实验仪器使用技术

有关膈淋巴系统的分布和结构，目前仅有少量的文献报道，而且多数的实验结果为来自鼠类，迄今为止，对家兔膈淋巴系统的系统研究尚未见有报道。搞清膈淋巴系统的分布和结构可为研究腹膜腔内物质的转运机制提供形态学资料。我们采用自行研制合成的一种水溶性淋巴管铸型剂（合成树脂三元共聚体的乳状溶液，共聚体含量占50%），用扫描电镜淋巴管铸型技术对家兔膈淋巴管的三维结构进行了研究。 材料和方法 一、标本 家兔58只，平 ...

专家姓名：宁进，男 　　单位：Leica公司　　职称：高级工程师 　　主讲内容：显微镜和图像处理　　讲课形式：专家答疑　　其主要围绕以下几点进行答疑：　　1.常规显微镜的原理及应用　　2.荧光显微镜的原理及应用　　3.激光共聚焦显微镜的原理及应用　　4.图像采集、处理、分析的原理及应用 1.【清风笑】请教：CCD的类型，以及市场上常见的型号、厂家和价格？Metor II型号属于什么档次的采集卡？ ...

chujun_hust：我现在已经筛选出高表达EGFP的细胞，我想测量细胞数量与GFP荧光强度的相互关系，我设计了一个方案：把不同个数的细胞接种到96孔板中（比如1X102～1X105个/ml），然后只利用倒置荧光显微镜测量出每孔的总荧光强度，不知道能不能测出来啊？？？？？不知道怎么测啊？或者有没有其它好方法啊？ schoman：还是用流式来测吧，比荧光显微镜方便，结果好。流式现在到处都是，而且又 ...

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低， 传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构） 产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源，在荧光标记标本的焦 ...

激光扫描共焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM），有时也被称为激光扫描细胞仪（Laser Scanning Cytometer，LSC）是八十年代迅速发展起来的用于分析细胞学的新型仪器。LSCM与普通光学显微镜相比优点明显，分辨率、灵敏度、放大率和荧光检测信噪比大大提高。对活细胞可以做分层扫描后，进行三维重建和测量分析，对细胞内微细结构的动态变化 ...

yszwyd117：在2003年的一篇综述中侯春林提到显微外科未来的发展方向是应用超级显微镜，请各位高手指教：何谓超级显微镜？如何界定？应用范围？是否就是神经外科的那一种？ whoami：侯春林那篇文章主要是讲显微外科与皮瓣的。超级显微镜提了一下，是指先进的光学成像设备。超级显徽外科技术具有三个显著的特点。　　①使用更精细的显徽手术器械。　　②发挥更高超的显徽操作技能。　　③完成更细小的显徽血管吻 ...

火流：偏振光显微镜和相差显微镜是不是一种东西？ goooogle：偏光一般用在看矿石，晶体等非生物样品上，在生物学领域用的很少。相差是一种增加对比度的方法。可以在不染色的情况下看到活体细胞。 goooogle：显微镜哪个牌子好？ Fang CY：当然是日本的OLYMPUS了，不过价钱也很好了。 JianH：功能最多、质量最佳的是德国莱卡，但价格最高；最便宜的是日本OLYMPUS，质量居中；价格合 ...

激光扫描共聚焦显微镜（Laser scanning Confocal Microscopy ，简称LSCM）是近代生物医学图像仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图像处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。已广泛应用于细胞生物学、生理学 ...

显微镜按工作媒介可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。本编介绍这两类显微镜的工作原理和适用的样品制作方法。 第一节 光学显微镜工作原理 1.1 人眼睛的分辨率 人的眼睛是目视光学仪器的最终接收器，这里仅研究与我们有关的内容人眼睛的分辨率。眼睛能分辨开两个很靠近点的能力称为“眼睛分辨率”，这与眼睛的结构有关。以下从三个方面来讨论人 ...

显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 —、光学显微镜 （一）、普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图 ...

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Introductory Concepts When specimens living or non-living organic or inorganic absorb and subsequently re-radiate light we describe the process as photoluminescence. If the light emission persists for ...

共聚焦显微镜的优势： 1、高分辨率 16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光，共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及，这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。 2、断层扫描 共聚焦采取电动马达自动控制步距，使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴上成像的XZt、YZt的操作变得简单易行。而且断层扫描的优势明白人一想就 ...

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展 科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低，传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构（细胞或亚细胞结构）产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像不够清晰。激光共聚焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源，在荧光标记标本的焦平面 ...

自七十年代出现第一代流式细胞仪以来，随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展，现代流式细胞仪已今非昔比，制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。 流式细胞仪生产厂商推出各种不同型号的流式细胞仪来满足用户的不同需要。现生产流式细胞的厂商全球至少有六家，各厂商产品又有不同的系列，各具特点。如何从众多的型号中挑选出最适合自己的机型，我们还需从分析应用出发，评估自己的需求来决定什么样的 ...

一、流式细胞仪的检测范围 1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、R NA 含量、蛋白质含量。 2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。 二、流式细胞仪的临床应用 1．流式细胞术在肿瘤学中的应用：流式细胞术可以检测肿瘤细胞增殖周期、检测肿瘤细胞 ...

流式细胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒，测量其产生的散射光和发射荧光的强度，从而对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术，它具有如下几个特点： ①标本只要是单细胞即可用于分析，如血液、骨髓、体液中的细胞、培养细胞等，实体组织只要经处理后制成单细胞悬液也 ...

流式细胞术（Flow Cytometry）是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性（细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等）进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理，同时利用荧光染料，激光技术，单抗技术以及计算机技术的发展，大大提高了检测速度与统计精确性，而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数，为生物医学与临床检 ...

1 高效液相色谱仪的系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相） 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器 ...

(一) 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液 4.柱污染 每天冲洗柱 5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相 6.柱快达到寿命 采用保护柱 (二) 保留时间缩短 1.流速增加 检查泵，重新设定流速 2.样品超载 降低样品量 3.键合相流失 流动相pH值保持在3~7.5，检查柱的 ...