►仪器使用和调校 1.打开电源开关(在仪器的后方)将仪器预热半小时左右。 2.把被测样品装入样品瓶中,然后放入仪器,盖好遮光罩,这时显示读数即是被测样品的浊度值,单位为NTU浊度单位。 3.若发觉仪器的数值,偏差出所允许的范围或两次定期校正间隔时间超过六个月,则应该对仪器重新校对。 4.校正仪器时,根据《零浊度水的制备》、《Formazi ...
测厚仪的工作原理是使一束自然光经起偏器变成线偏振光,再经 1/4 波长片,使它变成椭圆偏振光入射在待测的膜面上。反射时,光的偏振状态将发生变化。通过检测这种变化,便可以推算出待测膜面的某些光学参数。 《SGC-2型自动椭圆偏振测厚仪使用说明书》包括的内容有: 一、规格与主要技术指标; 二、仪器的原理和结构; 三、仪器的安装; 四、仪器校正; 五、仪器的使用和测量方法; 六、注意事项; ...
This protocol is designed to allow the use of 96-well trays (8x12 microtiter tray format) and multi-channel devices from the initial inoculation step to the final cycle sequence reaction. It wil ...
MATERIALS: 2-glass plates 1 sharks -tooth comb and spacers Whatman 3 mm paper 30 or 40% acrylamide-bis (19:1) 10X TBE urea 10% ammonium persulfate TEM ...
测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板,合 ...
DGGE,CGGE及TGGE三种方法是基于相同的原理而设计的突变检测方法,它仍均是根据DNA的解链特性而设计.对于同一定序列组成或的DNA片段来说,它具有恒定的解链温度(Tm),但若其序列发生改变时,Tm值亦发生改变,在含有变性因素(变性剂, 高温)的凝胶半进行电泳,当其比链解开形成分叉时,电泳迁移的速度就会改变.Tm值 全要取决于DNA的碱基组成,序列中出现单碱基替换时,Tm亦发生 ...
大片段DNA的测序: 通过鸟枪法 (Shot Gun Sequencing) 测序 鸟枪法测序的操作方法 1. 用限制酶切下目的片段的大片段Insert DNA 并用Agarose凝胶电泳进行回收。 2. 对回收的大片段DNA用物理方法 (如超声波等) 进行切断处理,然后用T4 DNA Polymerase对小片段 DNA进行末端平滑化。 3. 进行Agarose电泳,切胶回收1 kbp ~ 2 ...
DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答:溶解DNA测序样品时用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后在进行了测序反应时DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在溶解DNA测序样品时使用TE Buffer。的确,TE Buffer能增加DNA样品保存期间的稳定性, 但TE Bu ...
一. 实验目的 1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程 2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术 3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。 二. 实验原理 1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组 ...
序列测定的技术和策略 Sanger双脱氧链终止法、Maxam-Gilbert DNA化学降解法测序策略 目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一 ...
生物医学领域的一个重要研究课题是解释为何拥有完全相同DNA的细胞会分化成不同的功能细胞。美国的一支联合研究小组近日发现,环绕DNA的染色质蛋白在这一过程中扮演了重要角色。《自然》网站7月1日预先发表了相关论文。 染色质蛋白的功能不仅仅限于包裹基因物质,它们可以影响DNA双螺旋的各个部分的打开和关闭状态,从而进一步影响基因的开合状态。为了破解染色质蛋白质的指令之谜,需要精确测定各个染色质蛋白在DN ...
DNA序列测定是分子生物学领域最重要的技术之一,是了解基因结构和功能的基础。DNA测序技术的不断完善和仪器自动化程度的不断提高,为大型基因组测序奠定了基础,当今大多数蛋白质序列都是通过基因或cDNA的核苷酸序列推导出来的。DNA测序方法主要有双脱氧链终止法(Sanger法)和化学降解法(Maxam-Gilbert法)。目前不管是传统的手工测序法,还是仪器自动测序法均使用前者,而仪器自动测序法以其快 ...
