实验动物技术

按照其贮存状态来分： 试剂有已配好的即用型试剂和需要配制的试剂。前者，如：一些性质较稳定的、或单剂量包装的试剂。像Western中的DAB显色试剂就有现成的可直接用。后者，如：大多数的药物、试剂。当然，要配制的占大部分。按其用途来分，可分为：药物：通常就是我们要考察其药效或机制的化合物或中草药提取物。又可分为原料药和制剂。原料药一般可直接应用。制剂有的要进行提取，有的可直接用。动物模型用试剂：如：造糖尿病的STZ、造肝损伤的 ...

一、CRISPR系统的发现-从细菌的获得性免疫说起CRISPR系统实际是细菌的一种获得性免疫系统。细菌被phage侵染之后，可以获得phage的DNA片段整合进基因组形成记忆，当再次遭到入侵时，从对phage形成免疫。1） 早在1987年，日本人在大肠杆菌中发现有串联间隔重复序列。但一直不清楚功能。后来的研究发现，这种重复序列广泛存在于细菌和古细菌中。2002年才正式命名为CRISPR(Clustered regula ...

一、模式动物随着人类基因组计划的完成和后基因组研究时代的到来，模式生物的研究策略得到了广泛的应用，基因的结构和功能可以在其它合适的生物中去研究，同样人类的生理和病理过程也可以选择合适的生物来模拟，在科研领域，常见的模式动物除开广泛应用的大小鼠外，还有斑马鱼，非洲爪蟾，果蝇，线虫应用最为广泛。由于他们各自独特的优点，被应用于遗传学的研究、发育生物学的基因调控的研究、各类疾病的研究如帕金森氏病、老年痴呆症、药物成瘾和 ...

对药代试验和毒理试验干扰小，加上诱导和复苏均较快，异氟烷已经被普遍使用于各种动物实验中。那么我们如何正确使用异氟烷麻醉动物呢？瑞沃德生命科技为你详细介绍。麻醉机及配件连接示意图麻醉机及配件连接系统异氟烷麻醉操作主要有以下 10 个步骤：1. 仔细检查管路连接是否正确，并确保管路完好、不漏气;2. 拧开麻醉机蒸发器前端的加注密封帽，沿中心的密封螺杆缓慢倒入麻醉剂 (倒药过程见蒸发罐上粘贴的示意图)，并随时观察蒸发器前部的液面标识，务 ...

常用的动物实验有三种麻醉方式，它们分别是：异氟烷气体麻醉、传统吸入式麻醉和传统注射麻醉，而现在医学研究上已经广泛应用异氟烷气体麻醉作为主要动物麻醉方式。那异氟烷气体麻醉与传统吸入式麻醉、传统注射麻醉相比较，有什么区别和优势呢？ 1. 传统吸入式麻醉 传统吸入式麻醉有其优点就是麻醉快, 动物手术后苏醒快, 但其具有更明显的缺点。 1）不适用于麻醉诱导, 尤其是对小鼠, 浓度多大和时间过长, 动物极其易死亡； 2）具有强烈的刺激性气味, 会强烈刺激呼吸道, 促使粘液分 ...

开发实验设计助手的Nathalie Percie Du Sert图片来源：Welcome Trust应该有一种免费在线工具，可以让动物实验设计可视化，并提出重要的反馈，这样可以把科学家从糟糕的研究设计歧路上拉回来。这正是一些软件研发者所希望的目标。过去几年，研究人员在发表的动物研究成果中挑选出大量的设计和报告错误，他们指出这些可能会导致偏见。作为回应，数百家期刊就报道动物研究论文达成自愿性指导规则，形成最佳操作实践清单，如利 ...

还记得 2015 年 12 月份 CFDA 批准进行临床试验两个 1.1 类化药新药吗？ 浙江仙琚制药股份有限公司的奥美克松钠及其注射剂和北京市肿瘤防治研究所的 1.1 类血管生成抑肽及其注射剂。作为这两个新药临床前研发的参与者之一，环特生物的斑马鱼平台在其中发挥了重要作用，听我们说说其中的故事吧！奥美克松钠是由浙江仙琚制药与杭州奥默公司一起研制的治疗神经肌肉阻滞的药物，其申报适应症为在全麻手术中逆转不同浓度罗库溴铵、维库溴铵（这两种药物都是手术中常 ...

