一、拟和曲线 打开EXCEL软件;在工作表中 输入第一行: 浓度值, 如0 10 50 100 400 输入第二行:该浓度下的调整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42 选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线 ...
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 一、原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗 ...
Q:1.要测定打疫苗三次的抗体的变化,当ELISA标化后,是不是要用同一个抗原的包被浓度,同一个血清的稀释度,然后看OD值的变化?实验动物有多个,实验数据又如何处理呢? A:nanwxd网友观点: 关于是不是要用同一个抗原的包被浓度,同一个血清的稀释度,然后看OD值的变化? 这是肯定的ELISA做得很好的话批间CV都要有10~15%左右,最好用同一个抗原,但对于包被的抗原浓度对OD的影响不是很大, ...
ELISA即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。ELISA的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标 抗原(或抗体),而且 ...
按照卫生部《全国艾滋病检测工作管理办法》要求,中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室于2007年8月7日至9月14日组织了本年度全国HIV抗体诊断试剂临床质量评估,现将评估情况报告如下: 一、参评实验室 参加本次试剂评估工作的有艾滋病参比实验室和9个省级疾控中心的艾滋病确证中心实验室,包括安徽、北京、广东、广西、贵州、河南、湖南、四川、新疆。评估工作由同一批技术人员、使用同一批设备在 ...
A. DAY 1 PROCEDURE •ABSORPTION OF THE POLYCLONAL AND PREIMMUNE SERUM The Goat Anti-Mouse (GAM) NGF polyclonal antibody recognizes 2.5B NGF and the Goat IgG (GIG) preimmune serum serves as a ...
A. Abstract This protocol can be used for detection of gangliosides.Spicific antibodies to gangliosides are added to cells and allowed to bind to the cell surface. The nonbound antibody is washed away ...
This modification of qualitative ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) is used for either screening detection of anti-platelet antibodies or for detection of platelet-associated Ig (PAIg) (shown h ...
The ELISA protocols for detection of the antibody binding to an antigen-coated microtitre plate are standard laboratory techniques and will not be described here. We will just mention that most recomb ...
A.Materials 1.NUNC-Immuno Plate IIF. 2.Horseradish Peroxidase-Streptavidin (Zymed; 43-4323) 3.PBS or Balanced Salt Solution (BSS). Do not use RPMI or any medium that contains bioti ...
The indirect ELISA is used primarily to determine the strength and/or amount of antibody response in a sample whether it is from the serum of an immunized animal or the cell supernatant from growing h ...
1. Reagents Sodium Borohydride (NaBH4) - 1 mg/mlCarbonate:Bicarbonate Buffer pH 9.6 Sodium Periodate (NaIO4) - 1 mM 2.14 mg/10 ml Acetate Buffer 10mM Acetate Buffer pH 4.50.82 g sodium acetate in 90 m ...
A. Reagents PBS PBS:0.1% BSA:0.05% Tween 20 (PBT) PBS:2% BSA 10X Substrate Buffer pH 6.036.6 g Citric Acid monoh ...
孕酮的放射免疫测定法很敏感,但由于孕酮是半抗原,须先同牛血清白蛋白结合,才能注射于家兔,使之产生抗体。牛血清白蛋白结合在孕酮上的不完全部位对抗血清的特异性有很大关系,若结合在C3抗血清无特异性,结合在C6则特异性高,结合在Cll特异性更好。孕酮试剂盒已广泛应用于临床,介绍如下。 一、基本原理 此法采用双抗体放射免疫法 Ag※+Ab+Abl一(Ag※Abl)+(AgAbI)+Ag※ 含孕 ...
肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一类能直接导致某些肿瘤细胞坏死的细胞因子,有TNF-α与TNF-β两种类型。 TNF-α主要来源于活化的单核/巨噬细胞,TNF-β主要来源于活化的T淋巴细胞。虽然两型TNF的细胞来源不同,结构也不同,但均能与不同的受体结合,故具有极其相似的生物学活性。TNF可进入体液成为分泌型(或可溶性 ...
一、原理 HCG是放射性同位素标记技术与抗原抗体免疫反应相结合的超微量分析法,是用放射性核素(如125I/3H)标记的极微量的示踪抗原(Aundefined)/抗体(Aundefined)与待测抗原Ag/抗体Ag)一起来竞争结合有限的特异性抗体(Ab)/抗原(Ag),故称饱和分析或竞争抑制法,其反应过程为:Aundefined•Ab量固定,.Aundefined+Ag>Ab可结合的数目(抗原过量),Aundefined与Ag竞争结合Ab,直到反应 ...
一 、标准管 待测管01020408016012 试管号1,23,45,67,89,1011,1213,1415,16 标准品(不同浓度)100100100100100100 待测血清100100 抗血清(二抗)100100100100100100100100 分析试剂100100100100100100100100 混匀,37℃温育2h 125I-胰岛素100100100100100100100 ...
一、放射免疫标记技术 放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合,以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法,由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物质,特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少、测定方法易规范化和自动化等多个优点。因此、在医学及其他生物学科的研究领域和临床实验诊断中广泛应用于各 ...
造成误差的可能来源有以下几个方面: 一、各种仪器:设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。 如:①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收,本底校正,测定时间,可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。④由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因 ...
放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和Berson创立,并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破,开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测定的极微量而又具有重要生物学意义的物质得以精确定量,从而为进一步揭开生命奥秘打开了一条新的道路,使人们有可能 ...