免疫检测分析

你制作的胶体金试纸保质期有多长，1年，2年?难道我要将试纸放置两年以后才知道质量是否过关? 为了解决保质期的问题，我们设计了将试纸放置于高温环境下烘烤的加速老化试验。然而这个实验到目前为止都没有明确的技术资料，大多数文献资料里面只有"37度2个月=常温下2年"，"45度一个 ...

1、Q：金标试纸条包被单抗，检测线上包被多抗来检测抗原是否可行呢，用饱和硫酸铵纯化多抗能达到要求吗？A：多抗不是很合适，有条件还是多用单抗。确实要用，多抗一般要过纯化柱纯化，以提高抗体的特异性。 2、Q：我需要流速为１３５s的ＮＣ膜，可厂家都是孔径，而且０.４５微米的多，请问大家我的应该买多大孔径的？A：ＮＣ膜大都是以每4cm膜水的层析流速多少秒来定义孔径的，根据流速的快慢常用的有90，120，1 ...

近日有许多朋友询问胶体金试纸如何记录和分析试验结果，每次试验面对的都是使用肉眼判断条带颜色深浅，不同的人对结果的判断都不相同，容易出现误判，平行试验结果无法对比。且试验结果无法直接记录，不能留下有说服力的试验结果证明，就这个问题，我将谈我的一些看法。以下讨论仅针对普通胶体金试纸，荧光，化学发光，磁粒子等特殊标记物必然需要读条仪器。 一、现状 很多学术论文中对胶体金试验的结果记录通常是罗列简单的阴性 ...

序 胶体金快速诊断试剂是近年来的生物产业化最成功的产品之一，现在很多生物学者纷纷抛弃分子基因等艰涩的基础性理论研究，而转向该应用领域，利用自己实验室的设施人员开始开发胶体金快速诊断产品，为自己在创业初期淘得第一桶金。 我在该行业工作了比较长的一段时间，和很多的同行都有过接触，在此写一点自己对该行业的感受。个人观点不对之处，希望ＤＸ指正。 前言 目前生物领域内基本上是以研究为目的的基础理论工作。能顺 ...

1、标记时pH对标记的影响。 根据标记物的性质，可以将标记物划分为三类。 其一为pH非依赖型，即标记时无论pH如何，您都能得到良好的标记结果，前提是您不能破坏胶体金的胶体状态。此类标记物仅仅是通过疏水相互作用与胶体金相结合，如PEG.这也是调节pH时首先要采用PEG保护电极的原因，当然，如果您使用的是充胶的电极，那您就不必这样麻烦了。呵呵，真希望所有的标记物都象P ...

斑点免疫渗滤试验的基本原理是：以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的，应用的结合物是酶标记的，称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验（dotymmunogoldfiltrationassay，DIGFA），又名滴金免疫测定法（简 ...

目的：比较TRFIA与ELISA两种方法对HBVM检测的结果，并对其进行分析，了解TRFIA法测定HBVM的准确性及可行性。方法：对102例就诊患者的血清标本同时采用TRFIA和ELISA两种方法检测乙肝标志物。结果：两种检测方法对HBVM的结果比较差异无显著性(P>0．05)。但就乙肝患者检测的医学模式来讲，以TRFIA法的结果为标准，与ELISA法比较有所差别，其中HBsAgHBcAb阳性模式者有显著差异(P<0．05)，其他医学模式均无差异。结论：TRFIA对HBVM的检出率高于ELISA，能够弥补ELISA法因灵敏度相对较低所引起的假阴性，TRFIA作为一种高灵敏度的方法，可为临床诊断、疗效观察、及乙肝疫苗的接种提供依据。

信号放大时间分辨荧光分析技术是一种新型的超微量的标记分析技术。它是以生物信号放大为基础，以镧系元素螯合物为标记物，以时间分辨和波长分辨为测量方法，充分利用了酶标记分析和PCR扩增等分析技术优点的技术。它的独特优点是非同位素和超灵敏度。本综述介绍了TRFA的特点以及酶放大、二次酶放大、铕纳米颗粒、滚动循环放大、免疫PCR和荧光淬灭分析等信号放大时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用。信号放大时间分辨荧光分析技术在生物分析中极其广泛的应用，显示出具有很好的发展前景。

荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，FPIA)是一种定量免疫分析技术，其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后，吸收光能跃入激发态，随后回复至基态，并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关，与其(受激发时)转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质，常用于药物、激素 ...