迄今为止，文献报道的就有超过 65 个从斑马鱼上筛选出来的小分子（表 1）。这些筛选出来的小分子在斑马鱼上从胚胎形态到心脏和睡眠等都有不同的表型。其中一些是老药新用，一些则是刚刚发现的新型化合物。这里，我们重点关注那些在斑马鱼上发现的有希望揭露不同治疗方法的疾病相关的化合物。 表 1新药研发ProhemaProhema是前列腺素E2（PGE2，PGE2之所以能促进HSC的生产能力与WNT信号通路有关）的一个稳定的衍生物，目前处于 ...

动物手术前的麻醉不仅是为了减少动物疼痛满足动物福利的要求，也是为了保证动物手术顺利进行。目前注射麻醉在我国的动物麻醉中最为普遍，其优点是不需要昂贵的设备，只需要注射器就行，但麻醉剂注射动物后，必须经肝脏代谢完后，动物才苏醒；剂量过大会造成动物麻醉过度死亡，剂量过小动物不能进入麻醉状态或进入麻醉状态比较慢。在发达国家，气体吸入式的麻醉非常普遍，与传统的药物注射麻醉方式相比，具有以下显著的共同优点： 动物进入麻醉状态较 ...

摘要：动物模型是现代生命科学研究的重要工具，特别是基因工程小鼠和大鼠，在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来，制备动物模型的基因修饰技术层出不穷，这不仅包括传统ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9，还有TetraOneTM 基因敲除新技术。我们将对这四种技术的原理、特点、缺陷、未来发展趋势作系统的介绍和对比，供您的科研选择参考。1、传统ES打靶基因敲除：技术成熟、修饰准确、效 ...

摘要：动物模型是现代生命科学研究的重要工具，特别是基因工程小鼠和大鼠，在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来，制备动物模型的基因修饰技术层出不穷，这不仅包括传统ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9，还有TetraOneTM 基因敲除新技术。本文将对这四种技术的原理、特点、缺陷、未来发展趋势作系统的介绍和对比，并辅以具体案例说明。自25年前小鼠胚胎干细胞（ESC）发现以来，科学 ...

1、实验器材（从左到右）：第一行：干棉球、酒精棉球、10％水合氯醛＋注射器、碘伏＋棉签第二行：三种不同粗细的鱼线（鱼线最好在2.0、2.5mm处各用记号笔作好标记，便于观察进入距离）、弯盘内为手术器材第三行：记号笔、自制拉钩（皮筋+曲别针＋大头针）2、麻醉：可用饮料瓶自制捕鼠器（适用于不敢手抓大鼠的），用于打麻药，根据大鼠的重量选择不同粗细的饮料瓶（太粗了大鼠可在瓶中回头）。效果图3、麻倒后绑在手术台上4、剪去颈前的鼠毛，碘伏消毒。5 ...

器材：充裕版：通风橱、手术剪、小止血钳、眼科镊、眼科剪、小咬骨钳、手术刀柄及刀片简易版：手术剪、小止血钳、眼科镊、眼科剪（这次操作用的这套东西）1. 剥离颅骨及脊柱周围的肌肉2. 由脊髓下段的缺口开始咬开并去除椎板3. 暴露出整个脊髓背侧4. 眼科剪剪开脊髓周围的脊膜及背根节，剥离出脊髓5. 同上6. 剪去残余的椎骨7. 由枕骨大孔处入路掀开咬除颅骨8. 继续9. 继续10. 暴露嗅球11. 咬除侧面的骨板，清理小脑绒球周围的组织，剥离出绒球12. 清理小脑绒球周围的组织 ...