在过去的几年中,许多生物的基因组完成了测序工作,如何对如此庞大的原始序列信息进行分析和应用,正是现在最为棘手的问题。大量的基因预测软件和在线工具应运而生。如何广泛而深入地了解并能有的放矢地利用这些工具,已经成为21世纪分子生物学家的必修课。 随着大规模EST和cDNA序列信息的获取,那些基于表达序列同源范围的程序,在基因组注释中的作用日益显著。即使在稀少基因或组织特异性表达的基因中,基因组序列的相 ...
研究蛋白质芯片的意义: 1、蛋白质是基因表达的最终产物,接近生命活动的物质层面; 2、探针蛋白特异性高、亲和力强 可简化样品前处理,甚至可直接利用生物材料(血样、尿样、细胞及组织等)进行检测; 3、适合高通量筛选与靶蛋白作用的化合物; 4、有助于了解药物或毒物与其效应相关蛋白质的相互作用。 蛋白质芯片的分类: 1、蛋白质检测芯片; 2、蛋白质功能芯片。 蛋白质芯片的制备: 1、固相载体及其处理 载 ...
1. GenBank属于一个序列数据库的国际合作组织,包括EMBL和DDBJ。是NIH遗传序列数据库,一个所有可以公开获得的DNA序列的注释过的收集。GenBank同日本和欧洲分子生物学实验室的DNA数据库共同构成了国际核酸序列数据库合作。唯一人类基因序列集合(UniGene),人类基因组基因图谱,分类学浏览器,同国立癌症研究所合作的癌症基因组剖析计划(CGAP)等数据库。GenBank以指数形式 ...
编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。 交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合,再加入被检测物(可以是血清中的抗原、抗体或酶等,也可以是PCR产物)。 悬液中的微球与被检测 ...
产品详细描述 ProteinChip SELDI系统用于从大量复杂生物学样品中快速获得蛋白质分子量图谱,发现Biomarker。它使用表面增强的激光解吸离子(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization)技术来捕获、检测和测量复杂生物样品中的肽段和蛋白质的分子量。 蛋白质芯片所独特拥有的化学修饰表面使得该技术能够与其他基于分子量的分析系统相区别。SEL ...
一、试剂 1. TRIzol 2. 异丙醇 3. 氯仿 4. 75%乙醇(RNase-free) 5. Milli-Q水(RNase-free) 6. 无水乙醇 7. dNTPs 8. Cy5-dCTP和Cy3-dCTP 9. 杂交试剂1 10. 标记试剂I 11. 杂交试剂2 12. 标记试剂II 13. 反转录酶 14. 标记试剂III 15. 反转录引物 16. ...
管盖基因芯片是将基因探针固定在特制的管盖内表面,与内置杂交贮液池的Eppendorf管一起构建的基因检测器件。在一个全封闭的管内,完成基因扩增,荧光标记,芯片杂交及检测等一系列生物化学操作,实现多基因高通量并行检测。本文报道了一种用于管盖基因芯片的检测分析系统,它包括光学检测平台、图像采集系统、图像分析系统及结果报告系统。光学检测平台利用尼康显微镜光学系统,通过电荷耦合器件(CCD)的进行图像采集 ...
目前微流控芯片主要采用激光诱导荧光作为检测器。此检测器具有较强的专一性,检测灵敏度高,但是通常需要对样品进行衍生。紫外检测器是通用型检测器,也是液相色谱和毛细管电泳中普遍应用的检测器。然而,在微流控芯片中大多采用的玻璃和PMMA在紫外区都有吸收,因此只能采用成本较高的石英基质芯片。日本的岛津公司研制出采用石英芯片、紫外检测的MCE-2010型微芯片电泳系统,由于石英芯片上带4个电极并与光学狭缝一体 ...