实验动物免疫方案:1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)。
猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)是正粘病毒科单股负链RNA病毒, 引起猪群发生严重的呼吸系统 疾病, 给养猪业造成很大的经济损失。而且, 猪是人流感病毒和禽流感病毒发生重组的‘混合器,’, 因此, 研究猪流感 病毒对于搞清人流感病毒和禽流感病毒的变异, 致病机理、流感的预防和控治都有重要的意义。
杂交瘤细胞的制备
单克隆抗体有交叉反应是由于不同的抗原上有完全相同的表位(100%的交叉反应),或有相似的表位(不同程度的交叉反应)。
标记免疫技术是将某种可微量测定或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物,加入到抗原-抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应,以检测标记物的有无及含量来间接反映样品中待检抗原或抗体的存在与多少。 ...
These are basically Tim's procedures and have been used successfully by numerous members of our lab and by others around us。 一、Checking Peptide Thiol Groups Do this before thiol coupling either to K ...
一、Required Materials and Equipment 1、Protein A or G agarose gel column (10 ml or 5 ml of packed beads; see guidelines below for choice of protein A or protein G) 2、Ice-cold Tris-buffered saline (TBS) ...
一、Materials 1、Antibody 7E3 2L sup grown in flasks frozen and thawed overnight. 2、BioRad Affi-Gel Protein A MAPS II Buffers cat. #1530-6160 ($161.00) 3、50 mM Tris pH7.8 4、40 g ammonium sulfate for e ...
1、use 2 mg of antibody per ml wet beads (use appropriate antibody/protein A or G combination) 2、mix antibodies with beads and bind at room temperature for at least 1 hr (on roller) 3、wash the beads tw ...
This protocol includes an ammonium sulfate cut affigel blue chromatography and affinity chromatography. 一、Solutions 1、Affigel Blue Prewash 0.1 M acetic acid 5.7 ml glacial acetic acid 1.4 M NaCl 81 g ...
一、Reagent and Materials 1、Hi-Trap Protein G Column (Pharmacia Biotech #17-0404-01) 2、20 mM Sodium Phosphate Buffer pH 7.0 1.084 g NaH2PO4 anhydrous 3.273 g Na2HPO4.7H2O q.s. to 1 liter with di-H2O ...
一、Conjugation of carrier (BSA) to peptide 1、Dissolve pure BSA 20mg/ml in 10mM phosphate pH 7.0. 2、Dissolve MBS-SMCC 25mg/ml in NNdimethylformamide. 3、Mix 20ml SMCC and 200ml BSA (500mg:4000mg or 1:8) ...
一、Reagents 1、Affi-gel Protein-A Agarose (BioRad #153-6153) 2、MAPS II Binding Buffer (BioRad # 153-6161) 3、0.314 g/ml diH2O 4、MAPS II Elution Buffer (BioRad #153-6162) 5、0.023 g/ml diH2O 6、MAPS II Re ...
Fusion is an important procedure to produce monoclonal antibodies (MoAb). 一、PROTOCOL 1、prepare the culture of myeloma cells and maintain the concentration of the cells at the level of less than 10^6 c ...
【摘要】目的 探讨嵌合抗CD20抗体Fab’片段的抗肿瘤机制。方法 应用MTT法检测Fab’片段对Raji细胞生长的抑制作用,用Annexin V-FITC和PI测定Fab’片段对Raji细胞凋亡的诱导作用,用RT-PCR和Western blot检测Raji细胞中bcl-2表达的变化。结果 嵌合抗CD20Fab’片段对Raji细胞具有明显的抑制作用 ...
血管新生(angiogenesis)是一个受严格调控的多步骤过程,导致从已存在的脉管系统形成新的血管,对肿瘤的生长及转移,均是必需的。通过抑制新血管生成,中断肿瘤的营养供给,达到治疗目的,它代表了近年来一种治疗肿瘤及其它与病理性血管生成有关的人类疾病的新策略。 血管内皮生长因子(VEGF)作为内皮细胞特异性的促分裂原是其重要的正调节因子,其生物活性被两种高亲和力的酪氨酸激酶受体,即Flt-1(VE ...
一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位点可供外源序列插入,即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋白质融合到PIII的N端时,噬菌体仍有感染性,但若融合到后一位点则会切去N端而丧失感染性,这 ...
【摘要】为了研究嵌合抗CD20基因工程抗体Fab的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制,本研究利用3H掺入法测定嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞生长的影响,结果显示嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞的生长具有抑制作用;利用流式细胞仪测定嵌合抗CD20 Fab诱导Raji细胞凋亡作用,结果显示嵌合抗CD20 Fab可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD20 Fab通过诱导Raji细胞凋亡的 ...
摘要:应用单克隆抗体技术抗肿瘤的导向治疗是恶性肿瘤的生物治疗方法之一。本文先介绍了单克隆抗体的特点和构型及研究现状,而后从非结合型单抗、单克隆抗体偶联物(包括化学免疫偶联物、放射免疫偶联物、免疫毒素、抗体导向酶-前体药物疗法)和其它(抗体-细胞因子融合蛋白、微型双特异性抗体)等几方面分别介绍了抗肿瘤导向治疗研究进展,并对未来提出了展望和指出了今后的研究方向。 自从1975年Kohler和Milst ...
本文已发表于中国肿瘤生物治疗杂志.2003,10(3):221-222. 【摘要】表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor EGFR)是原癌基因c-erb-B1的表达产物。其过表达和突变体均与肿瘤发生发展有密切关系,基于此优点成为目前肿瘤治疗的新靶点。本文就EGFR与肿瘤的关系及其单抗治疗肿瘤的进展作一综述。 【关键词】表皮生长因子受体(EG ...