免疫测定(immunoassay,IA)是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的方法。基于抗原抗体反应的特异性和敏感性,免疫测定的应用范围遍及医学检验的各个领域。任何物质只要能获得相应的特异性抗体,即可用免疫测定进行检测。可测定的对象包括:具有免疫活性的免疫球蛋白、补体、细胞因子等;微生物的抗原和相应的抗体;血液凝固因子;以及临床化学测定中微量而难于分离的物质,如蛋白质、同工酶、激素、药物、毒品等。 ...
生物素-亲合素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。1979年Guesdon利用生物素和亲合素间具有高度亲合力的特点,建立了标记亲合素和生物素法(LAB/BA)与桥联亲合素—生物素技术(BRAB)。1981年Hsu首次报告了改进的亲合素&mdash ...
HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比,也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素 ...
均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。测定时将待测样品、酶标记物、特异性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行。依据实验原理可分为竞争结合法和非竞争结合法两种类型。 1、酶扩大免疫测定技术 ...
均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。测定时将待测样品、酶标记物、特异性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行。依据实验原理可分为竞争结合法和非竞争结合法两种类型。 1、酶扩大免疫测定技术 ...
酶免疫分析(Enzyme ImmunoassayEIA)是标记免疫分析中的一项重要技术是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一酶免疫技术在检验医学中得到广泛应用并不断得到更新,不断和其他先进技术如荧光、发光技术以及仪器自动化相融合,日臻完善许多自动化仪器实际上是EIA技术和其他现代化技术的复合 ...
内容提要: 乙型肝炎核心抗体定性检测操作规程乙型肝炎核心抗体定量检测操作规程乙型肝炎表面抗原定性检测操作规程乙型肝炎表面抗体定量检测操作规程乙型肝炎IgM核心抗体定量检测操作规程 乙型肝炎e抗原定性检测操作规程乙肝表面抗原检测标准化操作乙肝表面抗体检测标准化操作乙肝E抗原检测标准化操作 ...
内容简介: We developed a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to analyze brevetoxinsusing goat anti-brevetoxin antibodies obtained after immunization with keyhole limpet hemocyanin-brevet ...
内容提要: 一、ELISA 标准操作要点 1、 标本的采取和保存 2、加样 3、保温 4、洗涤 5、 显色和比色 二、本底及假阳性产生的原因分析 1、 基因工程抗原与合成肽抗原的区别 2、假阳性本底产生的原因 三、cut off 值附近血清的处理 1、cut off 值附近的值是客观存在的 2、怎样对待cutoff 值附近的血清 ...
文件简介: 点击下面的链接查看全文: ...
文件预览: 点击下面的链接查看全文: ELISA II.ppt ...
Table of Contents 1、 Introduction - What’s an ELISA? 2、 Assay Formats - What are my choices? 3、 How to Choose an Assay Format - I know what I want to measure. What do I do? 4、 Factors to Consid ...
1. ELISA的原理 2. ELISA的类型 3. 试剂准备: 免疫吸附剂 结合物 酶底物的准备 4. 对照设定 5. 标本的采取和保存 6. 结果判断 ...
一、用途 本试剂盒用于定量检测大鼠血清中的IL-6的浓度。 二、原理 本试剂盒采用双抗夹心ELISA法。抗大鼠IL-6单抗包被于酶标板上,大鼠标本中的IL-6会与单抗结合。加入生物素化的抗大鼠IL-6(二抗),它将与结合在单抗上的大鼠IL-6结合而形成免疫复合物,未结合的将被洗去。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 将与二抗的生物素结合,多余的物质会被洗掉。加入TMB显色。大鼠IL-6的 ...
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低。。。。。。自己也为此苦恼过很长一段时间,随着自己技术水平得提高,或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做 ...
许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题,标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败,那么究竟如何绘制或制作标准曲线呢? 一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意: 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验 ...
一、基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗 ...
近年来,疯牛病、瘦肉精事件的连续发生,人们震惊之余发现饲料在某种条件下不仅构成了对动物和人类健康的严重威胁,而且造成了意想不到的经济损失和巨大的政治影响。饲料安全作为食品安全中的一个源头环节,成了上至国际组织、政府部门,下至平民百姓,各个层面广泛关注的热点问题。世界上很多国家及非政府组织都积极加人了饲料、食品安全控制行列。各个国家与地区也都加大力度强化相关的组织机构,制定一系列的法律法规,如美国、 ...
国内目前做肝癌检测试剂盒的公司很多,多数选择AFP.CEA.血清γ—GTⅡ但是这些检测项目和肝癌的相关性不是很高,目前还需要新的,特异性的标志物的出现! 1. AFP AFP是当前诊断肝细胞癌最特异的标志物。AFP是胎儿时期肝脏合成的一种胚胎蛋白,当成人肝细胞恶变后又可重新获得这一功能。由于孕妇、新生儿及睾丸或卵巢的生殖腺胚胎癌亦可出现,入AFP对肝细胞肝癌仅有相对特异的诊 ...
临床检验常见的标本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。 一、血液标本 有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。 1、外周血 一般选取左手无名指内 ...