【关键词】雌二醇 雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，为防止儿童性早熟等问题，食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显变化，所以它可以取代酶标记抗体〔1，2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定 ...

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原；胶体金免疫层析法Gold-immunochromatography 【摘要】目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs)，制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤 ...

摘要：目的建立快速测定抗子宫内膜抗体（EMAb）的新方法。方法采用经Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（EMAg），以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫胶体金技术原理，建立斑点免疫渗滤法（DIGFA）检测人血清EMAb.共检测500份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果纯化的人子宫内膜抗原与患者血清 ...

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种高效广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康，能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病，低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。欧盟、美国等许多国家已明确禁止CAP用于生产动物源性食品，并制定了严格的限量标准。加入WTO后，农、兽药残留日益成为各发达国家限制 ...

摘要：免疫胶体金技术是20世纪80年代发展起来的一种新型免疫标记技术，应用该技术制成的胶体金试纸条具有简便、快速、灵敏、特异性高等优点。文章介绍了胶体金技术的基本原理、制备方法、胶体金技术的特点以及利用该技术制成的胶体金试纸条在兽医临床上的应用。 关键词：胶体金；兽医临床；应用 免疫胶体金技术在人类医学上是一种常用的免疫标记技术，有其独特的优点。近几年来在生物医 ...

单位：湖北医科大学病毒所临床病毒室，武汉430071 关键词：包埋前免疫胶体金技术；免疫电镜；I型单纯疱疹病毒；病毒抗原 摘要目的：探讨细胞内病毒抗原的超微定位的方法。方法：采用包埋前免疫胶体金方法标记I型单纯疱疹病毒(HSV-1)抗原以研究该病毒在人胚肺细胞(HEL)内的超微定位。结果：发现金颗粒约为5nm，大小均一，在HSV-1囊膜、内质网膜表面 ...

一、方法 1、H.pylori配体固相硝酸纤维素膜的制备 H.pylor抗原室温融化后，12000r/min离心10min，取上清2mg/ml用0.01mol/L的PB缓冲液（pH7.2）以250μg/ml间隔，经BIO-DOT型XYZ3000点样仪dispenser线形包被于硝酸纤维素膜的观察结果的测试反应区，定义为检测带（T），距离检测带5mm远的质控带（C）用d ...

作者：韩锋产阎小君侯瑜肖乐义郭晏海苏成芝 单位：中国人民解放军第四军医大学全军基因诊断技术研究所陕西省西安市710033 关键词：螺杆菌，幽门；细胞毒素相关蛋白A/分析；胶体金；免疫层析；抗体/分析 摘要目的建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相 ...

PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性，PAg复合物分子最小易于穿透组织。PAg复合物的原液在4℃可保存达一年之久。电镜水平的PAg染色法PAg法在电镜技术的应用原则是二步标记法 ...

前段时间写过一个胶体金的市场情况，考虑到丁香园里做研究或者研发的战友会比较多一些，结合自己的研发经验，写一些相关的东西。 一、做胶体金研究好出论文吗？ 相对分子生物学的微观研究，胶体金出论文的难度似乎很大，总觉得一个研究做下来，就是出线与不出线，没什么可以写。为什么？ 首先，胶体金研究偏向生物技术应用研究，而分子生物学目前阶段还是停留在理论研究。所以你可以通过一些色带、测序结果等告诉别 ...

硝酸纤维素膜又称为NC膜，在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。所以NC膜成为该试验中最重要的耗材，而由于其属于非标准器件，基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题。同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论。 一、NC膜的生产原理 这个虽然看上去属于生产厂商的事情，但是GMP有个观点是强调对过程的控制才会有好的 ...