用钩镊再眼眶处固定大鼠颅骨，用组织剪再颅骨和颈椎连接处剪断。组织剪头部伸入枕骨大孔，尽量贴着骨头。组织剪从枕骨大孔处伸入，朝向同侧眼眶方向，贴着骨头剪，剪到眼眶。右侧同上从大鼠眼眶之间剪断左手持钩镊插入大鼠的眼眶固定颅骨（有点残忍），用弯钳直接夹住枕骨大孔处的骨头，直接就掀起来了，完整的脑组织就显现出来了，下图为灌注后的脑组织。从小脑处将脑组织向上推起，用小剪刀剪断脑神经。最后向为医学献身的动物们致敬！

灌注固定主要用于神经系统，其他组织意义不是很大，而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好！小鼠灌注：灌流固定小鼠时我一般采用输液器的针头(4号半，这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白，针头要从心轴方向进针，刺入心尖3~4毫米左右就可以了，开始灌流后剪破右心耳，约40毫升生理盐水，后再灌流约20毫升多聚甲醛，整个灌流固定的过程就完成了。大鼠灌注：按大鼠体重，用2%戊巴比妥钠（0.25ml/100g）进行腹腔注射麻醉，开胸 ...

在大鼠腹部正中行纵行切口，2－3cm即可。胰腺是散在的，不是一个完整的器官。在胃，肝脏，小肠之间，如下图所示的淡黄色偏白的组织，你只能一点一点把 它取下来，注意和脂肪细胞区别，脂肪细胞和它很像，但是仔细看，胰腺每个小团块都有分叶，就是和胰腺病理一样的花纹，但是，脂肪细胞就没有，而是一团淡白色的组织。进针的地方就是这张图我用箭头指向的那个点。有个找位置的窍门，轻轻捏起十二指肠，展开胰腺，对着灯光，隐约可以看到有一条细细的透明 ...

我做的实验是关于肿瘤的，其中一部分内容就是关于皮下成瘤和尾静脉注射肿瘤细胞看肿瘤肺转移成瘤情况，分为实验组（下调某基因）和对照组（空质粒）！其他的方面我先咱不谈，先谈谈关于尾静脉注射的经验和心得吧，希望能对对此实验困惑的同志以帮助吧！我们实验都是拿裸鼠做的，预实验是我扎了一只，打了4-5 针一针都没进，后来让我们科的一个护士来扎都扎不进去！并且让人倍感压力的是实验组和对照组要对比，所以要求打进的肿瘤细胞量得一致！小老 ...

【实验目的】 １. 观察消化道平滑肌的收缩性、自动节律性、伸展性等生理特性。 ２． 学习胃肠推进性运动实验方法，并观察药物对其影响。 ３． 学习离体消化道平滑肌实验方法，观察理化因素、药物对离体消化道平滑肌特性的影响，并分析药物的作用机制。 【实验原理】 消化道平滑肌具有肌肉的一般特性，如兴奋性和收缩性，同时还有其自身的特殊性，表现为自动节律性、伸展性，并能产生推进性运动，对化学物质、温度变化、牵张刺激等的影响较敏感，还受神经、体液因素的调节。副交感神 ...

【实验目的】 １． 学习幽门螺杆菌小鼠模型的建立方法。 ２． 掌握细菌染色——Warthin-Starry硝酸银染色方法。 ３． 了解荧光定量PCR检测原理。 【实验原理】 胃细菌学的研究，长期以来是一个被忽视的领域。1983年Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者胃黏膜活检标本中分离到幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp），是对这一领域重要的突破，它的发现对消化病学、特别是胃十二指肠病学的发展起了极大的推动作用。现在已经 ...

【实验目的】 1. 本实验通过复制急性实验性DIC动物模型。 2. 测定几项血液学指标，观察DIC时血液凝固性变化，并分析这些变化的原因和急性DIC的发病机制。 3. 了解急性DIC的实验室检查方法。 【实验原理】 DIC是指在某些致病因子作用下，凝血因子和血小板被激活，引起血管内微血栓形成，同时或继发纤溶亢进，从而出现器官功能障碍的病理过程。在DIC发生发展过程中，各种凝血因子和血小板因大量消耗而明显减少，纤维蛋白降解产物（FDP）增多，引起出血 ...