遗传学实验技术

相关专题 今年6月22日，对我国体细胞克隆技术发展产生重大影响的世界首批成年体细胞克隆山羊“阳阳”(深色)，在西北农林科技大学种羊场度过了13岁生日。 2000年，克隆山羊“阳阳”诞生。当时，克隆技术在中国受到热捧，相关研究如火如荼。而如今，克隆技术正在中国陷入沉寂。 在不久前上映的美国大片《遗落战境》中，由汤姆·克鲁斯饰演的克隆人在发现 ...

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相关专题 1994年，Kim发明的TRAP由于具有灵敏度高等优点曾被广泛应用于端粒酶的活性检测中，不过安全性不够，现在的端粒酶活性检测实验都在其基础上进行了改良，更显高效和人性化。以下是具体的实验方法： 端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构，端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列，这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列 ...

相关专题 一个完整的基因芯片实验包括以下几个步骤：研究课题的提出、芯片设计、样品制备、杂交反应、数据分析和处理。本文主要介绍其中的样品制备(细胞标本采集和组织标本采集)的建议做法。 细胞标本采集操作建议规程 1. 所有样品均应有样品标签(注明样品编号)，同时有一张样品登记表，写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等。 2. 一张芯 ...

相关专题 原位杂交 1974年Evans首次将染色体显带技术和染色体原位杂交联合应用，提高了定位的准确性。20世纪70年代后期人们开始探讨荧光标记的原位杂交，即FISH技术。1981年Harper成功地将单拷贝的DNA序列定位到G显带标本上，标志着染色体定位技术取得了重要进展。20世纪90年代，随着人类基因组计划的进行，由于绘制高分辨人类基因 ...

相关专题 GenBank数据库功能为：一、提交获取的基因序列；二、查找已知基因的序列生物学特性信息，例如编码区，科学命名等。那么Genebank ID 和Gene cluster ID又是什么呢？ GenBank数据库起源 GenBank数据库是1982年由美国国立生物技术信息中心(NCBI)建立并维护的综合性序列数据库。大约每2个月会更新 ...

相关专题 1、Dicer酶 在RNA干扰研究中会用到Dicer酶，Dicer酶是RNaseIII型家族中的蛋白酶，可特异识别dsRNA，它可以切割以各种方式进入到细胞内的dsRNA，将其切割成19-21bp大小的短RNAs。 Dicer是来自果蝇RNA干扰必须的RNaseIII型蛋白。Dicer酶是RNase III家族中特异识别双链R ...

相关专题 华大基因——全球最大的基因工厂 简介 BGI有一支专业的团队致力于数据库建设和基于Web应用开发。为了使华大基因提供的数据更好地被理解和使用，我们设立了项目介绍、基因组浏览、数据下载和相关问题等网站内容。我们也提供典型的基因组分析服务和相关工具的下载服务. 数据库列表 ...

相关专题 Microarray主要是运用分子杂交原理，通过检测杂交信号的强弱，经过数据处理转化成基因的分度，从而研究基因表达水品的差异。Microarray分为两种即cDNA微阵列(cDNA芯片)和寡聚核苷酸微阵列(Oligo芯片)。 目前在中国市场上的基因芯片主要有三种。cDNA芯片，Oligo芯片，和原位合成芯片。 cDNA芯片的原理是 ...

相关专题 最长听说的是Oligo(dT)，主要是由T(胸腺嘧啶）构成的核苷酸链，其次Oligo引物设计软件，由于其操作的简便性和引物分析设计的功能强大而风靡全球Oligo芯片是微阵列的一种，又称寡核苷酸微阵列。 Oligo(dT) 定义 多聚胸腺嘧啶、T重复寡核苷酸，就是只有胸腺嘧啶组成的核苷酸链。 应用 1.oligo(dT) captu ...

相关专题 从分析的标本中纯化核酸，即制备PCR反应的模板，是使PCR获得成功的重要的第一步。由于PCR的用途各异，用于抽提核酸的起始材料种类可能差异很大(包括新鲜的、储存的和古代的)。每种特殊样品类型有各自的限制和抽提核酸的不同要求，但它们都有一个共同的标准，扩增的灵敏性要求特别注意不同材料、PCR产物、质粒或对照之间可能存在的交叉污染。由 ...

相关专题 纯水和超纯水是分子和细胞实验中常用的实验试剂，不同的实验需要的水的级别是不一样的，常常遇见刚进实验室的同学常有个疑问：纯水和超纯水是一样的么？下文主要讲述了纯水和超纯水区别以及纯水仪和超纯水仪的工作原理。 纯水和超纯水区别 在正确选择实验室超纯水机之前，我们必须很好地了解如下几个概念：什么是纯水?什么是超纯水?二者有何区别? 纯水 ...

相关专题 primer的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的primer和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证primer同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比primer的 Tm低5℃。 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 在PCR自动热循环中，最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示，其变性、退火、延伸的条件是：94℃60s 37℃60s 72℃120s，共25～30个循环，扩增片段500bp。在这里，每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪内由混合液原温度变至所要求温度的时间需要30～6 ...

相关专题 退火温度为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。 在模板变性后温度快速冷却至40℃～ ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ PCR引物设计中的一个重要参数即是熔解温度(Tm)。这是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的Tm低5 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度： Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 复性温度=Tm值-(5～10℃) 在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合， 提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？PCR实验室产品选择指南 将退火时间从 20 秒改为两分钟并未改变扩增效率，但退火温度却是最重要的参数之一。尽管许多基因能在退火温度为 56 ℃ –60 ℃被特异的扩增，我们的经验表明 将退火温度降低 4 ℃ –6 ℃对于在多重 PCR 中扩增出同样的基因是必需的。单独扩增时退火温度为 60 ℃的基因在多重 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 温度梯度PCR是指在退火温度不太明确时，为了找到最优退火温度，在一台PCR仪上同时做多管PCR，每一管放在仪器内不同列(有的是不同行)上，分别进行PCR(如50℃~60℃可以分6管，分别为50，52，54，56，58，60度)，最后看看哪个温度的效果最好。总之是用来进行退火温度优化的。 ...

相关专题 PCR退火温度应如何设置？ 降落PCR是在同一个PCR管内进行PCR，只是每个循环的温度不同(如每个循环降1度)。一般兼并引物用这种方法多些。 设计多循环反应的程序，以使相连循环的退火温度越来越低。由于开始时的退火温度选择为高于估计的Tm值，随着循环的进行，退火温度逐渐降到Tm值，并最终低于这个水平，用于确保第一个引物—模板杂交事件 ...