA方法如下:Control peptides (14–17 amino acid sequence near the N-terminal or C-terminal of the studied protein) and the reactive rabbit anti-defensin antibodies (affinity pure) were obtained from Alpha Diagnostics .CoStar flat-bottom high-binding ELISA plates were c ...

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【共享】3i胶体金经典文献2-胶体金在快速检测中的地位

http://www.3i.com.cn/article/08.htmThe place of gold in rapid tests(胶体金在快速检测中的地位)Originally Published March 2000John Chandler, Tracey Gurmin, and Nicola Robinson发布者:派坤学苑 (bbs.3i.com.cn)发布时间:2006-5-11--------------------------------------------------------------------------------Sup ...

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Western Blot 相关试剂

1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O至100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤。2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS ...

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PLA(邻近连接)技术简介

PLA技术全称为Proximity Ligation Assay,国内译为邻位连接或者邻近连接技术。PLA技术是一种特殊的免疫分析方法,可用于检测目标蛋白,蛋白相互作用等等。该方法通过一对标记有一段寡聚脱氧核苷酸(单链DNA)的单克隆或者多克隆抗体的探针,即PLA probe(探针),识别目的蛋白,当这两个探针识别同一个蛋白时,两个探针之间的距离靠近,产生了所谓的邻近效应(proximity)。此时,通过加入一段分别与连接在抗 ...

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ELISA检测结果准确可靠的必要条件

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗 ...

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ELISA试剂盒检测过程中的注意事项

ELISA的实验操作所要求的条件是比较严格的,无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求,都是如此。因此在做ELISA实验时,一定要注意以下几点。一、ELISA实验通用规则1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。3、要在实验前1小时将试 ...

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捕获ELISA法

第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注 ...

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R&D Systems Quantikine® 人高分子量脂联素ELISA试剂盒

脂联素,也称为30 kDa 的脂肪细胞补体相关蛋白(Acrp30),是一种主要由脂肪细胞分泌的激素,它调控了多个代谢过程。它合成时为30 kDa 的单体,随后组装成低分子量(LMW)的同源三聚体,包含两个以二硫键连接的单体以及另一个非共价连接的亚基。2 同源三聚体进一步形成中等分子量(MMW)的六聚体和高分子量(HMW)的多聚体。1,2 尽管三种分子量的脂联素异构体都存在于血浆中,但HMW 的脂联素是主要的生物活性形式。3脂联素通过对葡萄糖和 ...

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 神经免疫内分泌学引论

第十章 神经免疫内分泌学引论   生物科学研究在广度和尝试上飞速发展,导致传统的学科界限日趋模糊,并不断衍生和分化出新的学科。神经免疫内分泌学(neuroimmunoendocrinology)的形成和建立即是如此。此学科横跨神经、免疫和内分泌等三大系统,集中探讨系统间的多重往返联系及其生理或病理意义,着重研究系统间的信息交流和影响因素。本章拟简述神经免疫内分泌学的历史发展,神经、免疫和内分泌网络的理论基础和实验依据,神 ...

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 免疫网络学说及其在医海陆空中的应用

第九章 免疫网络学说及其在医海陆空中的应用   1974年,Jerne根据现代免疫学对抗体分子独特型的认识,在Burnet“克隆选择学说”的基础上提出了著名的免疫网络学说(immune network theory)。该学说认为,任何抗体分子或淋巴细胞的抗原受体上都存在着独特型,它们可被机体内另一些淋巴细胞识别而刺激诱发产生抗独特型。以独特型同抗独待型的相互识别为基因,免疫系统内构成“网络”联系,在免疫调节中起重要作用。Jerne ...

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